一种真核基因表达启动子及其表达载体和应用制造技术

技术编号:28609710 阅读:24 留言:0更新日期:2021-05-28 16:03
本发明专利技术提供一种真核基因表达启动子及其表达载体和应用。所述真核基因表达启动子具有如(I)、(II)或(III)所述的核苷酸序列中的任意一个:(I)编码RPS家族表达启动子的核苷酸序列;(II)如(I)所述的核苷酸序列经修饰、取代或突变至少一个核苷酸获得的核苷酸序列;(III)与(I)所述的核苷酸序列具有≥90%同源性的核苷酸序列。本发明专利技术中提供的表达启动子不含潜在起始翻译序列,从根本上消除了非目的翻译起始;同时,所述启动子能够驱动外源基因的表达,利用其构建的表达载体在不同细胞中均能实现目的基因的高效表达,因此,该启动子在临床基因治疗领域具有广泛的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种真核基因表达启动子及其表达载体和应用
本专利技术涉及基因工程领域,具体涉及一种真核基因表达启动子及其表达载体和应用,尤其涉及一种可用于基因治疗的新型真核基因表达启动子及其载体。
技术介绍
真核基因的外源表达不仅是生命科学研究领域的基本基因操作手段,也是临床基因治疗用的主要策略。启动子(Promoter)是RNA聚合酶识别、结合和开始转录的一段DNA序列,它含有RNA聚合酶特异性结合和转录起始所需的保守序列,多数位于结构基因转录起始点的上游且本身不被转录。转录的起始是基因表达的关键阶段,而这一阶段的重要问题是RNA聚合酶与启动子的相互作用:启动子的结构影响了它与RNA聚合酶的亲和力,从而影响了基因表达的水平。当前已有不少启动子被应用到基因操作中,如CMV、EF1apro、UBCpromoter、PGKpromoter、肝脏特异的Alb启动子、造血细胞特异的Vav启动子等。然而,这些启动子往往存在以下缺陷:(1)在不同种细胞类型中表达差异极大,比如CMV在胚胎干细胞ESC中活性很低;(2)UBC启动子的整体表达效率比CM本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种真核基因表达启动子,其特征在于,所述真核基因表达启动子具有如(I)、(II)或(III)所述的核苷酸序列中的任意一个:/n(I)编码RPS家族表达启动子的核苷酸序列;/n(II)如(I)所述的核苷酸序列经修饰、取代或突变至少一个核苷酸获得的核苷酸序列;/n(III)与(I)所述的核苷酸序列具有≥90%同源性的核苷酸序列。/n

【技术特征摘要】
1.一种真核基因表达启动子,其特征在于,所述真核基因表达启动子具有如(I)、(II)或(III)所述的核苷酸序列中的任意一个:
(I)编码RPS家族表达启动子的核苷酸序列;
(II)如(I)所述的核苷酸序列经修饰、取代或突变至少一个核苷酸获得的核苷酸序列;
(III)与(I)所述的核苷酸序列具有≥90%同源性的核苷酸序列。


2.根据权利要求1所述的真核基因表达启动子,其特征在于,所述RPS家族表达启动子包括RPS27启动子、RPS18启动子或RPS6启动子中的任意一种,优选为RPS6启动子。


3.根据权利要求1或2所述的真核基因表达启动子,其特征在于,所述真核基因表达启动子具有编码RPS6启动子的核苷酸序列和/或RPS6启动子经修饰、取代或缺失至少一个核苷酸获得的核苷酸序列。


4.根据权利要求1~3任一项所述的真核基因表达启动子,其特征在于,所述真核基因表达启动子具有RPS6启动子经取代四个核苷酸后的核苷酸序列;
优选地,所述取代发生的位点分别为T384A、A396G、A535G和A557G;
...

【专利技术属性】
技术研发人员:张磊王文天张文慧杨仁池薛峰池颖李慧媛
申请(专利权)人:中国医学科学院血液病医院中国医学科学院血液学研究所
类型:发明
国别省市:天津;12

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