黄柄曲霉及其在制备单宁酶和降解单宁中的应用制造技术

本发明专利技术属于单宁降解技术领域，具体涉及一种黄柄曲霉及其在制备单宁酶和降解单宁中的应用。针对目前单宁酶产量低、降解单宁产鞣花酸无法工业化生产的问题，本发明专利技术提供了一种黄柄曲霉或其菌剂在制备单宁酶和降解单宁中的应用。本发明专利技术还同时给出了上述黄柄曲霉或其菌剂降解单宁的方法，步骤为：将上述黄柄曲霉和/或上述菌剂与含有单宁的样品进行发酵。另外，本发明专利技术还通过了一种黄柄曲霉，保藏编号为GDMCC No.61426。本发明专利技术提供的黄柄曲霉能够高效生产单宁酶，且酶解反应的条件具有广泛的pH适应性，从而能够在短时间内高效催化单宁的降解，能够有效提高经济效益。

【技术实现步骤摘要】
黄柄曲霉及其在制备单宁酶和降解单宁中的应用
本专利技术属于单宁降解
，具体地，涉及一种黄柄曲霉及其在制备单宁酶和降解单宁中的应用。
技术介绍
单宁酶广泛存在于微生物、植物、动物体内，用以水解大分子单宁等。单宁酶的应用广泛，在食品工业中最为突出，其可用于除去天然食品中因单宁而引起的苦涩味，啤酒和果汁的澄清、防止果酒和果汁中酚类引起的变质、咖啡风味的软饮料生产、麦芽多酚的稳定处理、葡萄酒风味的改进以及作为测定天然没食子酸酯类结构的一种灵敏的分析探针。鞣花单宁在单宁酶作用下酶解生成的产物鞣花酸，属多酚二内酯，具备抗氧化、抗病毒、抗癌等作用，目前已广泛应用于食品、医疗及制药行业。鞣花酸广泛存在于植物各组织中，但游离形式存在的鞣花酸含量极低，需要将植物进行生物酶解后才能够获得利用价值高的鞣花酸。讲解单宁产鞣花酸成为目前获取鞣花酸的主要途径。但是，单宁酶的来源较为匮乏，受到野生菌株本身单宁酶产量低、酶活低、酶解机制复杂的限制，目前生物降解单宁生产鞣花酸还无法有效的实现工业化生产。因此，开发能够产生单宁酶进而降解单宁产鞣花酸的微生物菌种是目前亟待解决的问题。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题为：单宁酶产量低、降解单宁产鞣花酸无法工业化生产，需要开发产单宁酶的微生物的问题。本专利技术解决上述技术问题的技术方案为：提供了一种黄柄曲霉或其菌剂在制备单宁酶和/或降解单宁中的应用。其中，上述应用中，所述黄柄曲霉的保藏编号为GDMCCNo.61426。保藏时间为2021年1月11日，保藏地为广东省微生物菌种保藏中心，地址为：中国广州市先烈中路100号省微生物所实验楼五楼，邮政编码：510070。其中，上述黄柄曲霉的ITS核苷酸序列如SEQIDNO:1所示。SEQIDNO:1黄柄曲霉的ITS核苷酸序列TTTTACATACAGCATCTAGTTAACCCTTTATCCGTGAACTGCGAAGGCTCATTAAATCAGTTATCGTTTATTTGATAGTCCCTTACTACATGGATACCTGTGGTAATTCTAGAGCTAATACATGCTAAAAACCCCGACTTCGGAAGGGGTGTATTTATTAGATAAAAAACCAATGCCCTTCGGGGCTCCTTGGTGATTCATAATAACTTAACGAATCGCATGGCCTTGCGCCGGCGATGGTTCATTCAAATTTCTGCCCTATCAACTTTCGATGGTAGGATAGTGGCCTACCATGGTGGCAACGGGTAACGGGGAATTAGGGTTCGATTCCGGAGAGGGAGCCTGAGAAACGGCTACCACATCCAAGGAAGGCAGCAGGCGCGCAAATTACCCAATCCCGACACGGGGAGGTAGTGACAATAAATACTGATACGGGGCTCTTTTGGGTCTCGTAATTGGAATGAGTACAATTTAAATCCCTTAACGAGGAACAATTGGAGGGCAAGTCTGGTGCCAGCAGCCGCGGTAATTCCAGCTCCAATAGCGTATATTAAAGTTGTTGCAGTTAAAAAGCTCGTAGTTGAACCTTGGGTCTGGCTGGCCGGTCCGCCTCACCGCGAGTACTGGTCCGGCTGGACCTTTCCTTCTGGGGAATCCCATGGCCTTCACTGGCTGTGGGGGGAACCAGGACTTTTACTGTGAAAAAATTAGAGTGTTCAAAGCAGGCCTTTGCTCGAATACATTAGCATGGAATAATAGAATAGGACGTGCGGTTCTATTTTGTTGGTTTCTAGGACCGCCGTAATGATTAATAGGGATAGTCGGGGGCGTCAGTATTCAGCTGTCAGAGGTGAAATTCTTGGATTTGCTGAAGACTAACTACTGCGAAAGCATTCGCCAAGGATGTTTTCATTAATCAGGGAACGAAAGTTAGGGGATCGAAGACGATCAGATACCGTCGTAGTCTTAACCATAAACTATGCCGACTAGGGATCGGGCGGTGTTCAATTGATGACCCGCTCGGCACCTTACGAGAAATCAAAGTTTTTGGGTCTGGGGAGTTT。进一步的，上述应用中，所述菌剂为含有黄柄曲霉的菌剂。更进一步的，所述菌剂为含有保藏编号为GDMCCNo.61426的黄柄曲霉的菌剂。进一步的，上述应用中，所述菌剂含有黄柄曲霉的活菌体、死菌体或发酵清液中的至少一种。其中，所述发酵清液的制备方法为：将黄柄曲霉进行发酵培养得到发酵液，发酵液固液分离得到发酵清液；所述固液分离采用离心分离的方式，离心转速为7000～12000rpm，时间为10～20min，温度为0～10℃；所述发酵培养接种量为1×103～1×106CFU/mL，转速为150～200rpm，温度为30～40℃，时间为70～100h。本专利技术第二方面还提供了一种上述黄柄曲霉或其菌剂降解单宁的方法，包括以下步骤：将黄柄曲霉或其菌剂与含有单宁的样品进行发酵。其中，所述发酵时的条件为：pH为3～6、温度为25～40℃、转速为150～200rpm、时间为40～60h；所述发酵清液与样品的体积比为1～3︰1。进一步的，所述含有单宁的样品中单宁含量为5～10g/L。本专利技术第三方面还提供了一种黄柄曲霉。所述的黄柄曲霉，保藏编号为GDMCCNo.61426。进一步的，所述的黄柄曲霉的ITS核苷酸序列如SEQIDNO:1所示。本专利技术第四方面还提供了一种菌剂，该菌剂含有上述的黄柄曲霉。优选的，所述菌剂含有所述黄柄曲霉的活菌体、死菌体或发酵清液中的至少一种。其中，上述发酵清液的制备方法为：将黄柄曲霉进行发酵培养得到发酵液，发酵液固液分离得到发酵清液。进一步的，所述的固液分离采用离心分离的方式，离心转速为7000～12000rpm，时间为10～20min，温度为0～10℃。更进一步的，发酵培养接种量为1×103～1×106CFU/mL，转速为150～200rpm，温度为30～40℃，时间为70～100h。本专利技术的有益效果为：本专利技术通过大量试验，创造性的发现了黄柄曲霉能够产生单宁酶并能够发酵单宁，因此提供了一种黄柄曲霉在制备单宁酶和降解单宁中的新应用。基于此，本专利技术还筛选得到了一株新的黄柄曲霉菌株，保藏编号为GDMCCNo.61426，本专利技术的菌株在制备单宁酶和降解单宁中具有很好的效果，经发酵培养得到的发酵清液中单宁酶的酶活性较高，对鞣花单宁的特异性转化能力强，本专利技术的菌株产鞣花酸的转化率最高为73.63％，鞣花酸产率最高为65.8％，具有很好的应用价值。本专利技术的黄柄曲霉中的单宁酶对鞣花单宁进行酶解的步骤简便，具有广泛的pH和温度的耐受性，酶解效率高。本专利技术提供的菌株为黄柄曲霉Aspergillusflavipes，已本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.黄柄曲霉或其菌剂在制备单宁酶和/或降解单宁中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.黄柄曲霉或其菌剂在制备单宁酶和/或降解单宁中的应用。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述黄柄曲霉的保藏编号为GDMCCNo.61426。


3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述黄柄曲霉的ITS核苷酸序列如SEQIDNO:1所示。


4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述菌剂为含有黄柄曲霉的菌剂。


5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述菌剂含有黄柄曲霉的活菌体、死菌体或发酵清液中的至少一种。


6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述发酵清液的制备方法为：将黄柄曲霉进行发酵培养得到发酵液，发酵液固液分离得到发酵清液；所述固液分离采用离心分离的方式，离心转速为7000～12...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘淼，黄和，沈才洪，王文慧，王松涛，薛国利，童钰琴，宋萍，牛曼思，张蕾，
申请(专利权)人：泸州品创科技有限公司，南京师范大学，
类型：发明
国别省市：四川;51