包含变体RpoC编码序列的核酸分子制造技术

公开了包含变体rpoC编码序列的核酸分子。变体rpoC编码序列编码调控质粒的拷贝数的变体RpoC。还公开了包含该核酸分子的重组微生物、用于调控重组微生物中的对象载体的拷贝数的方法以及通过使用该重组微生物制备目标产物的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】包含变体RpoC编码序列的核酸分子
本专利技术涉及包含变体rpoCRNA聚合酶β'亚基蛋白编码序列(也称为“变体rpoC编码序列”)的核酸分子，其中变体rpoC编码序列编码变体RpoCRNA聚合酶β'亚基蛋白(也称为“变体RpoC”)，并且变体RpoC调控质粒的拷贝数。
技术介绍
质粒在生物技术中具有重要作用，提供用于引入、修饰和从微生物去除目标基因以及用于生产由目标基因编码的相应蛋白质的手段。质粒是在细菌、古细菌和真核生物域的多种微生物中天然存在的、与其所在的微生物的染色体物理上分开并且独立于染色体复制的核酸分子。质粒通常是双链环状DNA分子，但也可以是线性DNA分子和/或RNA分子。质粒以约1kb至大于2Mb的尺寸范围存在。例如，根据Shintanietal.，FrontiersinMicrobiology6:242(2015)的最新综述论文，在GenBank数据库中发现的4602种质粒中观察到宽泛变异的尺寸，其中质粒的尺寸范围为744bp至2.58Mb，并且平均尺寸为80kb。质粒还以一定范围的拷贝数/细胞存在。例如，质粒总体上被表征为低本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.核酸分子，所述核酸分子包含变体rpoC RNA聚合酶β'亚基蛋白编码序列(变体rpoC编码序列)，其中：/n所述变体rpoC编码序列编码变体RpoC RNA聚合酶β'亚基蛋白(变体RpoC)；并且/n所述变体RpoC包含R47C取代，其中所述R47C取代的编号基于大肠埃希氏菌(Escherichia coli)的野生型RpoC RNA聚合酶β'亚基蛋白(野生型RpoC)来限定。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180807 US 62/715,5301.核酸分子，所述核酸分子包含变体rpoCRNA聚合酶β'亚基蛋白编码序列(变体rpoC编码序列)，其中：
所述变体rpoC编码序列编码变体RpoCRNA聚合酶β'亚基蛋白(变体RpoC)；并且
所述变体RpoC包含R47C取代，其中所述R47C取代的编号基于大肠埃希氏菌(Escherichiacoli)的野生型RpoCRNA聚合酶β'亚基蛋白(野生型RpoC)来限定。


2.根据权利要求1所述的核酸分子，其中相对于包含SEQIDNO:26的野生型RpoC的表达，所述变体RpoC的表达使质粒的拷贝数减少。


3.根据权利要求1所述的核酸分子，其中所述变体RpoC包含：
(1)包含SEQIDNO:28的N端结构域；
(2)包含SEQIDNO:29的中央结构域；和
(3)包含SEQIDNO:30的C端结构域；
其中所述R47C取代存在于所述N端结构域内。


4.根据权利要求1所述的核酸分子，其中所述变体RpoC包含：
(1)包含SEQIDNO:31的N端结构域；
(2)包含SEQIDNO:32的中央结构域；和
(3)包含SEQIDNO:33的C端结构域；
其中所述R47C取代存在于所述N端结构域内。


5.根据权利要求1所述的核酸分子，其中所述变体RpoC包含与SEQIDNO:27具有至少90％同一性的氨基酸序列。


6.根据权利要求1所述的核酸分子，其中所述变体RpoC包含SEQIDNO:27。


7.载体，所述载体包含根据权利要求1至6中任一项所述的核酸分子。


8.重组微生物，所述重组微生物包含根据权利要求1至6中任一项所述的核酸分子。


9.根据权利要求8所述的重组微生物，其中：
所述重组微生物通过转化、接合或转导中的一种或多种而将包含所述核酸序列的rpoC编码序列载体引入前体微生物中来制备；或
所述重组微生物包含染色体，并且所述变体rpoC编码...

【专利技术属性】
技术研发人员：李知宣，张东银，金素影，
申请(专利权)人：CJ第一制糖株式会社，
类型：发明
国别省市：韩国;KR