一种低温活性提高的外切菊粉酶突变体MutDP121ET6制造技术

本发明专利技术公开了一种低温活性提高的外切菊粉酶突变体MutDP121ET6，该突变体MutDP121ET6具有如SEQIDNO.1所示的氨基酸序列。与野生酶InuAMN8相比，突变酶MutDP121ET6的热活性和热稳定性发生了改变，突变酶MutDP121ET6在低温下具有更高的活性，而热稳定性降低，低温活性提高有利于在低温反应时减少酶的用量或缩短反应时间，热稳定性变差有利于通过热处理控制酶的反应过程。55℃处理后，野生酶InuAMN8的酶活从70％降至17％，突变酶MutDP121ET6的酶活从74％降至8％。本发明专利技术的低温外切菊粉酶突变体MutDP121ET6可应用于食品、酿酒和洗涤等行业。业。业。

【技术实现步骤摘要】
一种低温活性提高的外切菊粉酶突变体MutDP121ET6


[0001]本专利技术涉及一种外切菊粉酶突变体，具体涉及一种低温活性提高的外切菊粉酶突变体MutDP121ET6。

技术介绍

[0002]菊芋在我国的大部分地区都可以种植，是一种高密度的非粮能源作物，耐旱、耐贫瘠、耐盐碱、产量高。菊芋块茎的干物质中，菊粉含量可高达70％，这些特点使菊芋的有效利用成为关注的焦点。
[0003]菊粉是由果糖聚合而成的多糖，经外切菊粉酶水解，可得到糖含量高达95％的果糖浆。果糖广泛用于食品、医药、生物能源等行业，可作为天然甜味剂替代蔗糖，可以供糖尿病患者食用，可作为原料用来生产生物乙醇等。因而，外切菊粉酶可应用于食品、酿酒和生物能源等行业中(Singh RS et al.International Journal of Biological Macromolecules,2017,96:312
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322)。
[0004]具有低温活性的酶制剂可应用于低温生境和低温加工过程，如清酒和葡萄酒的发酵温度、水产养殖环境、洗涤、污水处理通本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种低温活性提高的外切菊粉酶突变体MutDP121ET6，其特征在于，该突变体MutDP121ET6具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。2.如权利要求1所述的突变体MutDP121ET6的编码基因mutDP121ET6。3.根据权利要求2所述的编码基因mutDP121ET6，其特征在于，所述编码基因mutDP121ET6具有如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。4.包含如权利要求2或3所述的编码基因mutDP121ET6的重组载体。5.包含如权利要求2或3所述的编码基因mutDP121ET6的重组菌。6.如权利要求1所述的突变体MutDP121ET6的制备方法，其特征在于，该方法包含：将具有如SEQ ID NO.4所示核苷酸序列的野生外切菊粉酶基因inuAMN8和表达载体pEasy
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E1相连接，获得包含inuAMN8的重组表达质粒pEasy
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E1
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inuAMN8；以质粒pEasy
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E1
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inuAMN8为模板，以如SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示核苷酸序列的突变引物，通过PCR扩增得到包含mutDP121ET6的重组表达质粒pEasy
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E1

【专利技术属性】
技术研发人员：张蕊，周峻沛，黄遵锡，岑潇龙，许波，韩楠玉，唐湘华，李俊俊，吴倩，高艳秀，
申请(专利权)人：云南师范大学，
类型：发明
国别省市：