菌毛蛋白的制备方法技术

本申请提供了菌毛蛋白的制备方法，包括以下步骤：重组表达包含菌毛蛋白和绿色荧光蛋白的融合蛋白，其中绿色荧光蛋白位于菌毛蛋白的C端一侧；以及利用含0.2M NaCl、0.1M BIS‑TRIS、25％PEG 3350且pH为5.5的溶液，将所述融合蛋白沉淀。本申请还提供了通过所述方法制备的菌毛蛋白。

【技术实现步骤摘要】
菌毛蛋白的制备方法专利
本申请大体涉及蛋白质工程领域，具体而言，本申请提供了菌毛蛋白的制备方法以及由此方法制备的菌毛蛋白，特别是，由此方法制备的菌毛蛋白能够组装为菌毛。专利技术背景菌毛(Pilus)是很多种细菌具有的一种生理结构，其由菌毛蛋白(Pilin)组成。大体而言，菌毛蛋白的结构可以分为N端侧的α螺旋区以及C端侧的球蛋白区，α螺旋区参与菌毛的组装，球蛋白区的氨基酸序列无保守性，高度可变。某些细菌，例如硫还原地杆菌(Geobactersulforeducens)的菌毛蛋白甚至完全缺失球蛋白区。菌毛蛋白的α螺旋区可以进一步分为高度保守区域和可变区域两部分，前者的氨基酸序列在不同细菌物种间几乎不变，以疏水性氨基酸为主；后者则无明显保守性。在自然界中，菌毛还可以是天然存在可用作电子材料的生物大分子，例如，多种环境细菌通过其菌毛与金属(三价铁为主)接触，并通过细胞外电子传递(EET)溶解金属矿石获取能量。直径几纳米、长度几十微米的菌毛在EET中起到了导线的作用，被称为细菌纳米导线，又因为其由菌毛蛋白组装而成，被称为蛋白质纳米导线(PrN本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.菌毛蛋白的制备方法，包括以下步骤：/n重组表达包含菌毛蛋白和绿色荧光蛋白的融合蛋白，其中绿色荧光蛋白位于菌毛蛋白的C端一侧；以及/n利用含0.2M NaCl、0.1M BIS-TRIS、25％PEG 3350且pH为5.5的溶液，将所述融合蛋白沉淀。/n

【技术特征摘要】
1.菌毛蛋白的制备方法，包括以下步骤：
重组表达包含菌毛蛋白和绿色荧光蛋白的融合蛋白，其中绿色荧光蛋白位于菌毛蛋白的C端一侧；以及
利用含0.2MNaCl、0.1MBIS-TRIS、25％PEG3350且pH为5.5的溶液，将所述融合蛋白沉淀。


2.如权利要求1所述的方法，其中所述菌毛蛋白为全长形式的菌毛蛋白。


3.如权利要求1或2所述的方法，其中所述菌毛蛋白来源于硫还原地杆菌(Geobactersulforeducens)、乙酸氧化脱硫单胞菌(Desulfuromonasacetoxidans)、奥达希瓦氏菌(Shewanellaoneidensis)、巴氏芽孢梭菌(Clostridiumpasteurianum)或金属还原地杆菌(Geobactermetallireducens)。


4.如权利要求1-3中任一项所述的方法，其中...

【专利技术属性】
技术研发人员：王伊，张蕾，董亚南，周伟，张东伟，
申请(专利权)人：光武惠文生物科技北京有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11