一种场外强化机械球磨法辅助盐溶提取牡蛎中含硒蛋白质的方法技术

本发明专利技术属于蛋白质提取技术领域，具体涉及一种场外强化机械球磨法辅助盐溶提取牡蛎中含硒蛋白质的方法，包括以下步骤：(1)制备牡蛎冻干粉样品；(2)机械球磨法辅助盐溶法制备含硒蛋白质提取液；称取牡蛎冻干粉样品，加入NaCl溶液中，使用机械球磨辅助，得到提取液；(3)对步骤(2)得到的提取液进行离心处理，取上清液加入过饱和硫酸铵，并放置在4℃冰箱里静置过夜；再对上清液进行离心处理得到沉淀；(4)将步骤(3)得到的沉淀转移到透析袋中进行透析，对透析后的透析液进行冷冻干燥，即可得到含硒蛋白质粉。本发明专利技术的场外强化机械球磨法辅助盐溶提取牡蛎中含硒蛋白质的方法，可以有效缩短提取牡蛎中含硒蛋白质的时间，具有较好的市场应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种场外强化机械球磨法辅助盐溶提取牡蛎中含硒蛋白质的方法
本专利技术属于蛋白质提取
，具体涉及一种场外强化机械球磨法辅助盐溶提取牡蛎中含硒蛋白质的方法。
技术介绍
牡蛎，也叫生蚝、蛎黄等，使一种温水性的生鲜，其外硬内软，是地球上最肥的养殖双壳贝类。牡蛎除有食用价值，还具有养血、滋阴、抗氧化和增强免疫力等药用价值。牡蛎的肉非常的嫩且滑，营养充足，含有糖原、蛋白质、维生素、脂肪以及锌、硒、铜等微量元素。其中蛋白质的含量最多，可以达到51％左右，因此有“海底牛奶”之称。硒是人体必需的痕量元素，可以维持细胞正常作用于机体。硒主要以硒蛋白的状态融入人体的生命活动中，可以抑制自由基氧化，加强免疫力。牡蛎中富含大量的硒元素，这些硒元素大量的存在于蛋白质中。对存在有硒的蛋白质我们称为蛋白硒或硒蛋白。由于硒蛋白形态不稳定，因此需要选择合适的方法进行提取。常用的蛋白质的提取方法有水溶法、盐溶法、酶溶法和碱溶法。韩扬等用碱提法提取燕麦麸皮蛋白实验中发现，在高碱条件下，产生了游离的物质，这些物质会在一定条件下发生颜色改变，不利于观察现象，而且对水解液造成不良影响。还有研究表明，提取蛋白质时，提取液浓度过高，会导致蛋白质中的某种氨基酸相互发生反应，使得蛋白质难以溶出，改变蛋白质的质与量，从而影响蛋白质的作用，使得蛋白质溶出率降低。酶溶法，可以在生物体内产生，能使蛋白质水解成钛和氨基酸，可以加强与改进它的溶解、乳化、起泡等性质，也可以防止酸式水解与碱式水解去破坏与变旋氨基酸，来确保蛋白质的质量。相较而言，酶溶法比碱溶法好，但是酶溶法操作复杂，步骤多，实验时间长。盐溶法使用的溶剂是氯化钠，以含硒蛋白质提取比为考察指标，运用单因素实验和正交试验分别对提取时间、提取温度和提取液浓度3个因素进行考察，最终确定最佳的提取工艺为：提取温度35℃，提取时间10.00h，NaCl的质量浓度为0.6000mol/L。氯化钠属于中性溶液，来源方位广，价格廉价，提取的蛋白质含量较高，但提取时间较长。公开于该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
技术实现思路
本专利技术的目的是在于提供一种场外强化机械球磨法辅助盐溶提取牡蛎中含硒蛋白质的方法，以缩短盐溶法提取牡蛎中含硒蛋白质的时间。为了实现上述目的，本专利技术提供了如下技术方案：一种场外强化机械球磨法辅助盐溶提取牡蛎中含硒蛋白质的方法，包括以下步骤：(1)制备牡蛎冻干粉样品；将新鲜牡蛎清洗、滤水、预冻、冷冻干燥并粉碎成粉末状得到牡蛎冻干粉样品，冷藏保存备用；(2)机械球磨法辅助盐溶法制备含硒蛋白质提取液；称取牡蛎冻干粉样品，加入质量浓度为0.6000mol/L的NaCl溶液中，使用机械球磨辅助，得到提取液；(3)对步骤(2)得到的提取液进行离心处理，取上清液加入过饱和硫酸铵，并放置在4℃冰箱里静置过夜；再对上清液进行离心处理得到沉淀；(4)将步骤(3)得到的沉淀转移到透析袋中进行透析，对透析后的透析液进行冷冻干燥，即可得到含硒蛋白质粉。作为优选，步骤(2)中称取的牡蛎冻干粉样品与加入的质量浓度为0.6000mol/L的NaCl溶液的料液质量比为1：40。作为优选，步骤(2)中机械球磨的球磨转速为100-400r/min，球磨温度为10-45℃。作为优选，步骤(2)中称取物牡蛎冻干粉样品的质量与球磨珠子的质量比为1:8-12。作为优选，步骤(3)中提取液在温度为4.00℃、转速10000r/min的情况下离心处理10.00min。作为优选，步骤(2)中使用机械球磨辅助制备提取液，球磨转速为300r/min，球磨温度为30℃。作为优选，步骤(2)中使用机械球磨辅助制备提取液，牡蛎冻干粉样品质量同球磨珠子质量比为1:10，球磨时间为0.5-7h。与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：本专利技术的场外强化机械球磨法辅助盐溶提取牡蛎中含硒蛋白质的方法，在盐溶法提取牡蛎中含硒蛋白质的基础上，添加机械球磨辅助，并对球磨温度、球磨转速、球磨时间以及牡蛎冻干粉样品的质量与球磨珠子的质量比进行多组实验，得出在球磨温度为30℃、球磨转速为300r/min、球磨提取时间为5h以及牡蛎冻干粉样品的质量与球磨珠子的质量比为1:10的情况下，较现有的盐溶法提取牡蛎中含硒蛋白质的时间缩短一半，可以有效缩短提取牡蛎中含硒蛋白质的提取时间。具体实施方式下面对本专利技术专利的技术方案进行清楚、完整的描述，显然，所描述的实施例是本专利技术的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域所属的技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例一种场外强化机械球磨法辅助盐溶提取牡蛎中含硒蛋白质的方法，包括以下步骤：(1)制备牡蛎冻干粉样品；将新鲜牡蛎清洗、滤水、预冻、冷冻干燥并粉碎成粉末状得到牡蛎冻干粉样品，冷藏保存备用；(2)机械球磨法辅助盐溶法制备含硒蛋白质提取液；称取牡蛎冻干粉样品，加入质量浓度为0.6000mol/L的NaCl溶液中，称取的牡蛎冻干粉样品与加入的质量浓度为0.6000mol/L的NaCl溶液的料液质量比为1：40；使用机械球磨辅助，在球磨转速为300r/min、球磨温度为30℃、球磨时间为5.0h以及称取物牡蛎冻干粉样品的质量与球磨珠子的质量比为1:10的情况下，得到提取液；(3)对步骤(2)得到的提取液在温度为4.00℃、转速10000r/min的情况下进行离心处理10.00min，取上清液加入过饱和硫酸铵，并放置在4℃冰箱里静置过夜；再对上清液进行离心处理得到沉淀；(4)将步骤(3)得到的沉淀转移到透析袋中进行透析，对透析后的透析液进行冷冻干燥，即可得到含硒蛋白质粉。对照例与实施例的区别在于步骤(2)中制备含硒蛋白质提取液时不使用机械球磨辅助。实验例1称取5.000g的牡蛎冻干粉样品，采用本专利技术实施例的方法，在球磨温度为25℃的情况下，分别考察球磨转速在100r/min、200r/min、300r/min和400r/min时，对牡蛎提取的蛋白质中含硒蛋白质的提取率的影响。结果见表1。表1球磨转速对牡蛎提取的蛋白质中含硒蛋白质提取率的影响结果表明，以牡蛎提取蛋白质中含硒蛋白质的提取率为参考指标，当球磨转速为300r/min时，含硒蛋白质提取率最大。实验例2称取5.000g的牡蛎冻干粉样品，采用本专利技术实施例的方法，分别考察球磨温度在10℃、20℃、25℃、30℃、35℃、40℃和45℃时，对牡蛎提取的蛋白质中含硒蛋白质提取率的影响，结果见表2。表2球磨温度对牡蛎提取蛋白质中含硒蛋白质提取率的影响球磨温度(℃)含硒蛋白质提取率(％)10本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种场外强化机械球磨法辅助盐溶提取牡蛎中含硒蛋白质的方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)制备牡蛎冻干粉样品；将新鲜牡蛎清洗、滤水、预冻、冷冻干燥并粉碎成粉末状得到牡蛎冻干粉样品，冷藏保存备用；/n(2)机械球磨法辅助盐溶法制备含硒蛋白质提取液；称取牡蛎冻干粉样品，加入质量浓度为0.6000mol/L的NaCl溶液中，使用机械球磨辅助，得到提取液；/n(3)对步骤(2)得到的提取液进行离心处理，取上清液加入过饱和硫酸铵，并放置在4℃冰箱里静置过夜；再对上清液进行离心处理得到沉淀；/n(4)将步骤(3)得到的沉淀转移到透析袋中进行透析，对透析后的透析液进行冷冻干燥，即可得到含硒蛋白质粉。/n

【技术特征摘要】
1.一种场外强化机械球磨法辅助盐溶提取牡蛎中含硒蛋白质的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)制备牡蛎冻干粉样品；将新鲜牡蛎清洗、滤水、预冻、冷冻干燥并粉碎成粉末状得到牡蛎冻干粉样品，冷藏保存备用；
(2)机械球磨法辅助盐溶法制备含硒蛋白质提取液；称取牡蛎冻干粉样品，加入质量浓度为0.6000mol/L的NaCl溶液中，使用机械球磨辅助，得到提取液；
(3)对步骤(2)得到的提取液进行离心处理，取上清液加入过饱和硫酸铵，并放置在4℃冰箱里静置过夜；再对上清液进行离心处理得到沉淀；
(4)将步骤(3)得到的沉淀转移到透析袋中进行透析，对透析后的透析液进行冷冻干燥，即可得到含硒蛋白质粉。


2.根据权利要求1所述的场外强化机械球磨法辅助盐溶提取牡蛎中含硒蛋白质的方法，其特征在于，步骤(2)中称取的牡蛎冻干粉样品与加入的质量浓度为0.6000mol/L的NaCl溶液的料液质量比为1：40。


3.根据权利要求1所述的场外强化机械球磨法辅助盐溶提取牡蛎中含硒...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁兴唐，张瑞瑞，潘楚丽，梁丽娟，杨雪园，尹艳镇，
申请(专利权)人：北部湾大学，
类型：发明
国别省市：广西;45