一种接种混合丛枝菌根真菌扦插繁育茶苗的方法技术

本发明专利技术涉及茶苗繁育技术领域，尤其是一种接种混合丛枝菌根真菌菌株扦插繁育茶苗的方法。本发明专利技术借助传统茶苗扦插繁育方法，在苗床上撒施高效AM真菌混合菌剂，覆盖心土扦插插穗，扦插70‑90d后喷施植物激素，促进茶苗与AM真菌共生，不但提高了AM真菌对扦插茶苗的的侵染率，从而增强菌根化繁育效果，提高茶苗成活率、发芽率、愈伤组织形成率，还能提高茶苗生长性能如株高、根长等，提高了茶苗繁育质量，生产优质菌根化茶苗，操作性强，适宜普遍推广。

【技术实现步骤摘要】
一种接种混合丛枝菌根真菌扦插繁育茶苗的方法
本专利技术涉及茶苗繁育
，尤其是一种接种混合丛枝菌根真菌扦插繁育茶苗的方法。
技术介绍
茶树(Camelliasinensis(L.)O.Kuntze)属山茶科山茶属茶树种，原产于我国西南，是我国重要的经济作物之一。当前国内茶苗的主要繁育方式为扦插繁育，该法具有可保留母穗优良性状、便于茶园标准化生产及管理等优点；但也存在扦插茶苗存活率低、生长缓慢、生根率低、移栽后适应性差等缺陷。为了提高扦插繁育育苗质量和生产优质茶苗，将其接种上丛枝菌根真菌进行菌根化扦插育苗得到了广泛的研究与尝试。例如：王曙光等(丛枝菌根(AM)对无性繁殖茶苗生长及茶叶品质的影响.植物学报.2002,19(4):462-468)公开了采用温室盆栽试验，分别接种丛枝菌根(AM)真菌Acaulosporalavis(光壁无梗球囊霉,菌号：34)、Glomusmanihot(木薯球囊霉，菌号：38)和Glomuscaledonium(苏格兰球囊酶，菌号：90036),观察AM对枝条繁殖茶苗生长和茶叶品质的影响，试验结果显示：接种AM真菌明显促进了无性繁殖茶苗生长，无论是株高还是地上、地下干重都高于不接种者，且差异达极显著水平；AM对茶树吸收无机元素有明显的促进作用，尤其对P、Ca、Mg等的吸收；接种AM真菌的茶苗根际细菌、放线菌数量和酸性磷酸酶活性都明显高于CK；接种AM真菌还提高了茶叶水浸出物、氨基酸、咖啡碱和茶多酚的浓度，改善了茶叶品质。但是，在该研究中，主要集中于对扦插生根后的茶苗苗木进行接种AM菌剂，即就是研究对于已经拥有根系的茶苗进行促生长研究，而对于扦插插穗无根系期间的促生长作用如何，并未在该研究中得以体现研究；而茶树扦插繁育过程中，对于扦插插穗能否生根，直接关系扦插插穗成活率以及后续的生长质量。再例如：专利号为201310085299.0的丛枝菌根真菌在烟草大面积栽培中的应用方法，采用初始丛枝菌根真菌菌剂单独接种扩繁，每种菌种扩繁后的丛枝菌根的繁殖体孢子密度＞30个/g干土，采用漂浮育苗的方法对烟草进行丛枝菌根真菌菌剂混合接种获得菌根化的烟苗，并将菌根化的烟苗直接应用于大田生产，移栽时进行二次接种；可见，该研究是在种子发芽阶段接种真菌处理，实现种子发芽生根，实现根系浸染真菌；再利用二次补充接种在带有根系的烟苗，实现促生根生长的目的；但该研究也并未开展对扦插插穗无根系期间的促生长作用如何进行研究。为此，本研究者开展了通过接种丛枝菌根真菌促进茶苗扦插繁育育苗的研究，例如：专利申请号为201710942127.9的茶苗菌根化扦插繁育新方法，扦插插穗30d后接种扩繁菌土，在苗床扦插枝条中间开沟，施加菌土，翻土覆盖，接种后期施用少量尿素并喷施联苯菊酯防治茶树虫害，采用的菌种是单一的根内球囊霉或摩西球囊霉，实现对不同品种的扦插茶苗成活率、愈伤组织形成率、发芽率以及后期茶苗生长性能影响研究，得到结果为：达到茶苗成活率最高89.9±4.1％，愈伤组织形成率最高96.7±5.8％，发芽率最高76.0±13.9％，且仅适应特定的茶树树种采用特定的AM真菌的情形。再例如：专利申请号为201910097626.1的提高茶苗田间菌根化扦插繁育效果的方法，通过预先在扦插苗床上撒施扩繁好的AM真菌高效菌株根内根孢囊霉，并在扦插后喷施独角金内脂，从而促进茶苗田间菌根化扦插繁育效果，实现对菌根浸染率大幅度提高，达到94.97±1.5％，成活率达到了99.4±0.23％，改善了茶苗植株生长性能，使得茎高达到22.49±0.59cm，根长10.31±0.35cm，茎秆鲜重比34.07±4.3％，根干鲜重比40.27±3.025％。可见，本研究者已经开展了关于无根系扦插插穗接种AM真菌繁育茶苗的研究，且已经在无根系扦插插穗接种AM真菌繁育茶苗过程中，开展了特定茶树品种适应特定AM真菌、特定AM真菌与特定的植物激素共同作用指定的茶树品种的研究，但对于混合AM真菌与特定植物激素结合改善，改善繁育茶苗菌根化程度和生长性能的研究还未见报道。
技术实现思路
为了解决现有技术中存在的上述技术问题，本专利技术提供一种接种混合丛枝菌根真菌扦插繁育茶苗的方法。具体是通过以下技术方案得以实现的：接种混合丛枝菌根真菌扦插繁育茶苗的方法，采用高效AM真菌混合菌剂撒施在苗床上，覆盖心土，扦插插穗；待扦插70-90d后，喷施植物激素，以促进AM真菌与茶苗共生；所述高效AM真菌混合菌剂是分别以根内根孢囊霉(Rhizophagusintraradices)、摩西斗管囊霉(Funneliformismosseae)、幼套近明囊(Claroideoglomusetunicatum)质量计，按照1:1:1混合而成；且所述物激素为独角金内脂或亚精胺。优选，所述的独角金内酯，在喷施时候的浓度为1.0μmol/L；所述的亚精胺，在喷施时候的浓度为0.10mmol/L。优选，所述的高效AM真菌混合菌剂制备是：采用种植三叶草扩繁菌株方法进行扩繁制备。优选，所述的扩繁菌株方法，包括以下步骤：(1)取黄沙土与河砂按1:1的质量比混合，并辐射灭菌(12kGy)，得基质，待用；(2)将三叶草种子采用质量浓度为10％的NaOH清洗3-5min，蒸馏水洗干净后，用75％酒精浸泡20min，再用蒸馏水洗干净，晾干水分，待用；(3)将步骤(2)所得种子与AM真菌菌剂共同施于步骤(1)所得的基质中，采用无菌水浇水培养12周后，剪掉三叶草地上部分，收集含三叶草根系的土壤，置于阴凉处风干，即得AM真菌菌剂。优选，所述的三叶草为白三叶草。优选，所述的苗床，长为8-10m，宽1.2-1.3m，高20-25cm；且相邻两个苗床之间的间隔为10-15cm。优选，所述的心土为在无杂草或少杂草的荒坡上挖取的黄棕色酸性土壤，其覆盖厚度为3-5cm。优选，所述的插穗，是在采春茶后，取30-50cm长的腋芽作为母穗；将母穗打顶，促使母穗上侧芽萌发，待侧芽长到10-15cm后，剪下侧芽作插穗。优选，所述的扦插插穗是在苗床上采用水浇透至土壤含水量为70-80％，并压实土壤；再按照株距为0.5-1cm，行距为3-5cm扦插插穗；扦插完成后，盖上白色塑料薄膜，采用遮阳网遮阴处理。优选，所述的方法还包括茶圃管理，采用人工除草，喷施1-2次浓度8ml/25Kg的联苯菊酯防治虫害；待茶苗长到第四片叶时，开始追施尿素，且在茶苗生长期内共施2次尿素，每次20kg/亩。与现有技术相比，本专利技术创造的技术效果体现在：经苗床上撒施高效AM真菌混合菌剂，覆盖心土扦插插穗，扦插70-90d后喷施植物激素，增强混合AM真菌对扦插茶苗侵染的能力，提高侵染率，从而改善形成根系的茶苗菌根化程度，增强菌根化繁育效果，提高茶苗生长性能。本专利技术创造主要是采用特定的高效AM真菌混合菌剂与对应的植物激素相结合，再扦插后特定时间段内采用植物激素的喷施处理，达到了增强扦插插穗菌根化程度，提高茶苗生长性能的目的。独脚金内酯：s本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种接种混合丛枝菌根真菌扦插繁育茶苗的方法，其特征在于，采用高效AM真菌混合菌剂撒施在苗床上，覆盖心土，扦插插穗；待扦插70-90d后，喷施植物激素。/n所述高效AM真菌混合菌剂是分别以根内根孢囊霉(Rhizophagus intraradices)、摩西斗管囊霉(Funneliformis mosseae)、幼套近明囊(Claroideoglomus etunicatum)质量计，按照1:1:1混合而成；且所述物激素为独角金内酯或亚精胺。/n

【技术特征摘要】
1.一种接种混合丛枝菌根真菌扦插繁育茶苗的方法，其特征在于，采用高效AM真菌混合菌剂撒施在苗床上，覆盖心土，扦插插穗；待扦插70-90d后，喷施植物激素。
所述高效AM真菌混合菌剂是分别以根内根孢囊霉(Rhizophagusintraradices)、摩西斗管囊霉(Funneliformismosseae)、幼套近明囊(Claroideoglomusetunicatum)质量计，按照1:1:1混合而成；且所述物激素为独角金内酯或亚精胺。


2.如权利要求1所述的接种混合丛枝菌根真菌扦插繁育茶苗的方法，其特征在于，所述的独角金内酯，在喷施时候的浓度为1.0μmol/L；所述的亚精胺，在喷施时候的浓度为0.10mmol/L。


3.如权利要求1所述的接种混合丛枝菌根真菌扦插繁育茶苗的方法，其特征在于，所述的高效AM真菌混合菌剂制备是：采用种植三叶草扩繁菌株方法进行扩繁制备。


4.如权利要求3所述的接种混合丛枝菌根真菌扦插繁育茶苗的方法，其特征在于，所述的扩繁菌株方法，包括以下步骤：
(1)取黄沙土与河砂按1:1的质量比混合，过2mm筛网，并辐射灭菌(12kGy)得基质，待用；
(2)将三叶草种子采用质量浓度为10％的NaOH清洗3-5min，蒸馏水洗干净后，用75％酒精浸泡20min，再用蒸馏水洗干净，晾干水分，待用；
(3)将步骤(2)所得种子与AM真菌菌剂共同施于步骤(1)所得的基质中，采用无菌水浇水培养12周后，剪掉三叶草地...

【专利技术属性】
技术研发人员：高秀兵，郭灿，周玉锋，段学艺，
申请(专利权)人：贵州省茶叶研究所，
类型：发明
国别省市：贵州;52