【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于农业，尤其涉及一种适用于田间就地应用的简便高效扩繁丛枝菌根真菌方法及其应用。
技术介绍
1、丛枝菌根(arbuscular mycorrhiza，am)真菌是土壤共生真菌中分布最为广泛的一类真菌，能够和大多数农作物形成互利的共生关系，进而有效改善农作物矿质营养吸收，减轻环境胁迫对农作物生长的不利影响，提高农作物产量和品质。由于am真菌的功能多面性和生态环境有益性，其在农业生产中具有非常重要的作用和广阔的应用前景。但由于其扩繁培养方式的局限性，即不能在离体条件下进行纯培养、只能依赖活体植物对其进行繁殖，导致无法大规模扩繁，仅用于科研实验和小范围田间试验的接种试验，难以满足大规模的田间生产需要。因此，研究出一种可以适宜于田间生产的高效简便am真菌扩繁方法，对于am真菌在农作物上的田间应用十分重要。
2、目前am真菌的扩繁方法众多，如活体土培法、营养液培养、离体双重培养法等。am真菌容易被其他土壤真菌或细菌抢占根系生态位而侵染不上作物根系，导致am真菌扩繁质量不高，因此采用这些方法时必须进行土壤消毒，才能确保am真菌侵染上宿主植物的根系，实现am真菌的高质量扩繁。这也导致这些方法无法在田间进行大规模am真菌扩繁，限制了am真菌在农作物田间生产上的应用。另外，这些扩繁方法都建立在宿主与am真菌共生的基础上，虽然am真菌与宿主植物之间并没有强烈的共生专一性，但am真菌还是表现出对共生作物的轻微偏嗜性，表现在随宿主植物不同am真菌的侵染率、孢子数量以及菌根效应都不同。另外，不同宿主植物根系发达程度不同，而宿主植物的
3、综上，当前am真菌的扩繁质量不高限制了其在农作物田间生产上的大规模应用，而土壤消毒、宿主植物的根系发达程度以及扩繁成本(基质成本、运输成本等)为影响am真菌高效扩繁的关键因素。因此，从影响am真菌高效扩繁的三个关键因素进行优化，建立一种适用于田间应用的高效简便扩繁am真菌方法，对促进am真菌在农作物田间生产上的应用具有里程碑式意义。
技术实现思路
1、本专利技术的目的之一在于提供一种适用于田间就地应用的简便高效扩繁丛枝菌根真菌方法，所述扩繁方法选用的基质为体积比为0.5-1.5：0.5-1.5：0.3-0.7的茶园酸性土壤、河沙、珍珠岩；消毒方式为土壤暴晒+40％甲醛90-110倍稀释液消毒；扩繁宿主植物为高粱(sorghumbicolor(l.)moench)+白三叶草(trifolium repens)。
2、优选地，所述珍珠岩的粒径为3-5mm。
3、更优选地，所述茶园酸性土壤、河沙、珍珠岩的体积比为1：1：0.5。
4、更优选地，所述甲醛的稀释倍数为100倍。
5、更优选地，所述消毒方法为：将基质平铺到黑色塑料薄膜上，盖上薄膜，用土将边缘薄膜密封，暴露于阳光下暴晒10-15天，然后翻动土壤基质，喷施为40％甲醛100倍稀释液，再密封暴晒5-7天，通风透气环境下放置6-8天即可。
6、更优选地，高粱和白三叶草的比例为质量比1：3。
7、更优选地，所述扩繁方法中使用的丛枝菌根真菌菌种为根内根孢囊霉(rhizophagus intraradices)和摩西斗管囊霉(funneliformis mosseae)和皱壁无梗囊霉(aappendicola rugosa)按照质量比为0.8-1.2：0.8-1.2：0.8-1.2混合均匀而成的菌剂。
8、更优选地，所述根内根孢囊霉(rhizophagus intraradices)和摩西斗管囊霉(funneliformis mosseae)和皱壁无梗囊霉(aappendicola rugosa)的质量比为1：1：1。
9、更优选地，所述扩繁方法包括以下具体步骤：
10、1)选择成年茶园，去掉表土，挖取0-50cm深土壤，挑拣出大颗粒石子和植物残渣，并将大颗粒土块敲粉粹，晒干备用；河沙采自河边粗沙，挑拣出大颗粒石子；珍珠岩颗粒(直径3-5mm)，用前清水冲洗数遍，然后晒干，按照比例与茶园土混合。
11、2)选择在每年7-8月进行，将黑色塑料薄膜平铺于硬质地面，然后将配置好的基质土平铺于黑色塑料薄膜上，适当修理平整(厚度5-8cm)后盖上薄膜，用土将边缘薄膜密封，暴露于阳光下暴晒10-15天；然后用农药喷雾器喷施40％甲醛100倍稀释液至基质土表面完全湿润，然后盖上一层黑色塑料薄膜，用土将边缘薄膜密封，暴露于阳光下放置10-15天。最后将暴晒后的基质土壤在通风透气环境下放置一周左右后，挥散掉甲醛。
12、3)选择一块临近准备生产应用am真菌的地块，稍微整理平整。用砖块堆砌成一个长8-10米、宽1.5-2米、深度0.2-0.3米的池子(具体可根据地块和丛枝菌根真菌菌剂需求量大小来调整)，然后铺上白沙厚薄膜(8-12s)，喷施75％酒精进行消毒(20-30min)，然后铺上用阳光和甲醛消毒好了的基质土(厚度10-15cm)。
13、4)购置桶装纯净水，用75％酒精消毒过的农药喷雾器喷施于基质土，要求挖开底层土可见水分渗透。然后撒铺上需要扩繁的am真菌菌剂，再在上面撒播用75％酒精消毒过的高粱和白三叶草种子，最后在种子表面铺撒一层消毒过的基质土(1-2cm)。
14、5)用竹片搭建拱棚，覆盖上75％酒精消毒过白色塑料膜，然后用土将薄膜边缘压实封口，然后在白色塑料膜覆盖上遮阳网。
15、6)养护2～3个月后，收获的基质土壤及扩繁宿主植物根系即为野外扩繁所得菌剂。
16、本专利技术的目的之二在于提供上述扩繁方法在am真菌扩繁中的应用。
17、与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
18、(1)操作简便，耗费人力、物力资源较少，对操作环境和操作手段的要求较低，可以满足短期内获得大量扩繁菌剂的要求，可满足丛枝菌根菌剂的大批量生产，有利将丛枝菌根真菌应用于农业生产实际。
19、(2)采用茶园土+河沙土+珍珠岩混合物作为扩繁基质，基质便宜易得，且比传统河沙+土壤的基质更节约土壤使用量，在大规模am真菌扩繁生产将极大节约土壤挖取，节约了成本同时保护了农田生态和环境。
20、(3)采用阳光暴晒+40％甲醛对基质土壤的消毒处理，操作更环保，且节约了消毒成本。
21、(4)选择在农业生产的田间就地开展am真菌扩繁，所得菌剂可以就近应用，可节约运输成本；使用过的薄膜、石砖、遮阳网等可重复使用，节约环保。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种适用于田间就地应用的简便高效扩繁丛枝菌根真菌方法，其特征在于，所述扩繁方法选用的基质为体积比为0.5-1.5：0.5-1.5：0.3-0.7的茶园酸性土壤、河沙、珍珠岩；消毒方式为土壤暴晒+40％甲醛90-110倍稀释液消毒；扩繁宿主植物为高粱(sorghumbicolor(l.)moench)和白三叶草(Trifolium repens)。
2.根据权利要求1所述的丛枝菌根真菌高效扩繁方法，其特征在于，所述珍珠岩的粒径为3-5mm。
3.根据权利要求2所述的丛枝菌根真菌高效扩繁方法，其特征在于，所述茶园酸性土壤、河沙、珍珠岩的体积比为1：1：0.5。
4.根据权利要求3所述的丛枝菌根真菌高效扩繁方法，其特征在于，所述甲醛的稀释倍数为100倍。
5.根据权利要求4所述的丛枝菌根真菌高效扩繁方法，其特征在于，所述消毒方法为：将基质平铺到黑色塑料薄膜上，盖上薄膜，用土将边缘薄膜密封，暴露于阳光下暴晒10-15天，然后翻动土壤基质，喷施为40％甲醛100倍稀释液，再密封暴晒5-7天，通风透气环境下放置6-8天即可。
6
7.根据权利要求1-6中任一项所述的丛枝菌根真菌高效扩繁方法，其特征在于，所述扩繁方法中使用的丛枝菌根真菌菌种为根内根孢囊霉(Rhizophagus intraradices)和摩西斗管囊霉(Funneliformis mosseae)和皱壁无梗囊霉(Aappendicola rugosa)按照质量比为0.8-1.2：0.8-1.2：0.8-1.2混合均匀而成的菌剂。
8.根据权利要求7所述的丛枝菌根真菌高效扩繁方法，其特征在于，所述根内根孢囊霉(Rhizophagus intraradices)和摩西斗管囊霉(Funneliformis mosseae)和皱壁无梗囊霉(Aappendicola rugosa)的质量比为1：1：1。
9.权利要求1-6、8中任一项所述的扩繁方法在丛枝菌根真菌扩繁中的应用。
10.权利要求7所述的扩繁方法在丛枝菌根真菌扩繁中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种适用于田间就地应用的简便高效扩繁丛枝菌根真菌方法，其特征在于，所述扩繁方法选用的基质为体积比为0.5-1.5：0.5-1.5：0.3-0.7的茶园酸性土壤、河沙、珍珠岩；消毒方式为土壤暴晒+40％甲醛90-110倍稀释液消毒；扩繁宿主植物为高粱(sorghumbicolor(l.)moench)和白三叶草(trifolium repens)。
2.根据权利要求1所述的丛枝菌根真菌高效扩繁方法，其特征在于，所述珍珠岩的粒径为3-5mm。
3.根据权利要求2所述的丛枝菌根真菌高效扩繁方法，其特征在于，所述茶园酸性土壤、河沙、珍珠岩的体积比为1：1：0.5。
4.根据权利要求3所述的丛枝菌根真菌高效扩繁方法，其特征在于，所述甲醛的稀释倍数为100倍。
5.根据权利要求4所述的丛枝菌根真菌高效扩繁方法，其特征在于，所述消毒方法为：将基质平铺到黑色塑料薄膜上，盖上薄膜，用土将边缘薄膜密封，暴露于阳光下暴晒10-15天，然后翻动土壤基质，喷施为40％甲醛100倍稀释液，再密封暴晒5-7天，通风透气环境...
【专利技术属性】
技术研发人员：高秀兵，郭灿，段学艺，张圆，马驰宇，杨肖伟，
申请(专利权)人：贵州省茶叶研究所，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。