一种防风多糖的提取方法技术

技术编号:28312622 阅读:66 留言:0更新日期:2021-05-04 12:50
本发明专利技术公开了一种防风多糖的提取方法,其特征在包括以下步骤:(1)药材的预处理;(2)药材微波提取;(3)过滤离心浓缩;(4)醇沉;(5)除蛋白;(6)醇沉抽滤干燥,即得,采用微波协同水煮法得到的防风多糖,防风粗多糖得率5.0%以上,具有十分显著的经济优势。

【技术实现步骤摘要】
一种防风多糖的提取方法
本专利技术涉及中药材提取
,特别涉及一种防风多糖的提取方法
技术介绍
防风是我国重要的中草药之一,用药部位为野生伞形科植物防风未抽花茎植株的干燥根,研究发现黑龙江、辽宁、内蒙古东部所产的“关防风”质量最优。道地防风气微香,具有败油样气味,味微甘,以条粗壮、皮细而紧,无毛头,断面有棕色环、中心色淡黄者为佳。防风多糖主要有抗肿瘤和增强免疫的功能,据文献查询,防风多糖对小鼠免疫功能具有影响,以增强细胞杀伤能力。但是,在工业化生产过程中,防风多糖的提取率并不高,大量的防风多糖随着残渣的丢弃而损失,造成资源的浪费,因此,如何提高防风多糖的提取得率,制备出粗多糖样品,具有十分重要的意义。为了解决上述问题,本专利技术提供了一种适宜于工业化生产,工艺流程简洁的防风多糖的提取方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的不足,提供一种防风的种植技术,其包括以下步骤:取防风干燥根茎适量,于50℃烘箱中,烘干24h,将烘干的防风用粉碎机进行粉碎处理,将防风用1∶50的料液比混合后,微波提取,加热、沸腾后改用文火加热1h。纱布过滤药渣,药渣加入15-20倍水煎煮两次,合并提取液,待用。离心、过滤、浓缩,浓缩至1mg/ml;缓慢向浓缩液中加入高纯度乙醇溶液,加至乙醇浓度55-60%时,冷藏8-9h,取出后离心15-20min,除去上清液,所得沉淀用离子水标至原体积,醇沉两次,所得沉淀用离子水标至原体积,加入1/4-1/6体积6-8%的三氯乙醇溶液,充分混合后静止3-5h,2000-4000r/min离心15-20min。将所得的上清液抽滤,烘干后既得防风多糖。在本专利技术的一个优选实施方式中,微波提取的条件为,微波功率600w,提取时间40s,提取次数为3次。与现有技术相比,本专利技术具有以下优点和有益效果:本专利技术通过微波协同水煮法得到的防风多糖,较其他方法有所提高。防风粗多糖得率5.3%以上,高于传统的水煮法4.2%,具有十分显著的经济优势。具体实施方式下面详细叙述本专利技术的实施例,需要说明的是,本实施例是叙述性的,不是限定性的,不能以此限定本专利技术的保护范围。试验例11仪器和材料1.1仪器UV-9200紫外可见分光光度计:北京瑞利分析仪器公司;WB900b型微波炉;顺德市格兰仕电器;RE-52旋转蒸发仪,上海青浦仪器厂;1.2试剂与原料防风购自赤峰荣济堂药店;无水乙醇(A.R):天津市红岩化学试剂厂;硫酸(A.R):北京化工厂;葡萄糖标准品(A.R):天津市恒兴化学试剂有限公司;蒽酮(A.R):国药集团化学试剂有限公司;三氯乙酸(A.R):上海山蒲化工有限公司。2防风多糖的提取预处理→浸提(多糖与细胞分离)→过滤→离心→浓缩上清→醇沉→三氯乙酸除蛋白→醇沉→抽滤→干燥→粗多糖含量测定2.1防风原料的预处理将烘干后的防风原料粉碎,过14~20目筛,精密称取防风细粉100g。2.2提取方法:水煮法:15倍料液比,常规方法煎煮两次,1h/次。提取液离心、过滤、浓缩至1mg/ml,缓缓向上述液中加入95%乙醇至乙醇浓度为60%,3000r/min离心后倒去上清液、沉淀用去离子水溶解至原体积,反复用乙醇沉淀2次,所得沉淀用离子水标至原体积,加入1/4-1/6体积6-8%的三氯乙醇溶液,充分混合后静止3-5h,2000-4000r/min离心15-20min。将所得的上清液抽滤,烘干后既得防风多糖。微波法:微波功率620w,时间45s,超声3次,提取液处理同水煮法。超声法:功率225w,超声时间40min,超声3次,提取液处理同水煮法。3溶液配制3.1标准液的制备精密称取于105℃干燥至恒重的葡萄糖200mg,用蒸馏水溶于100mL容量瓶中,加水配制成浓度为2g/L葡萄糖标准溶液备用。取葡萄糖标准液4mL,用蒸馏水溶解并定容于10mL容量瓶,浓度为0.4g/L的葡萄糖储备液。3.2待测样品的配制称取多糖10mg溶解于10ml蒸馏水中,即得1g/l的粗糖溶液,再从中取1.5ml用蒸馏水稀释并定容于10ml容量瓶,配制成0.15g/l的待测液。3.3蒽酮硫酸溶液配制取98%的硫酸76ml,用蒸馏水稀释并定溶于100ml容量瓶,冷却至常温。称取蒽酮0.1g,用上述硫酸溶液溶解并定溶于100ml容量瓶,避光冷却至室温备用。4含量测定分别吸取储备液0、0.1、0.3、0.5、0.7、0.9mL于标有数字的试管中,加蒸馏水水至2mL,混匀。分别取待测多糖2ml于试管中,每个样做三个平行重复。然后向各试管中分别加人0.1%的蒽酮硫酸溶液8mL,摇匀,煮沸10min,冰浴,冷却至室温,于最大吸收波长625nm下测其吸光度。表1标准管管号浓度mg/ml吸光度标10.0040.007标20.0120.095标30.020.135标40.0280.188标50.0360.251表2各种方法提取防风多糖结果表待检样1样2样3均值浓度纯度%得率%水煮0.1770.1720.1840.1770.02586.694.2012微波0.1180.1140.1160.1160.01757.6852.0651超声0.0890.0830.0890.0870.01345.7740.3479微波+水煮0.1880.1870.1880.1880.03087.245.3014由上述表可知:水煮法、微波法、超声提取法、微波水煮法提取防风多糖的得率分别为4.2%、2.07%、0.35%、5.30%。通过对上述4种提取方法进行分析比较,发现微波提取协同水煮法得到的防风多糖含量较其他方法大幅度提高,因此综合考虑防风多糖提取最佳方法为微波协同水煮法。实施例1取防风干燥根茎适量,于50℃烘箱中,烘干24h,将烘干的防风用粉碎机进行粉碎处理,将防风用1∶50的料液比混合后,微波功率600w,提取时间40s,提取次数为3次,加热、沸腾后改用文火加热1h。纱布过滤药渣,药渣加入15-20倍水煎煮两次,合并提取液,待用。离心、过滤、浓缩,浓缩至1mg/ml本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种防风多糖的提取方法,其包括以下步骤:(1)药材的预处理;(2)药材微波提取;(3)过滤离心浓缩;(4)醇沉;(5)除蛋白;(6)醇沉抽滤干燥,即得。/n

【技术特征摘要】
1.一种防风多糖的提取方法,其包括以下步骤:(1)药材的预处理;(2)药材微波提取;(3)过滤离心浓缩;(4)醇沉;(5)除蛋白;(6)醇沉抽滤干燥,即得。


2.根据权利1所述的一种防风多糖的提取方法,其特征在于,所述的浸提方法为微波+水煮提取方法,所得防风多糖得率高于5.0%,纯度佳。


3.根据权利1所述的一种防风多糖的提取方法,其特征在于,所述的防风多糖含量的测定方法如下:
(1)溶液配制
①标准液的制备
精密称取于105℃干燥至恒重的葡萄糖200mg,用蒸馏水溶于100mL容量瓶中,加水配制成浓度为2g/L葡萄糖标准溶液备用;
取...

【专利技术属性】
技术研发人员:王海波韩风雨艾林
申请(专利权)人:内蒙古天奇中蒙制药股份有限公司
类型:发明
国别省市:内蒙古;15

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