免疫原性组合物制造技术

本发明专利技术公开了工程改造的噬菌体，其能够结合共生细菌并且将其基因组多核苷酸插入所述共生细菌中，但在所述共生细菌内不能产生后代，不能进行溶原周期并且不能进行裂解周期，其中所述工程改造的噬菌体包含基因组多核苷酸，所述基因组多核苷酸包含在启动子的控制下的编码至少一个异源抗原的至少一个基因。的编码至少一个异源抗原的至少一个基因。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】免疫原性组合物


[0001]本专利技术涉及使用工程改造的噬菌体治疗或预防感染的领域。具体地，本专利技术公开了经工程改造以表达抗原的噬菌体。所述噬菌体靶向共生细菌，将编码抗原的核酸插入所述共生细菌中，随后所述共生细菌释放抗原和任选佐剂，而不杀死所述共生细菌。如此表达的抗原可引发针对传染性病原体或其他疾病的免疫应答。
[0002]背景噬菌体已知多年，已由Fredrick Twart于1915年和Felix d'Herelle于1917年发现。它们是具有在细菌内感染和复制的DNA或RNA基因组的病毒。噬菌体可以在细菌内经历裂解或溶原周期。在裂解周期期间，将噬菌体遗传物质注入细菌中，在细菌中发生转录、翻译和复制，导致噬菌体蛋白和核酸的组装和包装，并最终导致裂解，其中释放许多准备感染另外细菌的噬菌体。一些噬菌体也可以进行溶原周期，其中噬菌体遗传物质被引入细菌基因组中。
[0003]目前，正在临床研究中测试噬菌体用于治疗细菌感染。正在靶向病原体诸如金黄色葡萄球菌(S. aureus)、大肠杆菌(E. coli)和铜绿假单胞菌(P. aeruginosa)。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种工程改造的噬菌体，其能够结合共生细菌并将其基因组多核苷酸插入所述共生细菌中，但在所述共生细菌内不能产生后代，不能进行溶原周期并且不能进行裂解周期，其中所述工程改造的噬菌体包含基因组多核苷酸，所述基因组多核苷酸包含在启动子的控制下的编码至少一个异源抗原的至少一个基因。2.权利要求1的工程改造的噬菌体，其中所述工程改造的噬菌体适于结合所述共生细菌并且将所述噬菌体基因组多核苷酸插入所述共生细菌中。3.权利要求2的工程改造的噬菌体，其中通过编码噬菌体尾丝/板的基因的修饰，所述工程改造的噬菌体适于结合共生细菌。4.权利要求1
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3中任一项的工程改造的噬菌体，其中所述共生细菌是皮肤、生殖器、口腔或肠道微生物群的一部分。5.权利要求4的工程改造的噬菌体，其中所述共生细菌是痤疮丙酸杆菌(Propionibacterium acnes)、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)、乳杆菌(Lactobacillus)、格氏链球菌(Streptococcus gordonii)或大肠杆菌。6.权利要求5的工程改造的噬菌体，其中所述共生细菌是大肠杆菌细菌并且是肠道微生物群的部分。7.权利要求5的工程改造的噬菌体，其中所述共生细菌是表皮葡萄球菌或痤疮丙酸杆菌并且是皮肤微生物群的部分。8.权利要求5的工程改造的噬菌体，其中所述共生细菌是乳杆菌并且是生殖器微生物群的部分。9.权利要求5的工程改造的噬菌体，其中所述共生细菌是格氏链球菌并且是口腔微生物群的部分。10.权利要求1
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9中任一项的工程改造的噬菌体，其中所述编码异源抗原的基因在强启动子的控制下。11.权利要求1
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10中任一项的工程改造的噬菌体，其中所述噬菌体选自由以下组成的科的组：肌尾噬菌体科、长尾噬菌体科、短尾噬菌体科、corticiviridae、复层噬菌体科、光滑噬菌体科、囊状噬菌体科、丝状噬菌体科、脂毛噬菌体科、古噬菌体科、芽生噬菌体科和微小纺锤形噬菌体科。12.权利要求11的工程改造的噬菌体，其中所述噬菌体是肌尾噬菌体科、长尾噬菌体科或短尾噬菌体科。13.权利要求12的工程改造的噬菌体，其中所述噬菌体是T4、T7或λ大肠杆菌噬菌体。14.权利要求1
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13中任一项的工程改造的噬菌体，其中所述基因组多核苷酸经工程改造以除去至少一个编码衣壳蛋白的基因。15.权利要求1
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14中任一项的工程改造的噬菌体，其中所述基因组多核苷酸经工程改造以删除所有编码衣壳蛋白的基因。16.权利要求1
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15中任一项的工程改造的噬菌体，其中所述基因组多核苷酸经工程改造以删除至少一个编码裂解机制蛋白的基因。17.权利要求1
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16中任一项的工程改造的噬菌体，其中所述基因组多核苷酸经工程改造以删除所有编码裂解机制蛋白的基因。18.权利要求1
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17中任一项的工程改造的噬菌体，其中所述基因组多核苷酸经工程改
造以删除至少一个编码溶原机制蛋白的基因。19.权利要求1
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18中任一项的工程改造的噬菌体，其中所述基因组多核苷酸经工程改造以删除所有编码所有溶原机制蛋白的基因。20.权利要求1
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19中任一项的工程改造的噬菌体，其中所述基因组多核苷酸保留复制起点。21.权利要求1
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20中任一项的工程改造的噬菌体，其中所述基因组多核苷酸保留噬菌体复制起点。22.权利要求1
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21中任一项的工程改造的噬菌体，其中所述基因组多核苷酸包含细菌复制起点。23.权利要求1
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22中任一项的工程改造的噬菌体，其中所述基因组多核苷酸包含选择标记物。24.权利要求1
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23中任一项的工程改造的噬菌体，其中所述基因组多核苷酸保留复制起点和编码允许所述噬菌体基因组多核苷酸在共生细菌内复制所需的蛋白的基因。25.权利要求20
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24中任一项的工程改造的噬菌体，其中所述工程改造的噬菌体是高拷贝数或中拷贝数的工程改造的噬菌体。26.权利要求1
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25中任一项的工程改造的噬菌体，其中所述异源抗原是病毒蛋白。27.权利要求1
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25中任一项的工程改造的噬菌体，其中所述异源抗原是真菌蛋白。28.权利要求1
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25中任一项的工程改造的噬菌体，其中所述异源抗原是源自革兰氏阳性或革兰氏阴性细菌的细菌蛋白。29.权利要求28的工程改造的噬菌体，其中所述异源抗原是能够产生针对人肠中的致病性细菌的免疫应答的蛋白。30.权利要求28或29的工程改造的噬菌体，其中所述异源抗原是来自艰难梭菌(C. difficile)、幽门螺旋杆菌(Heliobacter pylori)、志贺氏菌(Shigella)或致病性大肠杆菌的蛋白。31.权利要求28
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30中任一项的工程改造的噬菌体，其中所述异源抗原包含来自艰难梭菌的毒素A和/或毒素B的序列。32.权利要求28的工程改造的噬菌体，其中所述异源抗原是葡萄球菌、链球菌、志贺氏菌、假单胞菌、痤疮丙酸杆菌、不动杆菌(Acinetobacter)或脑膜炎球菌的蛋白，或来自大肠杆菌、铜绿假单胞菌、艰难梭菌、幽门螺旋杆菌、肺炎克雷伯菌(K. pneumoniae)或淋病奈瑟菌(N. gonorrhaea)的蛋白。33.权利要求1
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32中任一项的工程改造的噬菌体，其包含基因组多核苷酸，所述基因组多核苷酸包含编码至少2、3、4、5、6、7、8、9或10个异源抗原的至少2、3、4、5、6、7、8、9或10个基因。34.权利要求33的工程改造的噬菌体，其中所述基因组多核苷酸包含编码至少3个异源抗原的至少3个基因。35.权利要求1
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34中任一项的工程改造的噬菌体，其中编码至少一个异源抗原的基因包含能够驱动所述异源抗原从所述共生细菌释放的信号序列。36.权利要求35的工程改造的噬菌体，其中所述信号序列能够驱动所述异源抗原通过分泌从所述共生细菌释放。
37.权利要求35的工程改造的噬菌体，其中所述信号序列能够驱动所述异源抗原通过排泄从所述共生细菌释放。38.权利要求35
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37中任一项的工程改造的噬菌体，其中所述信号序列选自I、II、III、IV和V型信号序列。39.权利要求1
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38中任一项的工程改造的噬菌体，其中所述基因组多核苷酸包含在启动子的控制下的编码佐剂的基因。40.权利要求39的工程改造的噬菌体，其中所述佐剂是TLR5激动剂。41.权利要求39或40的工程改造的噬菌体，其中所述佐剂是鞭毛蛋白或其变体，在所述变体中高变区被删除。42.权利要求39
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41中任一项的工程改造的噬菌体，其中所述佐剂的表达在强启动子的控制下。43.权利要求39
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42中任一项的工程改造的噬菌体，其中所述佐剂作为与所述异源抗原的融合蛋白表达。44.权利要求1
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43中任一项的工程改造的噬菌体，其中所述基因组多核苷酸包含包装序列。45.权利要求44的工程改造的噬菌体，其中所述基因组多核苷酸包含至少一个包装序列并且不包含其他编码噬菌体基因的序列。46.一种工程改造的噬菌体基因组多核苷酸，其包含在启动子的控制下的编码异源抗原的异源抗原基因，其中至少一个编码衣壳蛋白的基因被删除，至少一个编码裂解机制蛋白的基因被删除，并且任选地，至少一个编码溶原机制蛋白的基因被删除。47.权利要求46的工程改造的噬菌体基因组多核苷酸，其中所述编码异源抗原的基因在强启动子的控制下。48.权利要求46
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47中任一项的工程改造的噬菌体基因组多核苷酸，其由来自由以下组成的科的组的噬菌体基因组多核苷酸进行工程改造：肌尾噬菌体科、长尾噬菌体科、短尾噬菌体科、corticiviridae、复层噬菌体科、光滑噬菌体科、囊状噬菌体科、丝状噬菌体科、脂毛噬菌体科、古噬菌体科、芽生噬菌体科和微小纺锤形噬菌体科。49.权利要求48的工程改造的噬菌体基因组多核苷酸，其由肌尾噬菌体科或长尾噬菌体科或...

【专利技术属性】
技术研发人员：C，
申请(专利权)人：葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司，
类型：发明
国别省市：