利用糖源配比优化百子莲胚性愈伤继代周期及频次的方法技术

本发明专利技术提供了一种利用糖源配比优化百子莲胚性愈伤继代周期及频次的方法，包括以下步骤：A、外植体取材与消毒；B、愈伤组织的诱导；C、愈伤组织的继代培养；D、胚性愈伤组织的诱导；E、胚性愈伤组织的继代；F、成熟胚的诱导。本发明专利技术通过利用糖配比调控生长，利用麦芽糖分解利用较慢的特性，优化了百子莲体胚发生体系胚性愈伤组织的继代周期，减少继代频次，得到状态较好的百子莲胚性愈伤组织。且本发明专利技术方法获得了较高的胚性愈伤组织增殖系数及成胚数量。了较高的胚性愈伤组织增殖系数及成胚数量。了较高的胚性愈伤组织增殖系数及成胚数量。

【技术实现步骤摘要】
利用糖源配比优化百子莲胚性愈伤继代周期及频次的方法


[0001]本专利技术属于组织培养
，具体涉及一种利用糖源配比优化百子莲胚性愈伤继代周期及频次的方法。

技术介绍

[0002]百子莲(Agapanthus praecox)原产非洲南部，为单子叶多年生草本花卉，具有较强的观赏性和极强的抗性，在园林中的应用逐渐增加，目前市场上种苗供不应求。
[0003]百子莲在原产地常用种子或分株繁殖，但引种国内后存在发芽率低，繁殖周期长，繁殖系数低等缺点。体细胞胚胎发生途径具有数量多、繁殖快、结构完整、植株再生率高以及不受季节影响等优势，被认为是百子莲无性扩繁和种质保存的较佳途径。
[0004]国内百子莲体胚发生体系的一般流程为：选择外植体诱导出愈伤组织(Callus，Ca)，通过继代培养诱导出(Embryogenic callus，EC)，EC经过继代增殖得到大量的细胞群体，在需要体胚诱导时，将培养基中的外源生长素类物质毒莠定(Picloram，PIC)去除，继续培养，以利于诱导成熟胚胎并发育为种苗。在百子莲的体胚体系中，EC继代周期一本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利用糖源配比优化百子莲胚性愈伤继代周期及频次的方法，其特征在于，包括以下步骤：A、外植体取材与消毒：取百子莲未开裂的小花苞，进行消毒处理后，切取其小花梗外植体，并切成小段；B、愈伤组织的诱导：将小段的小花梗外植体接种于愈伤组织诱导培养基中，暗培养一段时间，生成带有残留小花梗组织的愈伤组织；C、愈伤组织的继代培养：将带有残留小花梗组织的愈伤组织放置在愈伤组织继代培养基上，暗培养，得不含残留小花梗组织的愈伤组织；D、胚性愈伤组织的诱导：将不含残留小花梗组织的愈伤组织放置在胚性愈伤组织诱导培养基中暗培养，生成胚性愈伤组织；E、胚性愈伤组织的继代：将胚性愈伤组织放置在继代保存培养基中暗培养；F、成熟胚的诱导：将步骤E培养后得到的胚性愈伤组织放置在成熟胚诱导培养基中，暗培养一段时间后，转至光下培养，生成成熟胚。2.根据权利要求1所述的利用糖源配比优化百子莲胚性愈伤继代周期及频次的方法，其特征在于，步骤A中，所述消毒处理的具体步骤为：先用75％(v/v)乙醇处理50～70s后，用ddH2O冲洗3～5次，然后用5％次氯酸钠消毒处理5～7min，之后ddH2O冲洗3～5次，再用75％乙醇处理50～70s后，用ddH2O冲洗3～5次。3.根据权利要求1所述的利用糖源配比优化百子莲胚性愈伤继代周期及频次的方法，其特征在于，步骤A中，所述小花梗外植体切成0.7～1.0cm的小段。4.根据权利要求1所述的利用糖源配比优化百子莲胚性愈伤继代周期及频次的方法，其特征在于，步骤B中，所述愈伤组织诱导培养基组分为：MS+1.5～2.0mg
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‑1PIC+2.5～3.5％蔗糖+0.6～1.0％琼脂，pH 5.8。5.根据权利要求1所述的利用糖源配比优化百子莲胚性愈伤继代周期及频次的方法，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：岳建华，董艳，龚守富，张琰，贾亚男，邓楠楠，施芹川，李嫚嫚，
申请(专利权)人：信阳农林学院，
类型：发明
国别省市：