一种三叶青试管苗离体保存的方法技术

本发明专利技术公开了一种三叶青试管苗离体保存的方法，属于植物的栽培技术领域，包括以下步骤：选取三叶青茎尖作为外植体，进行预培养后进行第二次培养；将第二次培养的茎尖用海藻酸钠包埋球；将含茎尖的包埋球取出，放置于无菌培养皿上的无菌滤纸上,在无菌空气流中干燥1

【技术实现步骤摘要】
一种三叶青试管苗离体保存的方法


[0001]本专利技术涉及植物的栽培
，特别是涉及一种三叶青试管苗离体保存的方法。

技术介绍

[0002]三叶青(Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg)别名三叶崖爬藤、金线吊葫芦，属鼠李目，葡萄科草质藤本。三叶青草质藤本，小枝纤细，有纵棱纹，无毛或被疏柔毛。卷须不分枝，相隔2节间断与叶对生。叶为3小叶，小叶披针形、长椭圆披针形或卵披针形，长3～lOcm，宽1.5～3cm，顶端渐尖，稀急尖，基部楔形或圆形，侧生小叶基部不对称，近圆形，边缘每侧有4～6个锯齿，锯齿细或有时较粗，上面绿色，下面浅绿色，两面均无毛；侧脉5～6对，网脉两面不明显，无毛；叶柄长2～7.5cm，中央小叶柄长0.5～1.8cm，侧生小叶柄较短，长0.3～0.5cm，无毛或被疏柔毛序腋生，长1～5cm，比叶柄短、近等长或较叶柄长，下部有节，节上有苞片，或假顶生而基部无节和苞片，二级分枝通常4，集生成伞形。花期4～6月，果期8～11月。为我国特有药用植物,广泛分布于长江以南各省份，主要有浙江、江西、福建、湖本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种三叶青试管苗离体保存的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)选取三叶青茎尖作为外植体，在质量浓度75％酒精中浸泡，无菌水冲洗，滴加质量浓度0.1％升汞，无菌水冲洗，再滴加质量浓度0.1％升汞，无菌水冲洗，剪成0.5
‑
1.0cm长接种在第一培养基中，培养；(2)在无菌条件下从生长健壮的无菌苗上切取直径大小1
‑
3mm的离体茎尖为材料，将离体茎尖置入第二培养基，培养；(3)将在第二培养基中培养后的茎尖置于25g/L海藻酸钠+2mol/L甘油+0.8mol/L蔗糖的无钙MS培养液中,用无菌滴管或移液器吸取含一个茎尖的无钙MS培养液滴至含0.1mol/L氯化钙+2mol/L甘油+0.8mol/L蔗糖的培养液中,并于25℃保持2
‑
30min使之成包埋球；(4)将含茎尖的包埋球取出，放置于无菌培养皿上的无菌滤纸上,在无菌空气流中干燥1
‑
2h；(5)无菌空气流干燥后，将包埋球装入冷冻管，每个冷冻管装10
‑
20个包埋球；(6)将装有包埋球的冷冻管置于冷冻管架或沙袋后投入液氮进行超低温保存。2.根据权利要求1所述的一种三叶青试管苗离体保存的方法，其特征在于，所述第一培养基包括500
‑
650mg/L NH4NO3、600
‑
700mg/L...

【专利技术属性】
技术研发人员：洪森荣，周聪，张子鑫，余洁，姚尧，尹明华，
申请(专利权)人：上饶师范学院，
类型：发明
国别省市：