一种窄粒径分布的曲普瑞林微球的制备方法技术

本发明专利技术涉及制药领域，本发明专利技术公开了一种窄粒径分布的曲普瑞林微球的制备方法，包括：1）将醋酸曲普瑞林分散于二氯甲烷中制成混悬液A，将PLGA溶解于二氯甲烷中制成溶液B；2）将混悬液A和溶液B混合，二氯甲烷定重，逐渐加入二甲硅油进行凝聚反应，同时梯度调节凝聚转速，具体为二甲硅油的加入速度和凝聚转速在凝聚反应的前期大于后期；3）凝聚结束后将微球胚转移至正庚烷中进行硬化；硬化后过滤收集固体并洗涤，干燥；将微球与冻干介质重悬后，冷冻干燥即得成品。本发明专利技术通过梯度调控微球凝聚过程中凝聚剂（二甲硅油）的加入速度和凝聚转速，从而制得粒径分布窄、收率高的曲普瑞林微球。该微球通针性好，可提高患者治疗的顺应性。可提高患者治疗的顺应性。

【技术实现步骤摘要】
一种窄粒径分布的曲普瑞林微球的制备方法


[0001]本专利技术涉及制药领域，尤其涉及一种窄粒径分布的曲普瑞林微球的制备方法。

技术介绍

[0002]促性腺激素释放激素(GnRH)，又称黄体激素释放激素(LHRH)，是与生殖功能密切相关的十肽激素。当外源性的LHRH或其类似物以生理脉冲频率(每90min一次)短期、小剂量给药时，会对垂体性腺系统起到促进作用，临床上可用于治疗性功能低下、不排卵、青春期延后等症状。而以非生理脉冲频率长期、大剂量给药时，可抑制垂体分泌黄体生成素和卵泡刺激素，导致性腺分泌激素能力下降，性器官萎缩，临床用于治疗一些激素依赖性疾病，如前列腺癌、子宫肌瘤、乳腺癌、子宫内膜异位以及青春期性早熟等。
[0003]曲普瑞林(Triptorelin，6
‑
D色氨酸促黄体激素释放因子)是GnRH的类似物，通过将GnRH结构中第六位甘氨酸替换成D
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色氨酸，将其生物活性提高约100倍。因此，曲普瑞林在治疗前列腺癌、子宫肌瘤、乳腺癌、子宫内膜异位上效果显著。根据醋酸曲普瑞林临床适应症的用药特点，患者往往需要长期给药，但常规的曲普瑞林醋酸曲普瑞林注射液存在生物半衰期较短、制剂稳定性差、口服给药难以吸收、且服药后副作用大等缺点。而曲普瑞林微球作为一种长效缓释制剂，由于其优良的缓释性能，极大地延长了曲普瑞林在人体内的半衰期，可以很好地提高患者的给药顺应性，改善吸收效率和治疗效果。目前醋酸曲普瑞林微球常见的制备方法有复乳法(如CN 105169366B丽珠医药集团；CN 104010629 B山东绿叶集团；CN104523605 A北京博恩特)，热熔挤出法(CN 102048699 B，长春金赛药业；CN 105267153 B上海苏豪逸明制药)以及凝聚法(CN 109692325 A齐鲁制药)。其中凝聚法又称相分离法，其原理是在聚合物(PLGA)溶液中，加入与聚合物不互溶的溶媒(非溶媒)，引起相分离的同时将活性物质(曲普瑞林)包裹在PLGA内部形成微球的形式。更具体地，PLGA溶解在二氯甲烷中，曲普瑞林以固体形式分散在PLGA的二氯甲烷溶液中，二甲硅油作为与二氯甲烷互溶，但又不能溶解PLGA和曲普瑞林的非溶媒；随着二甲硅油的加入，PLGA和曲谱瑞林在二氯甲烷中的溶解度降低而发生凝聚(相分离)，形成微球胚；之后在硬化过程中除去二氯甲烷和二甲硅油，即得到曲普瑞林微球。相比于复乳法制备曲普瑞林微球，凝聚法制备的微球收率较高，且对微球突释性能控制得比较好。而对比热熔挤出法，采用凝聚法制备的微球API活性更高，热熔挤出法不适用于热敏感的原料药。
[0004]虽然凝聚法制备曲普瑞林微球具有上述优势，但该方法也存在微球粒径分布过宽的问题，这会导致在后期过筛时，粒径较大的微球无法过筛而损失；除此之外，大粒径的微球在进行肌肉注射给药时，疼痛感剧烈，患者耐受性较差。因此这一技术问题亟待解决。

技术实现思路

[0005]为了解决凝聚法制备曲普瑞林微球粒径分布过宽的技术问题，本专利技术提供了一种窄粒径分布的曲普瑞林微球的制备方法。本专利技术通过梯度调控微球凝聚过程中凝聚剂(二甲硅油)的加入速度和凝聚转速，从而制得粒径分布窄、收率高的曲普瑞林微球。该微球通
针性好，可提高患者治疗的顺应性。
[0006]本专利技术的具体技术方案为：一种窄粒径分布的曲普瑞林微球的制备方法，包括以下步骤：1)将醋酸曲普瑞林分散于二氯甲烷中，制成混悬液A，将PLGA溶解于二氯甲烷中，完全溶解后形成溶液B。
[0007]2)将混悬液A和溶液B混合均匀，二氯甲烷定重，混合均匀，向所得混合液中逐渐加入二甲硅油进行凝聚反应，同时梯度调节凝聚转速，具体为二甲硅油的加入速度和凝聚转速在凝聚反应的前期大于后期。
[0008]3)凝聚结束后，将所得微球胚快速转移至正庚烷中进行硬化；硬化结束后，过滤收集固体并洗涤，干燥；将所得干燥微球与冻干介质重悬后，冷冻干燥即得窄粒径分布的曲普瑞林微球。
[0009]本专利技术团队基于对凝聚法制备微球的过程研究，针对混合液在凝聚过程中会逐渐形成微球胚的特点，考察了醋酸曲普瑞林微球在凝聚过程的稳定性变化，同时检测其粒径变化和分布与凝聚剂(二甲硅油)的加入速度以及凝聚转速的相关性，首次提出通过梯度控制微球在凝聚过程中的凝聚转速和凝聚剂加入速度，来获得粒径分布窄的醋酸曲普瑞林微球。本专利技术制备出的微球，其粒径分布窄，过筛收率高(可达95％以上)；均一性好，药物释放平稳；且微球经干燥后，其混悬液通针性好，可极大提高患者在治疗过程中的顺应性。
[0010]具体地，在凝聚发生前期，即微球胚处于不稳定期，加快凝聚剂的加入速度，从而使凝聚过程尽快达到稳定期，在凝聚剂快速加入的过程中，使用较高的凝聚转速，从而使凝聚剂快速加入的同时，能快速均一地分散在聚合物溶液中，从而使聚合物溶液在凝聚过程形成大小均一的微球胚；而在凝聚过程逐渐达到稳态后，降低凝聚剂的加入速度，同时降低凝聚的搅拌转速，使整个凝聚系统更加稳定，从而得到粒径均一，分布窄的微球。
[0011]作为优选，步骤1)中，将醋酸曲普瑞林分散于二氯甲烷中后，经超声10
‑
30min分散或5000
‑
15000rpm高速剪切10
‑
30min后制成混悬液A。
[0012]作为优选，步骤2)中，所述醋酸曲普瑞林占定重后所得混合溶液重量的0.05
‑
1％；PLGA占定重后所得混合液质量的1
‑
10％。
[0013]作为优选，步骤2)中，定重后在5
‑
25℃水浴、200
‑
800rpm条件下混合5
‑
15min。
[0014]作为优选，步骤2)中，所述二甲硅油的粘度为20
‑
1000cst。
[0015]作为优选，步骤2)中，所述二甲硅油与二氯甲烷的质量比为0.5
‑
1.6∶1。
[0016]本专利技术团队通过大量试验发现在上述比例下，最有利于微球的稳定性。
[0017]作为优选，步骤2)中，凝聚过程的温度控制在5
‑
25℃，在二甲硅油的添加过程中，前1/2
‑
2/3质量的二甲硅油，加入速度为二甲硅油总量的1/4
‑
1/8min
‑1，凝聚转速为600
‑
2000rpm；后1/3
‑
1/2质量的二甲硅油，加入速度为二甲硅油总量的1/8
‑
1/30min
‑1，凝聚转速为200
‑
400rpm。
[0018]本专利技术团队基于大量试验，发现在上述特定工艺参数下，所得的微球的粒径均一更好，粒径分布更窄，且可同时保证收率。
[0019]作为优选，步骤3)中，硬化温度为5
‑
25℃，硬化转速为200
‑
1000rpm，硬化时间为0.5
‑
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种窄粒径分布的曲普瑞林微球的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：1）将醋酸曲普瑞林分散于二氯甲烷中，制成混悬液A，将PLGA溶解于二氯甲烷中，形成溶液B；2）将混悬液A和溶液B混合均匀，用二氯甲烷定重，混合均匀，向所得混合液中逐渐加入二甲硅油进行凝聚反应，同时梯度调节凝聚转速，具体为二甲硅油的加入速度和凝聚转速在凝聚反应的前期大于后期；3）凝聚结束后，将所得微球胚快速转移至正庚烷中进行硬化；硬化结束后，过滤收集固体并洗涤，干燥；将所得干燥微球与冻干介质重悬后，冷冻干燥即得窄粒径分布的曲普瑞林微球。2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤1）中，将醋酸曲普瑞林分散于二氯甲烷后，经超声10
‑
30 min分散或5000
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15000 rpm高速剪切10
‑
30 min后制成混悬液A。3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于：步骤2）中，所述醋酸曲普瑞林占定重后所得混合溶液重量的0.05
‑
1%；PLGA占定重后所得混合液重量的1
‑
10%。4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤2）中，定重后在5
‑
25 ℃水浴、200
‑
800 rpm条件下混合5
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15 min。5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤2）中，所述二甲硅油的粘度为20~1000...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙亚厅，董广金，陈少青，刘喜明，
申请(专利权)人：浙江圣兆药物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：