一种利用香榧籽油制备高纯度金松酸乙酯的方法技术

一种利用香榧籽油制备高纯度金松酸乙酯的方法。本发明专利技术涉及一种结合银离子络合耦合高速逆流色谱富集香榧籽油金松酸的方法。首先利用在高速逆流色谱中不同脂肪酸在两相中分配系数的不同实现初步分离，再结合银离子对于双键的络合能力不同进一步提高分离效率，一步除去饱和脂肪酸与单不饱和脂肪酸，实现金松酸的富集。本发明专利技术通过选择适宜的溶剂体系，优化银盐种类、银离子/不饱和双键摩尔比，实现了香榧金松酸与饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸高效分离。该富集方法具有设备简单、高效、金松酸回收率高、方法易于放大至工业化生产等优点，尤其适合从低浓度金松酸原料出发富集，一步实现高浓度金松酸高回收率制备。浓度金松酸高回收率制备。

【技术实现步骤摘要】
一种利用香榧籽油制备高纯度金松酸乙酯的方法


[0001]本专利技术涉及一种高效逆流色谱耦合银离子络合技术利用香榧籽油制备高纯度金松酸乙酯的方法。

技术介绍

[0002]香榧(Torreya grandis)是一种常绿针叶乔木，为裸子植物门、松杉纲、红豆杉科。榧树主要分布于中国江苏、福建、安徽、江西、湖南、浙江和贵州，以浙江最多。其种仁含丰富的营养成分，如脂肪、蛋白质、矿物元素、维生素等。香榧籽油中不饱和脂肪酸含量高达79％，且其中含有特殊的Δ5多不饱和脂肪酸——金松酸。金松酸具有抗辐射、抗炎、预防心脑血管疾病等多种保健功能。因此，对制备高纯度金松酸的需求在食用价值与科研价值上正在逐年上升。
[0003]目前，多不饱和脂肪酸富集、纯化主要有尿素包合法、分子蒸馏法、柱色谱法、超临界流体萃取法等。分子蒸馏法难于将碳原子数及沸点相近的脂肪酸分开；超临界流体萃取法对设备的要求苛刻，操作成本高，且仅适合分离饱和与不饱和脂肪酸；银离子色谱柱法和尿素包合法是当前分离多不饱和脂肪酸的最有效方法，但均存在载荷量低，操作繁琐、耗时，产品回收率低的缺陷。我们的结果：尿素包合法结合银离子，香榧油脂肪酸乙酯首先采用尿素包合法将金松酸的纯度从7％提升到50％，回收率为46％；在此基础上进一步利用银离子色谱将金松酸纯度提高到99％，回收率为40％。经过两步富集，虽然金松酸的纯度可达到99％，但金松酸总回收率为18.4％。
[0004]高速逆流色谱(High
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speed Counter
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current Chromatograph,HSCCC)是一种新型液液分配色谱技术。它是建立在一种特殊的流体动力学平衡的基础上，利用螺旋管的高速行星式运动产生一种不对称离心力，使互不相溶的两相溶剂不断混合，同时保留其中的一相(固定相)，利用恒流泵连续输入另一相(流动相)，此时在螺旋柱中任何一部分，两相溶剂反复进行着无限次的分配过程。与传统液
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固色谱相比，其流动相、固定相都是液体，不需要固体支撑或载体而避免对样品的不可逆吸附；其次，它的分离效率高，分离时间短，一般一次分离只需几个小时；此外，它还具有操作便捷、液－液分配体系选择广泛、分离量大及重现性好等优点，易形成连续化和自动化。国内外应用HSCCC分离天然植物中活性物质的研究已有很多。如专利CN201310011888.4公开了一种利用高速逆流色谱法制备DHA的方法。在正庚烷:乙腈:乙酸:甲醇＝4:5:1:1的体系下，从DHA含量为50％的裂壶藻脂肪酸皂化液中提取得到纯度为99.54％的DHA。在此制备过程中起始物料DHA含量高，且其中结构类似的干扰脂肪酸EPA含量仅为0.42％，其它脂肪酸含量低，所以通过逆流色谱可以较易得到高纯度的DHA。专利CN110590545A公开了一种完全分离油酸和亚油酸的方法。在正己烷:乙腈:水＝6:6:2体系中，将70％
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80％的高纯度油酸制备得到纯度高于99％的油酸。在分离原料中油酸含量较高、与亚油酸之间含量差别较大，且油酸与亚油酸之间不存在阻碍逆流色谱法分离的等效链长原则，较易实现分离。Hammann通过三步逆流色谱分离得到纯度为99％的金松酸，但其回收率仅为10％。尽管如此，本实验室经过一年多的重复试验依然无法重复出其分
离效果，金松酸与亚油酸因“相同的有效碳数”而共洗脱的问题依然是瓶颈。在前期的实验中，研究发现银离子柱层析因柱效高可以很好的分离饱和度不同的脂肪酸，但其处理量小，回收率低，且对低起始浓度的目标脂肪酸分离效果不佳。而逆流色谱处理量大、回收率高，为了克服金松酸与亚油酸共洗脱的问题，本专利技术提出了逆流色谱耦合银离子络合技术，实现高纯度金松酸的高效分离。

技术实现思路

[0005]为了克服现有技术存在的上述缺陷，本专利技术提出一种高速逆流色谱耦合银离子络合技术分离富集香榧籽油中金松酸的方法，实现高纯度金松酸的高效分离。本专利技术着眼于一步实现香榧籽油中金松酸的富集，结合了逆流色谱效率高、分离速度快，同时结合了银离子对于双键的高选择性，实现高回收率的制备，具有产品回收率大，工艺简单、省时、经济、高效等诸多优点。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0007]一种利用香榧籽油制备高纯度金松酸乙酯的方法，所述方法包括以下步骤：
[0008](1)香榧籽油(即香榧油)与乙醇钠的无水乙醇溶液发生酯交换反应，制备含金松酸乙酯的脂肪酸乙酯样品；
[0009](2)流动相和固定相的预平衡：固定相为乙腈或乙腈与二氯甲烷的混合溶液；所述流动相为正己烷；将所述流动相和固定相混溶于分液漏斗中，摇匀后静置一夜分层，分离，即得预平衡后的固定相和预平衡后的流动相；
[0010](3)步骤(2)中所述预平衡后的固定相溶解银离子盐后，充满高速逆流色谱仪，设定恒温循环器的温度为15～25℃，开启高速逆流色谱仪主机，调节主机转速1000r/min，取步骤(2)所述方法制得的预平衡后的流动相A以1ml/min的流速泵入分离柱，至固定相
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流动相体系达到动态平衡；所述银离子盐的质量为预平衡后的固定相质量的0.125～1％；所述银离子盐为硝酸银、三氟乙酸银、辛酸银或硬脂酸银中的一种或多种；
[0011](4)将步骤(1)中含金松酸乙酯的脂肪酸乙酯样品溶于步骤(2)所述方法制得的预平衡后的流动相B中，由进样阀进样，根据紫外检测器或薄层色谱监测结果，收集含金松酸乙酯的流出组分；所述含金松酸乙酯的脂肪酸乙酯样品的质量以步骤(3)中预平衡后的固定相的体积计为0.2mg～2mg/mL。预平衡后的流动相B的体积足够溶解含金松酸乙酯的脂肪酸乙酯样品即可。
[0012]上述内容中的预平衡后的流动相A、预平衡后的流动相B都是步骤(2)中得到的预平衡后的流动相，无特殊含义，之所以用字母区分开，只是为了方便描述。
[0013]进一步，步骤(1)中所述含金松酸乙酯的脂肪酸乙酯样品的制备过程为：香榧籽油与乙醇钠的无水乙醇溶液在55℃下搅拌反应2小时，反应结束后，正己烷萃取，静置分相，取上相清液用蒸馏水洗涤并蒸干，即得所述含金松酸乙酯的脂肪酸乙酯样品；香榧籽油、乙醇钠与无水乙醇的质量比为1:0.016:0.25。
[0014]优选地，恒温循环器的温度为15℃。温度过高有机相压力大，因此在低温效果更好，但温度过低会导致溶剂黏度大，不利于上样。
[0015]进一步，步骤(2)中固定相为体积比为2:3的乙腈与二氯甲烷的混合溶液；
[0016]优选地，步骤(2)中所述固定相为乙腈。
[0017]优选地，步骤(4)中所述预平衡后的流动相B的体积以所述含金松酸乙酯的脂肪酸乙酯样品的质量计为2～10ml/g，更优选10mL/g。
[0018]优选地，所述含金松酸乙酯的脂肪酸乙酯样品的质量以步骤(3)中预平衡后的固定相的体积计为0.4mg/mL。
[0019]优选地，步骤(3)中所述银离子盐为硝酸银。
[0020]进一步优选地，步本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利用香榧籽油制备高纯度金松酸乙酯的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：(1)香榧籽油与乙醇钠的无水乙醇溶液发生酯交换反应，制备含金松酸乙酯的脂肪酸乙酯样品；(2)流动相和固定相的预平衡：固定相为乙腈或乙腈与二氯甲烷的混合溶液；所述流动相为正己烷；将所述流动相和固定相混溶于分液漏斗中，摇匀后静置一夜分层，分离，即得预平衡后的固定相和预平衡后的流动相；(3)步骤(2)中所述预平衡后的固定相溶解银离子盐后，充满高速逆流色谱仪，设定恒温循环器的温度为15～25℃，开启高速逆流色谱仪主机，调节主机转速1000r/min，取步骤(2)所述方法制得的预平衡后的流动相A以1ml/min的流速泵入分离柱，至固定相
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流动相体系达到动态平衡；所述银离子盐的质量为预平衡后的固定相质量的0.125～1％；所述银离子盐为硝酸银、三氟乙酸银、辛酸银或硬脂酸银中的一种或多种；(4)将步骤(1)中含金松酸乙酯的脂肪酸乙酯样品溶于步骤(2)所述方法制得的预平衡后的流动相B中，由进样阀进样，根据紫外检测器或薄层色谱监测结果，收集含金松酸乙酯的流出组分；所述含金松酸乙酯的脂肪酸乙酯样品的质量以步骤(3)中预平衡后的固定相的体积计为0.2mg～2mg/mL。2.如权利要求1所述的利用香榧籽油制备高纯度金松酸乙酯的方法，其特征在于：步骤(1)中所述含金松酸乙酯的脂肪酸乙酯样品的制备过程为：香榧籽油与乙醇钠的无水乙醇溶液在55℃下搅拌反应2小时，反应结...

【专利技术属性】
技术研发人员：孟祥河，温思思，叶沁，宋丽丽，吴家胜，余宁翔，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：