一种非编码RNA生物标志物lnc-Wdr5的应用制造技术

本发明专利技术涉及一种非编码RNA生物标志物lnc

【技术实现步骤摘要】
一种非编码RNA生物标志物lnc
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Wdr5的应用


[0001]本专利技术涉及一种非编码RNA生物标志物lnc
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Wdr5的应用，具体为lnc
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Wdr5在诊断2型糖尿病中的应用，属于细胞生物学和生物医学


技术介绍

[0002]长链非编码RNA(Long non
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coding RNA,lncRNA)是一种长度大于200bp的非编码RNA。它们能以RNA的形式在表观遗传水平、转录水平及转录后水平对基因进行调控。lncRNA参与基因组印迹、DNA甲基化、X染色体失活等生命过程
[1,2]。因为lncRNA具有和mRNA类似的polyA尾端，较为稳定，因此可以在组织、血清和尿液中检测出来
[3
‑
5]。
[0003]lncRNA逐渐成为控制代谢组织发育和功能的重要调控元件
[6]。代谢和葡萄糖稳态的调节是基本的生化过程，该过程包括从肠道吸收糖，从胰腺分泌胰岛素，在肝脏产生葡萄糖，以及脂肪、肌肉和其他组织对葡萄糖的摄取。胰腺通过分泌关键的内分泌激素(胰岛素和胰高血糖素)，在调节全身性葡萄糖代谢中起关键作用。其中胰岛素是合成代谢的主调节剂，它控制周围以及中枢神经系统相关的代谢。胰岛素合成和分泌功能异常、代谢器官对胰岛素敏感度异常是2型糖尿病发病机理的基础。lncRNA的发现为调节网络增加了新的复杂性
[7]。一些GWAS研究报告了lncRNA被定位到糖尿病易感基因座
[8
>‑
11]，所有这些都暗示了lncRNA在胰岛素抵抗，糖尿病及其相关并发症中的关键作用。
[0004]胰岛是研究人员了解糖尿病的病理生理学的重要中心节点
[12]。据报道，另一种lncRNA MEG3在1型糖尿病和2型糖尿病小鼠模型的胰腺组织中被下调，其表达在MIN6和原代小鼠胰岛细胞中受到葡萄糖的动态调节
[13]。Cunnington
[14]等发现，当ANRIL(antisense non
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coding RNA in the INK4 locus，INK4基因座的反义非编码RNA，ANRIL)的表达量下降时可导致包括糖尿病在内的多种疾病发生。以上研究提示，lncRNA在维持胰岛细胞功能稳态发挥着重要作用，有可能成为诊断2型糖尿病的生物标志物。
[0005]专利技术人课题组长年致力于糖尿病相关lncRNA的研究，于2018.04.08申请专利技术专利《胰岛长链非编码RNA 1810019D21Rik及其应用》，于2019.04.02申请专利技术专利《一种2型糖尿病的诊断引物及试剂盒、以及非编码RNA分子标志物的应用》，并于2020.12.21申请专利技术专利《一种非编码RNA生物标志物lnc
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βFaar的应用》。这些均是专利技术人课题组关于胰岛β细胞相关lncRNA的已有研究成果，未来还会有更多的研究来揭示与胰岛β细胞相关的lncRNA，现在专利技术人课题组以最新获得的研究成果申请本专利。

技术实现思路

[0006]本专利技术的主要目的是：针对现有技术存在的问题，基于专利技术人课题组的研究成果，提出一种非编码RNA生物标志物lnc
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Wdr5的应用，具体包括：2型糖尿病的诊断引物及其用途，基于该诊断引物的诊断试剂盒及其用途，生物标志物lnc
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Wdr5的检测方法，生物标志物lnc
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Wdr5的用途。
[0007]本专利技术解决其技术问题的技术方案如下：
[0008]一种2型糖尿病的诊断引物，其特征是，包括lnc
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Wdr5正向引物SEQ ID NO:2以及lnc
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Wdr5反向引物SEQ ID NO:3。
[0009]上述lnc
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Wdr5正向引物和反向引物可用以检测非编码RNA分子标志物lnc
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Wdr5的表达水平，从而为诊断2型糖尿病提供依据。
[0010]本专利技术还提出：
[0011]一种2型糖尿病的诊断试剂盒，其特征是，包括前文所述的诊断引物。
[0012]优选地，所述诊断试剂盒还包括：作为阳性对照的非编码RNA分子标志物，所述非编码RNA分子标志物为序列如SEQ ID NO:1所示的lnc
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Wdr5。
[0013]采用该试剂盒，可通过检测lnc
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Wdr5的表达水平为诊断2型糖尿病提供依据。
[0014]本专利技术还提出：
[0015]一种非编码RNA分子标志物的检测方法，其特征是，采用前文所述的诊断引物，或采用前文所述的诊断试剂盒；所述非编码RNA分子标志物为序列如SEQ ID NO:1所示的lnc
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Wdr5。
[0016]优选地，所述检测方法包括以下步骤：
[0017]S1.提取血清样本或脂肪样本的总RNA；
[0018]S2.采用S1提取到的总RNA，经逆转录获得cDNA；
[0019]S3.采用诊断引物，以实时荧光定量PCR法检测S2所得cDNA中lnc
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Wdr5的表达量；所述实时荧光定量PCR法采用染料法。
[0020]本专利技术还提出：
[0021]前文所述诊断引物的用途，其特征是，所述用途为用于制备预防或治疗2型糖尿病的药物，或者为用于筛选预防或治疗2型糖尿病的药物，或者为用于制备或筛选诊断2型糖尿病的产品。
[0022]前文所述诊断试剂盒的用途，其特征是，所述用途为用于制备预防或治疗2型糖尿病的药物，或者为用于筛选预防或治疗2型糖尿病的药物，或者为用于制备诊断2型糖尿病的医疗工具。
[0023]一种非编码RNA分子标志物的用途，其特征是，所述非编码RNA分子标志物为序列如SEQ ID NO:1所示的lnc
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Wdr5；所述用途为用于制备预防或治疗2型糖尿病的药物，或者为用于筛选预防或治疗2型糖尿病的药物，或者为用于制备或筛选诊断2型糖尿病的产品，或者为用于制备诊断2型糖尿病的检测标志物。其中，所述产品包括前文所述诊断引物、或前文所述诊断试剂盒；所述药物的作用包括调节胰岛素的合成或分泌。
[0024]优选地，所述药物为原料药、药物制剂；所述产品为制剂、芯片、试剂、试剂盒。
[0025]专利技术人经调研发现，血液中存在着上万种非编码RNA，其具有含量丰富、性质稳定、便于检测、且与特异性疾病存在着显著关联性等特点。血液中的非编码RNA由组织分泌，因此，血液中的非编码RNA的含量应能间接反映组织中的表达水平；在此基础上，通过无创性或低创性抽取血样的手段，以快速、灵敏、特异性的定量检测方法，筛选2型糖尿病患者血液中特异性表达或异常表达的循环非编码RNA作为分子标志物，应能作为糖尿病早期的辅助诊断技术手段，从而为遏制当前爆发性的糖尿病发病趋势贡献重要的社会价值。
[0026]专利技术人在实践研究中本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种2型糖尿病的诊断引物，其特征是，包括lnc
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Wdr5正向引物SEQ ID NO:2以及lnc
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Wdr5反向引物SEQ ID NO:3。2.一种2型糖尿病的诊断试剂盒，其特征是，包括权利要求1所述的诊断引物。3.根据权利要求2所述的诊断试剂盒，其特征是，所述诊断试剂盒还包括：作为阳性对照的非编码RNA分子标志物，所述非编码RNA分子标志物为序列如SEQ ID NO:1所示的lnc
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Wdr5。4.一种非编码RNA分子标志物的检测方法，其特征是，采用权利要求1所述的诊断引物，或采用权利要求2或3所述的诊断试剂盒；所述非编码RNA分子标志物为序列如SEQ ID NO:1所示的lnc
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Wdr5。5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征是，所述检测方法包括以下步骤：S1.提取血清样本或脂肪样本的总RNA；S2.采用S1提取到的总RNA，经逆转录获得cDNA；S3.采用诊断引物，以实时荧光定量PCR法检测S2所得cDNA中lnc
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Wdr5的表达量；...

【专利技术属性】
技术研发人员：金亮，刘禹宏，张方方，杨悦，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：