具有氨基酸结构VNVVPTFGKKKGP的生物活性肽及其制备方法和应用技术

本发明专利技术属于蛋白领域，涉及具有氨基酸结构VNVVPTFGKKKGP的生物活性肽及其制备方法和应用，主要包括生物活性肽RFVNVVPTFGKKKGP、RFVNVVPTFGKKKGPNA和VNVVPTFGKKKGP。经过体外免疫调节功能实验，发现生物活性肽RFVNVVPTFGKKKGP、RFVNVVPTFGKKKGPNA和VNVVPTFGKKKGP具有很好的免疫调节功能。本发明专利技术的RFVNVVPTFGKKKGP、RFVNVVPTFGKKKGPNA和VNVVPTFGKKKGP在有炎症发生的情况下对体外巨噬细胞吞噬中性红能力具有显著的促进作用，可提高机体免疫力，降低机体发病率，促进巨噬细胞增殖，提高生命的质量，对开发具有免疫调节功能的食品、保健品和药物具有十分重要的意义。义。义。

【技术实现步骤摘要】
具有氨基酸结构VNVVPTFGKKKGP的生物活性肽及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及蛋白领域，尤其是涉及具有氨基酸结构VNVVPTFGKKKGP的生物活性肽及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]生物活性肽因其具有很多潜在的生物功能，所以引起人们越来越多的关注，成为科学研究的热点之一。目前很多生物活性肽的有益效果也已经得到了很好的证明，如抗癌、降血压、抗菌、降胆固醇、抗糖尿病等等特性。当前最权威的生物活性肽数据库BIOPEP
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UMW中已报告了3000多个不同的生物活性肽，但是由于生活肽的数量实在是太多，所以，还有非常多的多肽有待研究其相关性能。
[0003]免疫调节肽是继阿片肽发现后首次从乳中获得并证明其生理活性的一类生物活性肽。1981年Jolles等人首次发现，利用胰蛋白酶水解人乳蛋白，可以得到一个氨基酸序列为Val
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Glu
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Pro
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Ile
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Pro
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Tyr的六肽，体外实验证明该肽能够增强小鼠腹腔巨噬细胞对绵羊红细胞的吞噬作用。Migliore
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Samour等人发现来自酪蛋白的六肽Thr
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Thr
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Met
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Pro
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Leu
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Trp能够刺激绵羊血红细胞对小鼠腹膜巨噬细胞的吞噬作用以及增强对于肺炎克雷伯菌的抵抗，具有抗炎功能。李素萍等人用合成的小鼠骨髓巨噬细胞来与源肽(PGPIPN)饲喂大鼠发现大鼠腹腔巨噬细胞的吞噬作用和红细胞相关的抗炎功能有显著的增强。Bowdis等人在研究来源于牛中性粒细胞的13氨基酸肽indolicidin的免疫功能时发现，多肽indolicidin在巨噬细胞样细胞系中抑制LPS诱导的TNF
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α产量。
[0004]但是当这些小肽未从蛋白质中酶解分离时，这些蛋白质本身往往是不具备免疫调节活性的。如何从已知氨基酸序列的种类繁多的蛋白质中寻找具有特定功能的生物活性肽，并研究这些多肽的功能是蛋白领域研究的方向之一。
[0005]40S ribosomal protein S30蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示。目前，现有技术中并没有关于40S ribosomal protein S30蛋白多肽片段相关功能的研究。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供具有氨基酸结构VNVVPTFGKKKGP的生物活性肽及其制备方法和应用，具体而言，主要涉及生物活性肽RFVNVVPTFGKKKGP、生物活性肽RFVNVVPTFGKKKGPNA和生物活性肽VNVVPTFGKKKGP及其制备方法和应用。
[0007]本专利技术的目的可以通过以下技术方案来实现：
[0008]本专利技术第一方面，提供具有氨基酸结构VNVVPTFGKKKGP的生物活性肽，选自生物活性肽RFVNVVPTFGKKKGP、生物活性肽RFVNVVPTFGKKKGPNA或生物活性肽VNVVPTFGKKKGP中的一种或几种：
[0009]生物活性肽RFVNVVPTFGKKKGP的氨基酸序列为Arg
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Phe
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Val
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Asn
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Val
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Val
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Pro
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Thr
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Phe
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Gly
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Lys
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Lys
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Lys
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Gly
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Pro；如SEQ ID NO：1、所示。
[0010]生物活性肽RFVNVVPTFGKKKGPNA的氨基酸序列为Arg
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Phe
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Val
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Asn
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Val
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Val
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Pro
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Thr
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Phe
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Gly
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Lys
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Lys
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Lys
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Gly
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Pro
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Asn
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Ala；如SEQ ID NO：2所示。
[0011]生物活性肽VNVVPTFGKKKGP的氨基酸序列为Val
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Asn
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Val
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Val
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Pro
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Thr
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Phe
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Gly
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Lys
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Lys
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Lys
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Gly
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Pro，如SEQ ID NO：3所示。
[0012]较优的，所述生物活性肽RFVNVVPTFGKKKGP、生物活性肽RFVNVVPTFGKKKGPNA或生物活性肽VNVVPTFGKKKGP为小鼠脾脏来源淋巴细胞肽。具体均来源于40S ribosomal protein S30蛋白，并且分别为40S ribosomal protein S30蛋白第41～55位、第41～57位和第43～55位的氨基酸残基。
[0013]40S ribosomal protein S30蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示。40S ribosomal protein S30蛋白的氨基酸序列以及对应的核苷酸序列为既有技术，编码40S ribosomal protein S30蛋白第41～55位、第41～57位和第43～55位氨基酸残基的核苷酸片段能编码成熟的生物活性肽RFVNVVPTFGKKKGP、生物活性肽RFVNVVPTFGKKKGPNA或生物活性肽VNVVPTFGKKKGP。
[0014]较优的，所述生物活性肽RFVNVVPTFGKKKGP、生物活性肽RFVNVVPTFGKKKGPNA或生物活性肽VNVVPTFGKKKGP具有抗炎功能和免疫调节功能。
[0015]本专利技术还提供编码所述生物活性肽RFVNVVPTFGKKKGP、生物活性肽RFVNVVPTFGKKKGPNA或生物活性肽VNVVPTFGKKKGP的多核苷酸。
[0016]本专利技术第二方面，提供所述生物活性肽RFVNVVPTFGKKKGP、生物活性肽RFVNVVPTFGKKKGPNA或生物活性肽VNVVPTFGKKKGP的制备方法，可以通过基因工程的方法人工合成，可以从细胞中通过分离纯化的方法直接获得，可以直接通过化学合成制备。
[0017]通过基因工程的方法人工合成所述生物活性肽RFVNVVPTFGKKKGP、生物活性肽RFVNVVPTFGKKKGPNA或生物活性肽VNVVPTFGKKKGP是本领域技术人员能够实现的技术方案，例如可以是以DNA重组技术为基础，通过合适的DNA模板来控制多肽的序列本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.具有氨基酸结构VNVVPTFGKKKGP的生物活性肽，其特征在于，选自生物活性肽RFVNVVPTFGKKKGP、生物活性肽RFVNVVPTFGKKKGPNA或生物活性肽VNVVPTFGKKKGP中的一种或几种：生物活性肽RFVNVVPTFGKKKGP的氨基酸序列为Arg
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Phe
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Val
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Asn
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Val
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Val
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Pro
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Thr
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Phe
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Gly
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Lys
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Lys
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Lys
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Gly
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Pro；生物活性肽RFVNVVPTFGKKKGPNA的氨基酸序列为Arg
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Phe
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Val
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Asn
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Val
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Val
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Pro
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Thr
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Phe
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Gly
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Lys
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Lys
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Lys
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Gly
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Pro
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Asn
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Ala；生物活性肽VNVVPTFGKKKGP的氨基酸序列为Val
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Asn
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Val
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Val
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Pro
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Thr
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Phe
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Gly
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Lys
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Lys
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Lys
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Gly
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Pro。2.编码生物活性肽RFVNVVPTFGKKKGP、生物活性肽RFVNVVPTFGKKKGPNA或生物活性肽VNVVPTFGKKKGP的多核苷酸。3.生物活性肽RFVNVVPTFGKKKGP、生物活性肽RFVNVVPTFGKKKGPNA或生物活性肽VNVVPTFGKKKGP的制备方法，其特征在于，通过基因工程的方法人工合成，从细胞中通过分离纯化的方法直接获得，或直接通过化学合成制备。4.如权利要求1所述具有氨基酸结构VNVVPTFGKKKGP的生物...

【专利技术属性】
技术研发人员：张少辉，张伯宇，占文静，
申请(专利权)人：浙江辉肽生命健康科技有限公司，
类型：发明
国别省市：