破伤风梭状芽孢杆菌培养基制造技术

本发明专利技术涉及微生物领域，具体而言，涉及一种破伤风梭状芽孢杆菌培养基。该培养基包含菌种活化培养基和产毒培养基，成份中不含有动物源氮源。通过本发明专利技术配方各无动物源氮源组分及含量的适当组合，在去除无动物源成分的基础上，同时也提高了破伤风梭状芽孢杆菌毒素表达量，在小试实验规模其毒素产量可达到95Lf/ml。在小试实验规模其毒素产量可达到95Lf/ml。

【技术实现步骤摘要】
破伤风梭状芽孢杆菌培养基


[0001]本专利技术涉及微生物领域，具体而言，涉及一种破伤风梭状芽孢杆菌培养基。

技术介绍

[0002]破伤风是破伤风梭状芽孢杆菌感染(Clostridium.tetani)引起的一种危及生命的疾病。破伤风梭状芽孢杆菌通过释放破伤风神经毒素而引起疾病，破伤风毒素最低致死剂量仅2.5ng/kg。多年来，破伤风类毒素疫苗一直用于预防该疾病。破伤风疫苗是基于破伤风梭状芽孢杆菌产生的毒素经脱毒而得。
[0003]类毒素的生产包含以下几个步骤：1)经过一步或多步菌种活化培养，使细菌在种子活化培养基中保持良好的生长；2)将活化菌种接种于发酵罐中，于产毒培养基中发酵产生破伤风毒素；3)最终毒素从培养物中分离，经过纯化、脱毒后产生类毒素。
[0004]在传统的生产方法中，破伤风梭状芽孢杆菌是在含有动物源性成分的培养基中培养的，这些成分可满足细菌对蛋白质、肽、氨基酸和必须生长因子的营养需求。然而，培养基中的动物源性成分可能将有害的污染物或杂质如过敏原、病毒、朊病毒或其它不可控的生物效应物质带入到类毒素中，对人体引发不良本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种破伤风梭状芽孢杆菌菌种活化培养基，其特征在于，当其配制为溶液时，工作浓度为包含如下成分的溶液：非动物源氮源总氮1.4g/L～1.6g/L，酵母浸出粉4.5g/L～5.5g/L，磷酸二氢钾4.5g/L～5.5g/L，L
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半胱氨酸盐酸盐0.4g/L～0.6g/L，刃天青0.0009g/L～0.0011g/L，维生素K1 0.0009g/L～0.0011g/L，琼脂粉1.4g/L～1.6g/L。2.根据权利要求1所述的菌种活化培养基，其特征在于，所述非动物源氮源包含大豆蛋白胨、选择性大豆蛋白胨和Hysoy 4D、酵母胨和大米胨中的至少一种。3.一种破伤风梭状芽孢杆菌产毒培养基，其特征在于，当其配制为溶液时，工作浓度为包含如下成分的溶液：非动物源氮源总氮1.6g/L～2g/L，酵母浸出粉4.5g/L～5.5g/L，乙酸钠4.5g/L～5.5g/L，磷酸二氢钾0.9g/L～1.1g/L，磷酸氢二钠0.9g/L～1.1g/L，甘油55ml/L～65ml/L，葡萄糖2.3g/L～2.7g/L，六水三氯化铁0.029g/L～0.031g/L，Ⅰ号因子4.9ml/L～5.1ml/L，Ⅱ号因子1.96ml/L～2.05ml/L，Ⅲ号因子0.95ml/L～1.05ml/L，活性炭1.8g/L～2.2g/L；所述的Ⅰ号因子包括以下成分：盐酸硫胺0.29g/L～0.31g/L，核黄素0.29g/L～0.31g/L，吡哆醇盐酸盐0.29g/L～0.31g/L，泛酸钙1.14g/L～1.26g/L，生物素0.003g/L～0.005g/L，无水...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡浩，雷丹，
申请(专利权)人：苏州微超生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：