一种胶体金间接标记、封闭的方法技术

本发明专利技术涉及生物分析检测技术领域，尤其涉及一种胶体金间接标记、封闭的方法。该方法利用大分子封闭剂封闭后再利用小分子封闭剂封闭，使得胶体金表面的蛋白偶联物稳定性得到明显增强，利用该蛋白偶联物进行免疫检测可以有效提高偶联效率、敏感性、稳定性。稳定性。

【技术实现步骤摘要】
一种胶体金间接标记、封闭的方法


[0001]本专利技术涉及生物分析检测
，尤其涉及一种胶体金间接标记、封闭的方法。

技术介绍

[0002]胶体金标记实质上是蛋白质等高分子直接被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。吸附机理是蛋白质等大分子经过一种或多种作用力和胶体金相互作用，形成相对稳定的复合物，这种作用力是静电作用、疏水作用、金
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巯基共价结合等。胶体金和大分子物质相互作用后，通常会用非目标蛋白例如BSA进行封闭，封闭后由于位阻作用，在胶体金的表面有很多空白的位点，这些空白位点会吸附蛋白以及特定的小分子物质，和已吸附的目标蛋白竞争，造成目标蛋白脱落，稳定性不好。利用胶体金和目标蛋白的复合物制备成胶体金产品，具有方便、快速、无需仪器等优点，在生物检测领域得到了广泛的应用。
[0003]申请号为201110044743.5的中国专利“一种胶体金标记方法”描述了通过改变标记缓冲液pH的办法将蛋白直接标记在胶体金颗粒上，提升了稳定性和灵敏度。申请号为201310485455.2的中国专利“一种用于快速检测的胶体金共价标记方法本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种胶体金间接标记、封闭的方法，其特征在于，包括：步骤1：获得包被有第一偶联物的胶体金颗粒，然后加入第一封闭液封闭，得复合物1；步骤2：向胶体金
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第一偶联物
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第一封闭剂复合物中加入第二封闭液封闭，得复合物2；步骤3：向复合物2中加入第二偶联物，获得胶体金蛋白偶联物；所述第一封闭剂液由第一封闭剂和缓冲液组成，所述第一封闭剂选自BSA、Casein、孔蓝蛋白、PEG20000、PEG6000的一种或多种；所述第二封闭剂液由第二封闭剂和缓冲液组成，所述第二封闭剂选自甘氨酸、精氨酸、赖氨酸、组氨酸中的一种或多种。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一封闭剂为BSA；所述第二封闭剂为甘氨酸。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一封闭液中第一封闭剂的质量百分含量为0.1
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2％；所述第二封闭液中第二封闭剂的质量百分含量为0.1
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2％。4.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：付清山，王米格，刘丽君，李静辉，于林，刘功成，渠海，付光宇，吴学炜，
申请(专利权)人：郑州安图生物工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：