一种均相化学发光分析的方法及其应用技术

本发明专利技术涉及一种均相化学发光分析方法及其应用。该方法包括如下步骤：步骤S1，将待测样品与受体试剂、供体试剂相接触，反应后生成待测混合物；其中，所述受体试剂包含能够与活性氧反应产生可检测的化学发光信号的受体颗粒；所述供体试剂包含能够在激发状态下生成活性氧的供体颗粒，所述供体颗粒包括第一载体，所述第一载体的内部填充有敏化剂，所述第一载体的表面化学键合特异性结合配对成员中的一员；步骤S2，利用能量或者活性化合物激发所述待测混合物化学发光，检测所述化学发光的信号强度；从而据此判断待测样品中是否含有待测目标分子和/或待测目标分子在待测样品的浓度。所述方法具有超高的灵敏度，又有很宽的检测量程。程。程。

【技术实现步骤摘要】
一种均相化学发光分析的方法及其应用


[0001]本专利技术属于化学发光分析领域，具体涉及一种均相化学发光分析方法及其应用。

技术介绍

[0002]免疫分析经过半个多世纪的发展，已经发展出了很多种类。根据测定过程中是否要将待测物质与反应体系分离可以分为非均相(Heterogenous)免疫分析和均相(Homogeneous)免疫分析。非均相免疫分析，是指引入探针进行标记的操作过程中，各种相关试剂混合反应后需要进行分离，将待测物与反应体系分离后再进行检测，是现在免疫分析中的主流方法。如广为人们熟知的酶联免疫吸附法(ELISA法)和磁微粒化学发光法等。均相免疫分析则是指在测定过程中将待测物与反应体系中的相关试剂混合反应后直接测定，而没有多余的分离或清洗的步骤。截止目前，多种灵敏的检测方法被应用于均相免疫分析，比如光学检测方法、电化学检测方法等。
[0003]例如，光激化学发光检测(Light Initiated Chemiluminescent Assay，LiCA)就是一种典型的均相免疫分析方法。它是基于两种微球表面包被的抗原或抗体，在液相本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种均相化学发光分析方法，其包括如下步骤：步骤S1，将待测样品与受体试剂、供体试剂相接触，反应后生成待测混合物；其中，所述受体试剂包含能够与活性氧反应产生可检测的化学发光信号的受体颗粒；所述供体试剂包含能够在激发状态下生成活性氧的供体颗粒，所述供体颗粒包括第一载体，所述第一载体的内部填充有敏化剂，所述第一载体的表面化学键合特异性结合配对成员中的一员；步骤S2，利用能量或者活性化合物激发所述待测混合物化学发光，检测所述化学发光的信号强度；从而据此判断待测样品中是否含有待测目标分子和/或待测目标分子在待测样品的浓度。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一载体的表面没有包被或连接有多糖物质，其直接化学键合特异性结合配对成员中的一员。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述第一载体的表面带有键合官能团，所述键合官能团用于将特异性结合配对成员中的一员化学键合在所述第一载体的表面。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述键合官能团选自胺基、酰胺基、羟基、醛基、羧基、马来酰亚胺基和巯基；优选选自醛基和/或羧基。5.根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于，所述第一载体表面的键合官能团的含量为100～500nmol/mg，优选为200～400nmol/mg。6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一载体的表面包被至少两个连续多糖层的涂层，其中第一多糖层与第二多糖层自发关联。7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述连续多糖层中的每一层自发地与前一多糖层中的每一层相关联。8.根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于，所述多糖具有侧基官能团，所述连续多糖层的所述官能团与所述前一多糖层的所述官能团所带电荷相反。9.根据权利要求6～8中任意一项所述的方法，其特征在于，所述多糖具有侧基官能团，并且所述连续多糖层通过所述官能团与所述前一多糖层的所述官能团之间的反应与所述前一多糖层共价连接。10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述连续多糖层的所述官能团在胺官能团和胺反应性官能团之间交替。11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，所述胺反应性官能团是醛基或羧基。12.根据权利要求6～11任意一项所述的方法，其特征在于，所述第一多糖层自发地与所述第一载体相关联。13.根据权利要求6～12中任意一项所述的方法，其特征在于，所述涂层的最外一层多糖层具有至少一个侧基官能团。14.根据权利要求6～13中任意一项所述的方法，其特征在于，所述涂层的最外一层多糖层的侧基官能团选自醛基、羧基、巯基、氨基、羟基和马来胺基中的至少一种；优选选自醛基和/或羧基。15.根据权利要求14所述的方法，其特征在于，所述涂层的最外一层多糖层的侧基官能团直接地或间接地化学键合特异性结合配对成员中的一员结合。16.根据权利要求6～15中任意一项所述的方法，其特征在于，所述多糖选自含有三个或更多个未修饰或修饰的单糖单元的碳水化合物；优选选自葡聚糖、淀粉、糖原、菊粉、果聚
糖、甘露聚糖、琼脂糖、半乳聚糖、羧基葡聚糖和氨基葡聚糖；更优选选自葡聚糖、淀粉、糖原和聚核糖。17.根据权利要求1～16中任意一项所述的方法，其特征在于，所述第一载体的粒径选自100～400nm，优选为150～350nm，更优选为180～220nm。18.根据权利要求1～17中任意一项所述的方法，其特征在于，所述第一载体为磁性或非磁性的，优选为非磁性的。19.根据权利要求1～18中任意一项所述的方法，其特征在于，所述第一载体的形状选自带、片、棒、管、孔、微滴定板、珠子、粒子和微球；优选为微球。20.根据权利要求1～19中任意一项所述的方法，其特征在于，所述第一载体的材质选自天然的、人工合成的或改性天然存在的聚合物；优选为人工合成的聚合物。21.根据权利要求20所述的方法，其特征在于，所述第一载体的材质选自琼脂糖、纤维素、硝化纤维素、醋酸纤维素、聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚乙烯、聚丙烯、聚(4-甲基丁烯)、聚丙烯酰胺、聚甲基丙烯酸酯、聚对苯二甲酸乙二醇酯、尼龙、聚丁酸乙烯或聚丙烯酸酯；优选选自聚苯乙烯、聚丙烯、聚(4-甲基丁烯)、聚丙烯酰胺、聚甲基丙烯酸酯、聚对苯二甲酸乙二醇酯或聚丙烯酸酯。22.根据权利要求1～21中任意一项所述的方法，其特征在于，所述第一载体为聚苯乙烯乳胶微球。23.根据权利要求1～22中任意一项所述的方法，其特征在于，所述敏化剂是光活化的光敏剂和/或化学活化的引发剂，优选为光活化的光敏剂。24.根据权利要求1～23中任意一项所述的方法，其特征在于，所述敏化剂选自亚甲基蓝、玫瑰红、卟啉、酞菁和叶绿素。25.根据权利要求1～24中任意一项所述的方法，其特征在于，所述特异性结合配对成员选自抗体、抗体片段、配体、寡核苷酸、寡核苷酸结合蛋白、凝集素、半抗原、抗原、免疫球蛋白结合蛋白、抗生物素蛋白、亲和素或生物素所组成的一对能够相互特异性结合的物质。26.根据权利要求25所述的方法，其特征在于，所述特异性结合配对成员为亲和素-生物素。27.根据权利要求25或26所述的方法，其特征在于，所述亲和素选自卵白亲和素、链霉亲和素、卵黄亲和素、中性亲和素和类亲和素，优选为...

【专利技术属性】
技术研发人员：康蔡俊，吴晨，赵卫国，刘宇卉，李临，
申请(专利权)人：科美诊断技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：