抗B7S1多肽及其用途制造技术

本发明专利技术提供了抗B7S1(B7‑H4)多肽，包括抗B7S1(B7‑H4)抗体及其免疫反应性片段、结合B7S1(B7‑H4)分子的嵌合抗原受体(CAR)，及其用途，尤其是在癌症治疗中的用途。本发明专利技术尤其涉及能够针对患病组织(包括癌性细胞)增强免疫系统活化的人源化抗B7S1抗体及其抗原结合片段，以及用于治疗疾病(包括癌症)的表达抗B7S1 CAR的经基因工程改造的免疫细胞。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗B7S1多肽及其用途本专利技术涉及抗B7S1(B7-H4)多肽，包括抗B7S1(B7-H4)抗体及其免疫反应性片段、结合B7S1(B7-H4)分子的嵌合抗原受体(CAR)、及其用途，特别是在治疗包括癌症在内的内科疾病中的用途，所述内科疾病与表达B7S1的致病细胞的存在相关。本专利技术尤其涉及能够针对患病组织(包括癌性细胞)增强免疫系统活化的人源化抗B7S1抗体及其抗原结合片段，以及用于治疗内科疾病(包括癌症)的表达抗B7S1CAR的经基因工程改造的免疫细胞，所述内科疾病与表达B7S1的致病细胞的存在相关。
技术介绍
B7S1(也称为B7-H4，B7x，VTCN1)，B7家族的成员之一，鉴定于2003年((Prasad等，Immunity2003,18:863-873；Sicaetal.,Immunity2003,18:849-861)，分别与人PD-L1和B7-H3共享18％和24％的氨基酸同一性(Zang等NatlAcadSciUSA2003,100:10388-10392)。其由两个免疫球蛋白(Ig)样结构域和一个大的疏水跨膜结构域(后接2个胞内氨基酸)组成。B7S1蛋白的表达限于专门的APC，并且可以由IL-10和IL-6诱导(Kryczek等,CancerResearch2007,67:8900-8905；Kryczek等,JImmunol2006,177:40-44)。在活化的T细胞上诱导其推定的受体，抑制了T细胞的增殖、细胞因子产生和细胞毒性(Prasad等,2003；Sica等,2003)。由于B7S1的表达见于多种实体瘤，并且与患者的结局及T细胞在肿瘤中的浸润呈负相关(Chen等,JImmunother2012,35:354-358；Chen等,CancerImmunolImmunother2011,60:1047-10552011；Jiang等,CancerImmunolImmunother2010,59:1707-1714；Kryczek等,CancerResearch2007,67:8900-8905；Quandt等,ClinCancerRes2011,17,3100-311；Xu等,OncolLett2016,11:1841-1846；Zang等,ProcNatlAcadSciUSA2007,104:19458-19463)，B7S1可作为有前景的候选靶标用于癌症免疫疗法，以重振抗肿瘤T细胞功能。然而，B7S1在肿瘤免疫中的功能意义以及凭借B7S1抑制T细胞功能的分子机制尚未建立。此外，到目前为止，尚未鉴定出B7S1的受体，并且其在肿瘤中的表达模式尚未建立。专利技术概述本文提供了抗体及其免疫反应性片段，其以高亲和力结合细胞(例如,癌细胞)表达的B7S1分子，并促进针对癌细胞的有效免疫应答。本文提供的抗体及其免疫反应性片段能够增强免疫系统的活化，因此提供了重要的治疗剂和诊断剂，用于靶向与B7S1分子表达和/或活性相关的病理状况。因此，本专利技术提供了与B7S1结合有关的方法、组合物、试剂盒和制品。在一个方面，本专利技术提供了一种分离的抗体或其抗原结合片段，其包含重链(HC)可变区序列和轻链(LC)可变区序列，其中所述抗体结合B7S1的胞外结构域，结合亲和力通过SPR分析确定为约1.5nM或优于1.5nM，例如通过SPR分析确定为1.0-1.4nM、0.5-1.0nM、0.1-0.5nM、0.4nM、0.3nM、0.2nM、0.1nM或更优。在某些实施方案中，本专利技术提供了一种抗体或其抗原结合片段，其包含以下的至少一个：(a)含有GYTFTSYWMH(SEQIDNO:1)的CDR1序列，(b)含有AIYPGNSDTDYNQKFKG(SEQIDNO:2)的CDR2序列，(c)含有TVAHYFDY(SEQIDNO:3)的CDR3序列，(d)含有KASQDVSFAVA(SEQIDNO:4)的CDR1序列，(e)含有SASYRYT(SEQIDNO:5)的CDR2序列，和(f)含有QQHYNTPLT(SEQIDNO:6)的CDR3序列。在某些实施方案中，本专利技术提供了一种抗体或其抗原结合片段，其中(a)所述HC包含含有GYTFTSYWMH(SEQIDNO:1)的CDR1序列，含有AIYPGNSDTDYNQKFKG(SEQIDNO:2)的CDR2序列，和含有TVAHYFDY(SEQIDNO:3)的CDR3序列，(b)所述LC包含含有KASQDVSFAVA(SEQIDNO:4)的CDR1序列，含有SASYRYT(SEQIDNO:5)的CDR2序列，和含有QQHYNTPLT(SEQIDNO:6)的CDR3序列。在某些实施方案中，所述抗体是嵌合抗体、人源化抗体或人抗体。在某些实施方案中，本专利技术的抗体或其抗原结合片段进一步包含人受体框架。在某些实施方案中，所述人受体框架源自人免疫球蛋白框架或人共有框架。在某些实施方案中，所述人受体框架包含VL的亚组κI框架序列，和VH的亚组III框架序列。一般而言，序列的亚组是如Kabat等,SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,第5版,NIHPublication91-3242,BethesdaMD(1991),1-3卷中的亚组。在某些实施方案中，对于VL，所述亚组是如Kabat等(同上)中的亚组κI。在某些实施方案中，对于VH，所述亚组是如Kabat等(同上)中的亚组III。在某些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含人共有框架。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含具有氨基酸序列改变的人共有框架，例如，1-15、1-10、2-9、3-8、4-7或5-6个氨基酸的改变。在某些实施方案中，本专利技术的抗体或其抗原结合片段包含HC可变区序列，所述HC可变区序列包含由SEQIDNO:7或8所示的氨基酸序列，或与SEQIDNO:7或8具有多于80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。在某些实施方案中，本专利技术的抗体或其抗原结合片段包含LC可变区序列，所述LC可变区序列包含由SEQIDNO:9或SEQIDNO:10所示的氨基酸序列，或与SEQIDNO:9或10具有多于80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。在某些实施方案中，所述HC可变区序列包含SEQIDNO:7的氨基酸序列，并且所述LC可变区序列包含SEQIDNO:9或SEQIDNO:10的氨基酸序列。在某些实施方案中，所述HC可变区序列包含SEQIDNO:8的氨基酸序列，并且所述LC可变区序列包含SEQIDNO:9或SEQIDNO:10的氨基酸序列。在某些实施方案中，所述抗体是IgG1、IgG2或IgG4同种型。在某些实施方案中，所述抗原结合片段选自：Fab、F(ab')2、Fab'、scFv和Fv。在某些实施方案中，本专利技术的抗体本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种分离的抗体或其抗原结合片段，其包含重链(HC)可变区序列和轻链(LC)可变区序列，其中所述抗体结合B7S1的胞外结构域，结合亲和力经SPR分析确定为约1-4nM。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20190321 CN PCT/CN2019/0790031.一种分离的抗体或其抗原结合片段，其包含重链(HC)可变区序列和轻链(LC)可变区序列，其中所述抗体结合B7S1的胞外结构域，结合亲和力经SPR分析确定为约1-4nM。


2.权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中
(a)所述HC包含
含有GYTFTSYWMH(SEQIDNO:1)的CDR1序列，
含有AIYPGNSDTDYNQKFKG(SEQIDNO:2)的CDR2序列，和
含有TVAHYFDY(SEQIDNO:3)的CDR3序列，
(b)所述LC包含
含有KASQDVSFAVA(SEQIDNO:4)的CDR1序列，
含有SASYRYT(SEQIDNO:5)的CDR2序列，和
含有QQHYNTPLT(SEQIDNO:6)的CDR3序列。


3.权利要求1或2所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体是嵌合抗体、人源化抗体或人抗体。


4.权利要求3所述的抗体或其抗原结合片段，其进一步包含人受体框架。


5.权利要求1-4中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述HC可变区序列包含由SEQIDNO:7所示的氨基酸序列或具有与SEQIDNO:7多于80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。


6.权利要求1-4中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述HC可变区序列包含由SEQIDNO:8所示的氨基酸序列或具有与SEQIDNO:8多于80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。


7.权利要求5或6所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述LC可变区序列包含由SEQIDNO:9所示的氨基酸序列或与SEQIDNO:9具有多于80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。


8.权利要求5或6所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述LC可变区序列包含由SEQIDNO:10所示的氨基酸序列或具有与SEQIDNO:10多于80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。


9.权利要求1-8中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述HC可变区序列包含SEQIDNO:7的氨基酸序列且所述LC可变区序列包含SEQIDNO:9的氨基酸序列，或所述HC可变区序列包含SEQIDNO:8的氨基酸序列且所述LC可变区序列包含SEQIDNO:10的氨基酸序列。


10.权利要求1-9中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体是IgG1、IgG2或IgG4同种型。


11.权利要求1-10中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗原结合片段选自：Fab、F(ab')2、Fab'、scFv和Fv。


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【专利技术属性】
技术研发人员：郭丽，孙甜甜，王妮丹，董晨，
申请(专利权)人：苏州鑫康合生物医药科技有限公司，北京鑫康合生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32