胶体金标记伤寒沙门菌重组抗原的方法、试剂条及试剂盒技术

本发明专利技术涉及一种胶体金标记伤寒沙门菌重组抗原的方法，包括以下步骤：（1）制备胶体金溶液；（2）将制备好的胶体金溶液调节pH值至低于最适pH值1.5～2.0；（3）一次性加入标记伤寒沙门菌重组抗原，加入量低于最适标记伤寒沙门菌重组抗原用量的70%～80%；（4）加入封闭剂和稳定剂，标记结束；打破安全范围，把免疫金放在一个相对不稳定但可控条件下，可明显提升产品显色强度和灵敏度，上述“相对不稳定但可控条件”指胶体金标记pH值略低于标记伤寒沙门菌重组抗原等电点，标记伤寒沙门菌重组抗原用量为不饱和量，以及封闭剂和稳定剂的同时加入，最终体现在产品上显色强度明显加深，灵敏度显著提高。

【技术实现步骤摘要】
胶体金标记伤寒沙门菌重组抗原的方法、试剂条及试剂盒
本专利技术属于金免疫
，具体涉及一种胶体金标记伤寒沙门菌重组抗原的方法、试剂条及试剂盒。
技术介绍
金免疫技术是一种以胶体金作为标记物的免疫标记技术，胶体金是氯金酸在还原剂的作用下，形成的带负电的疏水胶溶液，该溶液由于静电作用而成为稳定的胶体状态，即为胶体金，胶体金表面带负电荷，蛋白质的正电荷基团因静电吸附力而包被到胶体金颗粒表面，此过程即为胶体金标记，也称为金免疫。免疫金的特性主要受金颗粒、标记伤寒沙门菌重组抗原用量、pH值影响，最适标记伤寒沙门菌重组抗原用量一般为标记伤寒沙门菌重组抗原完全吸附于胶体金的最大量，最适pH值一般为接近或略高于待标记伤寒沙门菌重组抗原的等电点，但最适标记状态仅能够保证免疫金的稳定性，无法在免疫层析法中明显提升产品显色强度和灵敏度。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是针对以上不足，提供一种胶体金标记伤寒沙门菌重组抗原的方法，通过该方法可以提升产品显色强度和灵敏度。还提供一种胶体金标记伤寒沙门菌重组抗原的试剂条，其检本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种胶体金标记伤寒沙门菌重组抗原的方法，其特征在于：标记方法包括以下步骤：/n（1）制备胶体金溶液；/n（2）将制备好的胶体金溶液调节pH值至低于最适pH值1.5～2.0；/n（3）一次性加入标记伤寒沙门菌重组抗原，加入量低于最适标记伤寒沙门菌重组抗原用量的70%～80%；/n（4）加入封闭剂和稳定剂，标记结束。/n

【技术特征摘要】
1.一种胶体金标记伤寒沙门菌重组抗原的方法，其特征在于：标记方法包括以下步骤：
（1）制备胶体金溶液；
（2）将制备好的胶体金溶液调节pH值至低于最适pH值1.5～2.0；
（3）一次性加入标记伤寒沙门菌重组抗原，加入量低于最适标记伤寒沙门菌重组抗原用量的70%～80%；
（4）加入封闭剂和稳定剂，标记结束。


2.如权利要求1的胶体金标记伤寒沙门菌重组抗原的方法，其特征在于：步骤（3）中标记伤寒沙门菌重组抗原加入时间为2s。


3.如权利要求1的胶体金标记伤寒沙门菌重组抗原的方法，其特征在于：步骤（3）中的标记伤寒沙门菌重组抗原的加入量为：
每1mL胶体金溶液加入5.6~6.4µg伤寒沙门菌重组抗原，反应时间为10min。


4.如权利要求1-3任一项的胶体金标记伤寒沙门菌重组抗原的方法，其特征在于：步骤（2）中调节pH值所用溶液为锡酸钾溶液，用锡酸钾溶液将胶体金溶液pH值调至4.5~5.0；
锡酸钾溶液制备方法为称取2g锡酸钾，室温溶于100mL超纯水，用0.22μm滤膜过滤，4℃保存备用。


5.如权利要求1-3任一项的胶体金标记伤寒沙门菌重组抗原的方法，其特征在于：步骤（1）中胶体金溶液为采用柠檬酸三钠还原法制备的万分之二的纳米金。


6.如权利要求1-3任一项的胶体金标记伤寒沙门菌重组抗原的方法，其特征在于：步骤（1）中胶体金溶液的制备方法为：
氯金酸溶液：将10g氯金酸溶于超纯水中，待完全溶解后定容至1000mL，4℃避光保存备用；
柠檬酸三钠溶液：称取1g柠檬酸三钠，室温溶于100mL超纯水，用0.22μm滤膜过滤，4℃保存备用；
将2mL氯金酸溶液和98mL超纯水加入三口烧瓶中，加热至沸腾，然后加入4.5mL柠檬酸三钠溶液，待烧瓶内液体由蓝紫色变为酒红色，反应20min，冷却后室温避...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨明霞，杨盛林，戴晓华，杨帆，梁莉甜，范文翠，
申请(专利权)人：山东康华生物医疗科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37