一种突变体及其构建方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种突变体，其氨基酸序列为如下(a)或(b)：(a)至少取代、缺失或添加天然的精氨酸氧化酶的氨基酸序列的一个氨基酸，且与该序列具有90％以上同源性；或(b)至少取代、缺失或添加天然的精氨酸氧化酶的氨基酸序列的一个氨基酸，且与该序列具有相同的功能。本发明专利技术提供的精氨酸氧化酶突变体与野生型精氨酸氧化酶相比，突变体热稳定性更好。通过本发明专利技术所提供的构建方法得到的精氨酸氧化酶突变体热稳定性更好，在较高的温度下氧化L‑精氨酸时，仍然表现出优良的的催化活性，在L‑精氨酸生物传感器检测及生物化工等领域具有较高的应用潜力。

【技术实现步骤摘要】
一种突变体及其构建方法和应用
本专利技术涉及生物
，具体而言，涉及一种突变体及其构建方法和应用。
技术介绍
L-氨基酸氧化酶是一类生物体内参与氨基酸氧化代谢的重要氧化还原酶，能够以氧分子为电子受体催化L-氨基酸氧化脱氨，生成相应的酮酸、氨(NH3)和过氧化氢(H2O2)。有些L-氨基酸氧化酶能够专一性识别特定氨基酸，而不受其他种类氨基酸的干扰，因而在手性胺类化合物拆分、α-酮酸生物合成、临床样本、食品及氨基酸发酵过程中氨基酸含量检测等领域都发挥着重要作用。其中，L-精氨酸氧化酶能够特异性识别L-精氨酸，是生命活动的重要催化剂，且催化反应条件温和、产物单一、耗能小、产物易分离，在食品、化工、环保、能源以及医药领域都有着广泛地应用。然而，由于天然L-精氨酸氧化酶在高温、极端的酸碱度、有机溶剂、非天然底物、产物抑制等苛刻条件下的稳定性及催化活性将大大降低，限制了其在工业生产方面的应用。蛋白质工程是以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过化学、物理和分子生物学的手段进行基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造或制造一种新的蛋本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种突变体，其特征在于，其氨基酸序列为如下(a)或(b)：/n(a)至少取代、缺失或添加天然的精氨酸氧化酶的氨基酸序列SEQ ID NO.1的一个氨基酸，且所述突变体的氨基酸序列与SEQ ID NO.1具有90％以上同源性；或/n(b)至少取代、缺失或添加天然的精氨酸氧化酶的氨基酸序列SEQ ID NO.1的一个氨基酸，且所述突变体的氨基酸序列与SEQ ID NO.1具有相同的功能。/n

【技术特征摘要】
1.一种突变体，其特征在于，其氨基酸序列为如下(a)或(b)：
(a)至少取代、缺失或添加天然的精氨酸氧化酶的氨基酸序列SEQIDNO.1的一个氨基酸，且所述突变体的氨基酸序列与SEQIDNO.1具有90％以上同源性；或
(b)至少取代、缺失或添加天然的精氨酸氧化酶的氨基酸序列SEQIDNO.1的一个氨基酸，且所述突变体的氨基酸序列与SEQIDNO.1具有相同的功能。


2.根据权利要求1所述突变体，其特征在于，所述突变体的氨基酸序列被配置为SEQIDNO.1上的突变位点G34D、S38R、Y128R和Q332K中的一个或多个发生突变后的氨基酸序列。


3.根据权利要求2所述突变体，其特征在于，所述突变体的氨基酸序列为SEQIDNO.2～16中的任一种。


4.一种编码如权利要求3所述突变体的基因序列，其特征在于，所述基因序列被配置为SEQIDNO.17～31中的任一种，其中：
编码突变位点为G34D的突变体的核酸序列为SEQIDNO.17；
编码突变位点为S38R的突变体的核酸序列为SEQIDNO.18；
编码突变位点为Y128R的突变体的核酸序列为SEQIDNO.19；
编码突变位点为Q332K的突变体的核酸序列为SEQIDNO.20；
编码突变位点为G34D和S38R的突变体的核酸序列为SEQIDNO.21；
编码突变位点为G34D和Y128R的突变体的核酸序列为SEQIDNO.22；
编码突变位点为G34D和Q332K的突变体的核酸序列为SEQIDNO.23；
编码突变位点为S38R和Y128R的突变体的核酸序列为SEQIDNO.24；
编码突变位点为S38R和Q332K的突变体的核酸序列为SEQIDNO.25；
编码突变位点为Y128R和Q332K的突变体的核酸序列为SEQIDNO.26；
编码突变位点为G34D、S38R和Y128R的突变体的精氨酸氧化酶突变体的核酸序列为SEQIDNO.27；
编码突变位点为G34D、S38R和Q332K的突变体的精氨酸氧化酶突变体的核酸序列为SEQIDNO.28；
编码突变位点为S38R、Y128R和Q332K的...

【专利技术属性】
技术研发人员：马富强，陆泽林，江晶洁，张艺凡，杨广宇，
申请(专利权)人：中国科学院苏州生物医学工程技术研究所，
类型：发明
国别省市：江苏;32