一种数字熔解PCR多重检测试剂或试剂盒与方法技术

本发明专利技术公开了一种数字熔解PCR多重检测试剂或试剂盒与方法，属于生物技术的核酸领域。本发明专利技术所解决的技术问题是如何提升dPCR多重检测能力和肿瘤突变类型检测。本发明专利技术所公开的试剂含有n个探针小组，一个探针小组用于识别同一目标靶点，每个探针均连接有荧光基团与淬灭基团，每个探针小组均含有X个探针，且每个探针小组内各探针连接的荧光基团均不同，X≥2；将每个探针小组所连接的各荧光基团记为一种荧光基团组合，依据荧光基团组合的不同将n个探针小组分为m个探针大组，1≤m≤n；每个探针大组内，各探针小组间均至少有一个探针的Tm值不同。本发明专利技术的数字熔解PCR多重检测试剂可用于20重以上的基因突变类型的检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物技术的核酸领域，具体涉及一种数字熔解pcr多重检测试剂或试剂盒与方法。

技术介绍

1、分子残留病灶（molecular residual disease, mrd）又称微小残留病灶(minimal residual disease)， 其概念自血液肿瘤逐步延伸至实体瘤，检测对象主要包括循环肿瘤dna（circulating tumor dna, ctdna）或循环肿瘤细胞（circulating tumorcell, ctc）等。国内外多项临床研究表明，mrd状态与实体瘤患者的复发风险具有相关性，可用于实体瘤患者的预后评估和个体化治疗决策指导。

2、数字聚合酶链式反应（digital polymerase chain reaction, dpcr）作为一种高灵敏、高精准的检测技术，可满足实体瘤mrd检测对灵敏度和精准度的要求，但dpcr最大的局限性在于其多重检测能力有限，无法满足实体瘤mrd检测对多靶标同时检测的需求。

3、目前已有多种方式用于提升dpcr的多重检测能力，如基于荧光探针浓度或探针编码的多重pcr技术本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种数字熔解PCR多重检测试剂，其特征在于：所述多重为n重，所述试剂用于检测n种目标靶点，所述试剂含有n个探针小组，一个探针小组用于识别同一目标靶点，每个探针均连接有荧光基团与淬灭基团；

2.根据权利要求1所述的试剂，其特征在于：X≤7。

3.根据权利要求1所述的试剂，其特征在于：每个探针小组的各探针均可与其对应的野生型或突变型目标序列相结合，产生不同的Tm值。

4.根据权利要求1-3中任一所述的试剂，其特征在于：所述荧光基团为AMCA、PacificBlue、Atto 425、BODIPY FL、FAM、Oregon Green 488、TET、...

【技术特征摘要】

1.一种数字熔解pcr多重检测试剂，其特征在于：所述多重为n重，所述试剂用于检测n种目标靶点，所述试剂含有n个探针小组，一个探针小组用于识别同一目标靶点，每个探针均连接有荧光基团与淬灭基团；

2.根据权利要求1所述的试剂，其特征在于：x≤7。

3.根据权利要求1所述的试剂，其特征在于：每个探针小组的各探针均可与其对应的野生型或突变型目标序列相结合，产生不同的tm值。

4.根据权利要求1-3中任一所述的试剂，其特征在于：所述荧光基团为amca、pacificblue、atto 425、bodipy fl、fam、oregon green 488、tet、r6g、yakima yellow、vic、hex、joe、quasar 570、cy3、ned、tamra、rox、aquaphluor 593、texas red、at...

【专利技术属性】
技术研发人员：张威，周连群，郑修富，李金泽，杨弃，张芷齐，李传宇，姚佳，郭振，李树力，
申请(专利权)人：中国科学院苏州生物医学工程技术研究所，
类型：发明
国别省市：