一种马克思克鲁维酵母菌菌株培养基及其培养方法技术

本发明专利技术属于微生物培养技术领域，具体的说是一种马克思克鲁维酵母菌菌株培养基及其培养方法，所述马克思克鲁维酵母菌菌株培养基初始状态下呈块状固体、于24℃以上环境中缓慢膨胀；所述马克思克鲁维酵母菌菌株培养基由以下原料构成：丝瓜瓤15～20份、马铃薯淀粉5～8份、去离子水30～35份、蛋白胨1～1.5份、琼脂1～1.5份、明胶0.5～1.5份；本发明专利技术通过使培养基体积缓慢增大，进而使接种在表层的菌株随着时间的推移逐渐向膨胀的培养基内部进行渗透，进而有效的使培养基与空气的接触面积增大，同时代谢产物在重力的作用顺着丝瓜瓤纤维丝逐渐向底部滴落，进而使混杂在代谢产物中的菌株加速向培养基内部渗透，进而有效的加快菌株的培育速率。

【技术实现步骤摘要】
一种马克思克鲁维酵母菌菌株培养基及其培养方法
本专利技术属于微生物培养
，具体的说是一种马克思克鲁维酵母菌菌株培养基及其培养方法。
技术介绍
现有技术中马克思克鲁维酵母菌的培养多数采用固态培养基或液态培养基，在培养过程中固态培养基培养法使菌落于培养基表面进行生长、繁育，由于固态培养基表面积有限，在大量培养菌株的过程中固态培养基对培养箱中的空间利用度较低，进而使菌株遍布固态培养基表面后，其繁殖速率极大地减缓，进而使菌株培养速率较慢，而液态培养基在培养过程中由于马克思克鲁维酵母菌为兼性厌氧菌，可以在液体环境中进行生长、繁育，因此对空间的利用程度较高，但是由于马克思克鲁维酵母菌在代谢的过程中会产生二氧化碳以及酸性产物，进而导致液体培养基中PH值随着时间的推移逐渐降低，且无氧环境中马克思克鲁维酵母菌产物中的酒精对马克思克鲁维酵母菌本身存在毒害性，进而导致液体培养基中的液态环境对马克思克鲁维酵母菌的生长、繁育起到抑制作用。中国专利发布的一株用于奶啤生产的马克思克鲁维酵母菌菌株、其专用培养基及其应用，申请号：201711120989X，该方案提供的菌株、制备的液体菌种在0-4℃保存4天可含有活菌数超过1.0×1011个/mL，原料来源充足、价格便宜，配料方便，采用高密度液体发酵剂的制备方法，不仅减少培养体积，减少设备投资和生产时间，也节约了菌种购买成本，但是该方案中使用液体培养，在培养过程中代谢产物以及氧气环境均导致马克思克鲁维酵母菌不能可快速大量的繁殖，导致无法大规模快速的生成马克思克鲁维酵母菌菌株。鉴于此，本专利技术研制一种马克思克鲁维酵母菌菌株培养基及其培养方法，用于解决上述技术问题。
技术实现思路
为了弥补现有技术的不足，解决现有技术中由于马克思克鲁维酵母菌在代谢的过程中会产生二氧化碳以及酸性产物，进而导致液体培养基中PH值随着时间的推移逐渐降低，且无氧环境中马克思克鲁维酵母菌产物中的酒精对马克思克鲁维酵母菌本身存在毒害性，进而导致液体培养基中的液态环境对马克思克鲁维酵母菌的生长、繁育起到抑制作用的问题，本专利技术提出的一种马克思克鲁维酵母菌菌株培养基及其培养方法。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：本专利技术所述的一种马克思克鲁维酵母菌菌株培养基，所述马克思克鲁维酵母菌菌株培养基初始状态下呈块状固体、于24℃以上环境中缓慢膨胀；所述马克思克鲁维酵母菌菌株培养基由以下原料构成：丝瓜瓤15～20份、马铃薯淀粉5～8份、去离子水30～35份、蛋白胨1～1.5份、琼脂1～1.5份、明胶0.5～1.5份；所述马克思克鲁维酵母菌菌株培养基的制备方法包括以下步骤：S1：选取自然老化的丝瓜瓤，去除表层丝瓜皮后裁剪为2*1*0.8cm长方形的片体，将片体于45～50℃下持续烘干15～18min后通入紫外线灭菌器中，进行常规消毒、灭菌处理；S2：将琼脂置于加热至100～105℃的3/4去离子水中，保温加热5～8min，保温加热过程中伴随着持续搅拌，加热完成后将沸水通入过滤筛中，控制过滤筛网孔目数为160～200目，过滤得到凝固水；S3：将马铃薯淀粉和蛋白胨添加至凝固水中，持续搅拌5～10min后，待溶液温度自然冷却至55～60℃后，用于对S1中消毒处理后的丝瓜瓤片体浸泡10～12min，浸泡完成后将丝瓜瓤片体捞出，快速通风冷却至16～24℃，使用压板将冷却后的丝瓜瓤进行压制，将丝瓜瓤厚度压缩至0.35-0.45cm后备用；S4：将明胶溶于加热至80～90℃的1/4去离子水中，持续搅拌2～3min后将溶液冷却至30～32℃，将明胶溶液浇注在压缩状态的丝瓜瓤表面，并送入急冻箱中，使丝瓜瓤温度降低至15～20℃后制得压缩片；S5：将压缩片上下错位堆叠，并置于温度循环箱中，控制温度循环箱中温度于18～24℃匀速循环，控制循环间隔为5～6min，循环处理10～12min后取出即制得马克思克鲁维酵母菌菌株培养基；现有技术中马克思克鲁维酵母菌的培养多数采用固态培养基或液态培养基，在培养过程中固态培养基培养法使菌落于培养基表面进行生长、繁育，由于固态培养基表面积有限，在大量培养菌株的过程中固态培养基对培养箱中的空间利用度较低，进而使菌株遍布固态培养基表面后，其繁殖速率极大地减缓，进而使菌株培养速率较慢，而液态培养基在培养过程中由于马克思克鲁维酵母菌为兼性厌氧菌，可以在液体环境中进行生长、繁育，因此对空间的利用程度较高，但是由于马克思克鲁维酵母菌在代谢的过程中会产生二氧化碳以及酸性产物，进而导致液体培养基中PH值随着时间的推移逐渐降低，且无氧环境中马克思克鲁维酵母菌产物中的酒精对马克思克鲁维酵母菌本身存在毒害性，进而导致液体培养基中的液态环境对马克思克鲁维酵母菌的生长、繁育起到抑制作用；本专利技术工作时，通过使用马铃薯淀粉作为糖源、蛋白胨作为氮源，将其溶于水中形成培养液，并向培养液中溶解琼脂，当培养液冷却后琼脂的加入会使培养液转换为凝胶状态，由于丝瓜瓤本身网状纤维层结构本身具备优异的导通性，将去皮后的丝瓜瓤切割成标准大小的片状体后，将片状体浸泡于尚未冷却的培养液中，并随后捞取、快速冷却，即可使培养液均匀凝结在丝瓜瓤内部的纤维丝上，使丝瓜瓤整体转换为固态培养基，同时由于丝瓜瓤本身网状结构致使其形变能力较强，将丝瓜瓤进行压缩，并使用明胶制成的溶液浇注在丝瓜瓤片体四周，当明胶溶液降温至15～20℃后，明胶溶液凝固，进而将压缩的丝瓜瓤进行固定，使丝瓜瓤制成的固体培养基体积缩小，将多个丝瓜培养基错位重叠，并置于温度循环箱中，在温度循环的过程中丝瓜瓤表层的明胶融解、凝固，进而使多层丝瓜瓤固体培养基之间黏连，体积的缩小使制得的培养基便于保存于运输，同时在进行菌株培养的过程中，缓慢升温，可以使培养基体积缓慢增大，进而使接种在表层的菌株随着时间的推移逐渐向膨胀的培养基内部进行渗透，进而有效的使培养基与空气的接触面积增大，而马克思克鲁维酵母菌在有氧环境中繁育速率较快，可以有效的促进马克思克鲁维酵母菌的繁育，同时在马克思克鲁维酵母菌代谢的过程，代谢产物在重力的作用顺着丝瓜瓤纤维丝在重力的作用下逐渐向底部滴落，进而使混杂在代谢产物中的菌株加速向培养基内部渗透，进而有效的加快菌株的培育速率，同时由于培养基缓慢膨胀，进而使培养基内部形成负压，进而使培养基内部对外界空气形成抽取，在空气抽取的过程中气流的流动对菌株向培养基内部扩散起到协助作用，进而有效的配合生成物的流动效果加速菌株向培养基内部扩散的速率，同时丝瓜瓤本身可以被菌株进行分解，在后续的发酵过程中也可以作为发酵材料使用，使丝瓜瓤的利用程度较高。优选的，其中S1中丝瓜瓤在烘干前通入碱水中进行浸泡40～60min，浸泡完毕后送入-8～-5℃的冷库中进行冷冻处理，控制冷冻时间为10～15min；所述碱水为5～7％的氢氧化钠溶液；工作时，由于丝瓜瓤中纤维本身较为纤细，使培养液在向丝瓜瓤纤维上挂壁凝固的过程中较为困难，通过将丝瓜瓤在烘干之前浸泡于氢氧化钠溶液中，利用氢氧化钠溶液对纤维素的溶胀作用，有效的将丝瓜瓤内部的细小纤维进行去除，同时还使纤维丝中本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种马克思克鲁维酵母菌菌株培养基，其特征在于：所述马克思克鲁维酵母菌菌株培养基初始状态下呈块状固体、于24℃以上环境中缓慢膨胀；所述马克思克鲁维酵母菌菌株培养基由以下原料构成：/n丝瓜瓤15～20份、马铃薯淀粉5～8份、去离子水30～35份、蛋白胨1～1.5份、琼脂1～1.5份、明胶0.5～1.5份；/n所述马克思克鲁维酵母菌菌株培养基的制备方法包括以下步骤：/nS1：选取自然老化的丝瓜瓤，去除表层丝瓜皮后裁剪为2*1*0.8cm长方形的片体，将片体于45～50℃下持续烘干15～18min后通入紫外线灭菌器中，进行常规消毒、灭菌处理；/nS2：将琼脂置于加热至100～105℃的3/4去离子水中，保温加热5～8min，保温加热过程中伴随着持续搅拌，加热完成后将沸水通入过滤筛中，控制过滤筛网孔目数为160～200目，过滤得到凝固水；/nS3：将马铃薯淀粉和蛋白胨添加至凝固水中，持续搅拌5～10min后，待溶液温度自然冷却至55～60℃后，用于对S1中消毒处理后的丝瓜瓤片体浸泡10～12min，浸泡完成后将丝瓜瓤片体捞出，快速通风冷却至16～24℃，使用压板将冷却后的丝瓜瓤进行压制，将丝瓜瓤厚度压缩至0.35-0.45cm后备用；/nS4：将明胶溶于加热至80～90℃的1/4去离子水中，持续搅拌2～3min后将溶液冷却至30～32℃，将明胶溶液浇注在压缩状态的丝瓜瓤表面，并送入急冻箱中，使丝瓜瓤温度降低至15～20℃后制得压缩片；/nS5：将压缩片上下错位堆叠，并置于温度循环箱中，控制温度循环箱中温度于18～24℃匀速循环，控制循环间隔为5～6min，循环处理10～12min后取出即制得马克思克鲁维酵母菌菌株培养基。/n...

【技术特征摘要】
1.一种马克思克鲁维酵母菌菌株培养基，其特征在于：所述马克思克鲁维酵母菌菌株培养基初始状态下呈块状固体、于24℃以上环境中缓慢膨胀；所述马克思克鲁维酵母菌菌株培养基由以下原料构成：
丝瓜瓤15～20份、马铃薯淀粉5～8份、去离子水30～35份、蛋白胨1～1.5份、琼脂1～1.5份、明胶0.5～1.5份；
所述马克思克鲁维酵母菌菌株培养基的制备方法包括以下步骤：
S1：选取自然老化的丝瓜瓤，去除表层丝瓜皮后裁剪为2*1*0.8cm长方形的片体，将片体于45～50℃下持续烘干15～18min后通入紫外线灭菌器中，进行常规消毒、灭菌处理；
S2：将琼脂置于加热至100～105℃的3/4去离子水中，保温加热5～8min，保温加热过程中伴随着持续搅拌，加热完成后将沸水通入过滤筛中，控制过滤筛网孔目数为160～200目，过滤得到凝固水；
S3：将马铃薯淀粉和蛋白胨添加至凝固水中，持续搅拌5～10min后，待溶液温度自然冷却至55～60℃后，用于对S1中消毒处理后的丝瓜瓤片体浸泡10～12min，浸泡完成后将丝瓜瓤片体捞出，快速通风冷却至16～24℃，使用压板将冷却后的丝瓜瓤进行压制，将丝瓜瓤厚度压缩至0.35-0.45cm后备用；
S4：将明胶溶于加热至80～90℃的1/4去离子水中，持续搅拌2～3min后将溶液冷却至30～32℃，将明胶溶液浇注在压缩状态的丝瓜瓤表面，并送入急冻箱中，使丝瓜瓤温度降低至15～20℃后制得压缩片；
S5：将压缩片上下错位堆叠，并置于温度循环箱中，控制温度循环箱中温度于18～24℃匀速循环，控制循环间隔为5～6min，循环处理10～12min后取出即制得马克思克鲁维酵母菌菌株培养基。


2.根据权利要求1所述的一种马克思克鲁维酵母菌菌株培养基，其特征在于：其中S1中丝瓜瓤在烘干前通入碱水中进行浸泡40～60min，浸泡完毕后送入-8～-5℃的冷库中进行冷冻处理，控制冷冻时间为10～15min；所述碱水为5～7％的氢氧化钠溶液。


3.根据权利要求1所述的一种马克思克鲁维酵母菌菌株培养基，其特征在于：其中S3中以及S4中丝瓜瓤在快速冷却的过程中均伴随持续翻转，控制翻转速率为35～40r/min。

【专利技术属性】
技术研发人员：王雪克，李明洋，
申请(专利权)人：王雪克，
类型：发明
国别省市：江苏;32