一种崇左秋海棠组培繁殖方法技术

本发明专利技术适用于秋海棠属植物繁殖技术领域，公开了一种崇左秋海棠组培繁殖方法，包括以下步骤：外植体选取、初代培养、继代培养、生根培养和生根苗移植，其中，初代培养中的诱导培养基包括MS基本培养基、0.8‑1.5mg/L6‑BA、0.05‑0.1mg/L NAA、0.05‑0.1mg/L IBA、30g/L蔗糖、5.0‑6.0g/L琼脂，诱导培养基的pH为5.5‑5.8；继代培养的培养基包括MS基本培养基、0.2‑0.6mg/L 6‑BA、0.05‑0.1mg/L NAA、0.05‑0.1mg/L IBA、30g/L蔗糖、5.0‑6.0g/L琼脂，继代培养基的pH为5.5‑5.8；生根培养的培养基包括1/2MS基本培养基、0.5‑1.5mg/L IBA、30g/L蔗糖、5.0‑6.0g/L琼脂，生根培养基的pH为5.5‑5.8。本发明专利技术所提供的崇左秋海棠组培繁殖方法，采用叶柄作为外植体进行组织培养，其诱导率高，增殖系数大，从而实现对崇左秋海棠的快速增殖，为崇左秋海棠的保育和繁殖提供保障。

【技术实现步骤摘要】
一种崇左秋海棠组培繁殖方法
本专利技术属于秋海棠属植物繁殖
，尤其涉及一种崇左秋海棠组培繁殖方法。
技术介绍
崇左秋海棠(Begoniachongzuoensis)为秋海棠科(Begoniaceae)秋海棠属植物。目前为止，仅在广西西部一个喀斯特地貌石灰岩山体中发现有分布，在现有资料中，仍缺乏其详细的种群相关数据。秋海棠属植物叶斑丰富，崇左秋海棠叶片具有绿色金属光泽，不同深浅的绿色斑纹，具有较高的观赏价值。该物种为广西特有，由于自然分布狭窄以及特殊的分布特点，生境十分脆弱，亟需开展该种的保护和繁育工作。
技术实现思路
本专利技术旨在至少解决上述技术问题之一，提供了一种崇左秋海棠组培繁殖方法，采用叶柄作为外植体进行组织培养，其诱导率高，增殖系数大，从而实现对崇左秋海棠的快速增殖，为崇左秋海棠的保育和繁殖提供保障。本专利技术的技术方案是：一种崇左秋海棠组培繁殖方法，包括以下步骤：外植体选取：选取生长状况良好的叶柄，对叶柄进行冲洗、消毒处理、清洗和切段后，得到外植体；初代培养：将外植体接种于诱导培养基中，初代培养得到不定芽，所述诱导培养基包括MS基本培养基、0.8-1.5mg/L6-BA、0.05-0.1mg/LNAA、0.05-0.1mg/LIBA、30g/L蔗糖、5.0-6.0g/L琼脂，且所述诱导培养基的pH为5.5-5.8；继代培养：将不定芽接种于继代培养基中，增殖培养得到增殖芽，所述继代培养基包括MS基本培养基、0.2-0.6mg/L6-BA、0.05-0.1mg/LNAA、0.05-0.1mg/LIBA、30g/L蔗糖、5.0-6.0g/L琼脂，且所述继代培养基的pH为5.5-5.8；生根培养：将增殖芽接种于生根培养基中，生根培养得到生根苗，所述生根培养基包括1/2MS基本培养基、0.5-1.5mg/LIBA、30g/L蔗糖、5.0-6.0g/L琼脂，所述生根培养基的pH为5.5-5.8；生根苗移植：将生根苗进行炼苗、移栽，获得崇左秋海棠栽培幼苗。可选地，所述外植体选取的过程为：选取生长状况良好的叶柄，用清水冲洗15-25min，然后将叶柄于吐温-80水溶液冲洗，接着用次氯酸钠消毒5-7min，最后用无菌水清洗3-5次，切成0.6-1.0cm的小段后晾干。可选地，选取生长状况良好的叶柄，用清水冲洗20min，然后将叶柄于0.1％的吐温-80水溶液冲洗，接着用次氯酸钠消毒7min，最后用无菌水清洗5次，切成1.0cm的小段后晾干。可选地，所述初代培养的条件为：将外植体接种于诱导培养基中，置于黑暗条件下培养7-14天，然后置于光照强度为800-1200lx、光照时间为14-16小时/天、温度为24±2℃的条件下培养。可选地，将外植体接种于诱导培养基中，置于黑暗条件下培养10天，然后置于光照强度为900lx、光照时间为16小时/天、温度为24±2℃的条件下培养。可选地，所述继代培养和所述生根培养的条件为：光照强度为800-1200lx、光照时间为14-16小时/天、温度为24±2℃。可选地，在所述生根苗移植中，炼苗过程为：将生根苗移栽至装有水苔基质的密封容器中，于24±2℃下，培养7-14天；移栽过程为：将炼苗后的生根苗移植到置于阴棚内的栽培基质中，所述栽培基质包括腐殖土和珍珠岩，且腐殖土：珍珠岩的体积比例为3:1。本专利技术所提供的一种崇左秋海棠组培繁殖方法，选取叶柄为外植体进行组织培养，并在不同的培养阶段结合特定配比的培养基，经过诱导培养得到不定芽，其诱导率可达到100％，将不定芽继代培养得到增殖芽，增殖芽的增殖系数大，将增殖芽生根培养得到生根苗，生根率高。该方法具有增殖速度快，生产周期短的特点，在短期内能获取大量的生根苗。通过该方法可以有效的加速崇左秋海棠的繁殖，且不受季节气候变化、自然灾害的影响，能够良好的保持优良品系的特征特性，为崇左秋海棠的利用和保护提供切实可行的保护方法。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1是本专利技术实施例1中实验组d1和对照组d2的外植体分别在a1、a2、a3和a4四种诱导培养基中的生长情况；图2是本专利技术实施例3中生根苗在c4生根培养基中的生长情况。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。在具体实施方式中所描述的各个具体技术特征和各实施例，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，例如通过不同的具体技术特征/实施例的组合可以形成不同的实施方式，为了避免不必要的重复，本专利技术中各个具体技术特征/实施例的各种可能的组合方式不再另行说明。本专利技术实施例提供的一种崇左秋海棠组培繁殖方法，包括以下步骤：外植体选取：选取生长状况良好的叶柄，对叶柄进行冲洗、消毒处理、清洗和切段后，得到消毒灭菌后的外植体；初代培养：将外植体接种于诱导培养基中进行初代培养，经不定芽诱导后得到不定芽。诱导培养基包括MS基本培养基、0.8-1.5mg/L6-BA、0.05-0.1mg/LNAA、0.05-0.1mg/LIBA、30g/L蔗糖、5.0-6.0g/L琼脂，且诱导培养基的pH为5.5-5.8；继代培养：将不定芽接种于继代培养基中进行增殖培养，得到增殖芽，继代培养基包括MS基本培养基、0.2-0.6mg/L6-BA、0.05-0.1mg/LNAA、0.05-0.1mg/LIBA、30g/L蔗糖、5.0-6.0g/L琼脂，且继代培养基的pH为5.5-5.8；生根培养：将增殖芽接种于生根培养基中进行生根培养，得到生根苗，生根培养基包括1/2MS基本培养基、0.5-1.5mg/LIBA、30g/L蔗糖、5.0-6.0g/L琼脂，生根培养基的pH为5.5-5.8；生根苗移植：将生根苗进行炼苗、移栽，获得崇左秋海棠栽培幼苗。本专利技术的各培养基中，6-BA可发挥使细胞脱分化、促进细胞分裂的效果，NAA用于植物组织培养时能促进细胞分裂与扩大，IBA用于使细胞分裂和细胞增生。在不同培养阶段结合特定配比的培养基，在初代培养时结合特定配制的诱导培养基来促进诱导叶柄快速生长产生不定芽，在继代培养时结合特定的继代培养基来促进不定芽快速增殖得到增殖芽，提高增殖芽的增殖系数，在生根培养时结合特定的生根培养基来诱导增殖芽生根，确保生根苗的生根率，从而获取大量的崇左秋海棠幼苗，实现崇左秋海棠的快速繁殖；采用该方法不受季节气候变化、自然灾害的影响，能够良好的保持优良品系的特征特性，为崇左秋海棠的利用和保护提供切实可行的保护方法。可选地，外植体选取的过程可为：选取生长状况良好的叶柄，用清水冲洗本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种崇左秋海棠组培繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：/n外植体选取：选取生长状况良好的叶柄，对叶柄进行冲洗、消毒处理、清洗和切段后，得到外植体；/n初代培养：将外植体接种于诱导培养基中，初代培养得到不定芽，所述诱导培养基包括MS基本培养基、0.8-1.5mg/L 6-BA、0.05-0.1mg/L NAA、0.05-0.1mg/L IBA、30g/L蔗糖、5.0-6.0g/L琼脂，且所述诱导培养基的pH为5.5-5.8；/n继代培养：将不定芽接种于继代培养基中，增殖培养得到增殖芽，所述继代培养基包括MS基本培养基、0.2-0.6mg/L 6-BA、0.05-0.1mg/L NAA、0.05-0.1mg/L IBA、30g/L蔗糖、5.0-6.0g/L琼脂，且所述继代培养基的pH为5.5-5.8；/n生根培养：将增殖芽接种于生根培养基中，生根培养得到生根苗，所述生根培养基包括1/2MS基本培养基、0.5-1.5mg/L IBA、30g/L蔗糖、5.0-6.0g/L琼脂，所述生根培养基的pH为5.5-5.8；/n生根苗移植：将生根苗进行炼苗、移栽，获得崇左秋海棠栽培幼苗。/n

【技术特征摘要】
1.一种崇左秋海棠组培繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：
外植体选取：选取生长状况良好的叶柄，对叶柄进行冲洗、消毒处理、清洗和切段后，得到外植体；
初代培养：将外植体接种于诱导培养基中，初代培养得到不定芽，所述诱导培养基包括MS基本培养基、0.8-1.5mg/L6-BA、0.05-0.1mg/LNAA、0.05-0.1mg/LIBA、30g/L蔗糖、5.0-6.0g/L琼脂，且所述诱导培养基的pH为5.5-5.8；
继代培养：将不定芽接种于继代培养基中，增殖培养得到增殖芽，所述继代培养基包括MS基本培养基、0.2-0.6mg/L6-BA、0.05-0.1mg/LNAA、0.05-0.1mg/LIBA、30g/L蔗糖、5.0-6.0g/L琼脂，且所述继代培养基的pH为5.5-5.8；
生根培养：将增殖芽接种于生根培养基中，生根培养得到生根苗，所述生根培养基包括1/2MS基本培养基、0.5-1.5mg/LIBA、30g/L蔗糖、5.0-6.0g/L琼脂，所述生根培养基的pH为5.5-5.8；
生根苗移植：将生根苗进行炼苗、移栽，获得崇左秋海棠栽培幼苗。


2.如权利要求1所述的崇左秋海棠组培繁殖方法，其特征在于，所述外植体选取的过程为：选取生长状况良好的叶柄，用清水冲洗15-25min，然后将叶柄于吐温-80水溶液冲洗，接着用次氯酸钠消毒5-7min，最后用无菌水清洗3-5次，切成0.6-1.0c...

【专利技术属性】
技术研发人员：李凌飞，郎校安，李娜，杨蕾蕾，张苏州，
申请(专利权)人：深圳市仙湖植物园管理处深圳市园林研究中心，
类型：发明
国别省市：广东;44