一种具有抗氧化作用的不同年份白鲜皮的红外及其双指标辅助分析的鉴别方法技术

不同生长期的白鲜皮的红外FT‑IR及其二阶导数光谱SD‑IR特征峰的位置、强度和形状不同，在3420、2927、1739、1630、1414、1045、928和781 cm

【技术实现步骤摘要】
一种具有抗氧化作用的不同年份白鲜皮的红外及其双指标辅助分析的鉴别方法
本专利技术涉及植物药材鉴别领域，具体涉及一种具有抗氧化作用的不同年份白鲜皮的红外及其双指标辅助分析的鉴别方法。
技术介绍
白鲜系芸香科白鲜属植物白鲜（DictamnusdasycarpusTurcz）的干燥根皮，始载于《神农本草经》，列为中品，别名有羊癣草、八股牛、臭根皮等，为我国临床常用中药。《中国药典》收载记录其功能主治有清热燥湿、祛风解毒，用于湿热疮毒、黄水淋漓、湿疹、风疹、疥癣疮癞、风湿热痹、黄疸尿赤。现代研究表明白鲜皮的药理作用有抗氧化、抗菌、止血等作用，临床上主要用于治疗慢性支气管炎、皮肤脱皮症、风湿性关节炎、外出血、荨麻疹、湿疹等。目前，从白鲜皮中分离得到的化学成分包括生物碱类、柠檬苦素类、倍半萜及其倍半萜昔类、香豆素类、黄酮类、挥发油类、甾体类及多糖类化合物等。中药的成分和含量是区分中药质量等级的依据。现有的天然产物鉴定方法有特征鉴定、显微鉴定、薄层色谱和高效液相色谱等。但由于样品前处理的需要，这些方法存在着冗长、分析周期长、检测效率低、样品用量大等缺陷，限制了其推广和应用。因此，该行业缺乏针对不同增长年份的无损识别和快速评价方法。近年来，傅里叶变换红外光谱法(FT-IR)被广泛应用于中草药的快速鉴定。FT-IR可以保留样品成分，充分反映样品内部分子结构信息，具有样品用量低、使用方便等优点。双指标分析是一种新的指纹图谱算法，可以揭示中药不同样品之间的关系，并能准确地揭示样品与其他样品之间的距离。由于对检测样品没有严格的要求，双指标分析迅速得到了中药研究者的应用和关注。由于氧化应激在各种生活方式介导的疾病的病因学中起着重要的作用，寻找合适的天然抗氧化剂已成为一个重要的研究领域。白鲜皮在不同生长年份抗氧化能力的差异与主要活性物质的变化有关，反映了药材质量的差异。本研究采用傅里叶红外光谱（FT-IR）、二阶导数红外光谱(SD-IR)和双指标序列分析方法分析了白鲜皮在不同生长年份的光谱差异，并制备了白鲜皮的甲醇提取物来测定其抗氧化活性。本研究为农民种植白鲜皮提供了理论指导，对其他药材的种植和质量评价具有一定的指导意义。
技术实现思路
本专利采用傅里叶变换红外光谱、二阶导数红外光谱、双指标序列分析和抗氧化活性评价等分析方法，分析了白鲜皮在不同生长年份的差异。一种如权利要求1所述，采用傅里叶变换红外光谱、二阶导数红外光谱，抗氧化活性等方法分析白鲜皮在不同生长年份的差异，其特征在于按如下步骤进行：1.红外及其二阶导数分别取二、三、四、七年生白鲜皮粉碎、研细、过60目筛、60℃烘干至恒重。精密称定样品粉末1mg，KBr粉末100mg，在玛瑙研钵中研磨，制备样品。（1）每个样品光谱为4000-400cm-1范围内16次扫描的平均值，光谱分辨率为4cm-1。每个样品都进行了16次扫描，利用13点的平滑因子平滑。红外光谱比较表明，不同生长年份的白鲜皮具有明显的指纹特征，进行光谱解析。1319cm-1附近的峰属于黄柏酮和梣酮的C-O伸缩振动；在1620cm-1处，7年生的峰值明显比2年生、3年生和4年生的峰值强。（2）白鲜皮不同年份的光谱相似，利用OMNIC8.0的Savitsky-Golay导数得到谱的二阶导数，通过红外二阶导数光谱可以观察到形状和强度上的一些差异，进行光谱解析。根据白鲜皮吸收峰之间的比较,显示的高峰在1619、1370、1080、763、641和575cm-1(对应于白鲜碱),1739、1020、989和806cm-1(黄柏酮,属于柠檬苦素类似物)和1739、1670、1204、1160、953、607cm-1(梣酮)。在1300-1000cm-1范围内，1080cm-1处的峰主要是由于C-O的伸缩振动，表现出多糖和糖苷的特征吸收，但二阶导数光谱光谱在1080cm-1处表现出差异。3年生、4年生和7年生在1080cm-1处有峰值，在2年生处几乎消失，7年生处的峰值强度小于3年生、4年生。双指标序列分析通过不同年份白鲜皮的红外指纹图谱的波数和共峰比较，白鲜皮样品的共同峰率在55.56%~87.50%之间，总体相似度较高。共峰率最高为3年生:4年生为87.50%，变异峰比较低(7.14%)。将2年生:7年生,3年生:7年生,4年生:7年生与其他组进行综合分析，发现共峰率较低，变异峰率较高，说明7年生的组成与其他样本相比发生了显著变化。7年生中黄柏酮的含量略有下降，白鲜碱的含量有所提高。抗氧化（1）取不同浓度的白鲜皮甲醇提取液以及VC水溶液进行清除DPPH自由基的抗氧化实验，结果显示随着甲醇提取物浓度的增加，DPPH∙清除活性增强，活性呈剂量依赖性，范围为1.6~14.4ug/mL。VC、2年生、3年生、4年生、7年生的半抑制浓度（IC50）分别为1.287、9.758、8.990、7.428、3.786μg/mL。（2）取不同浓度的白鲜皮甲醇提取液以及VC水溶液进行清除ABTS自由基的抗氧化实验，结果显示随着浓度的增加，白鲜皮甲醇提取液的清除活性明显增强，在0.16-5.6mol/mL范围内以浓度依赖的方式增加。VC、2年生、3年生、4年生、7年生的IC50值分别为0.417、1.029、0.791、0.775、0.300μg/mL。结果证明：白鲜皮甲醇提取液具有抗氧化活性，且清除活性随着年份增长而增强。图1是白鲜碱；图2是黄柏酮；图3是梣酮；图4是不同年份白鲜皮红外光谱（A：7年生；B：4年生；C：3年生；D：2年生）；图5是不同年份的红外二阶导数图谱（A：7年生；B：4年生；C：3年生；D：2年生）；图6不同年限白鲜皮对DPPH自由基的清除作用(TWDT：7年生；THDT：4年生；FODT：3年生；SEDT：2年生)；图7不同年限白鲜皮对ABTS自由基的清除作用(TWDT：7年生；THDT：4年生；FODT：3年生；SEDT：2年生)。具体实施方式以下结合图表和具体实施操作对本专利技术作具体的介绍。实施方案一红外及其二阶导数光谱的研究1.不同年份白鲜皮的红外光谱分别取二、三、四、七年生白鲜皮粉碎，研细，过60目筛，60℃烘干至恒重。精密称定样品粉末1mg，KBr粉末100mg，在玛瑙研钵中研磨，混匀，经压片机压制成厚度合适均匀的薄片。红外光谱分辨率4cm-1扫描范围4000～400cm-1,每次扫描次数16次，将各次测得的光谱曲线加和取平均得到数据曲线为样品图谱。计算二阶导数红外光谱时，平滑点数13点,基线校正和纵坐标标准化处理。然后利用OMNIC8.0的Savitsky-Golay导数得到谱的二阶导数。用FT-IR测定2年生、3年生、4年生和7年生的白鲜皮（图4）。红外光谱比较表明，不同生长年份的白鲜皮具有明显的指纹特征。结合上图1-3，对白鲜皮的红外光谱进行分析。3340cm-1附近的峰值是由于-OH的伸缩振动引起的，而2927cm-1附近本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.本专利技术是一种具有抗氧化作用的不同年份白鲜皮的红外及其双指标辅助分析的鉴别方法，并通过双指标序列辅助分析不同年份之间的化学成分之间的差异，以及与抗氧化作用之间的相关性，结果随着生长年限的增加，白鲜皮的组分种类变化不大、但含量变化较大，抗氧化活性随着年限的延长而增加。/n

【技术特征摘要】
1.本发明是一种具有抗氧化作用的不同年份白鲜皮的红外及其双指标辅助分析的鉴别方法，并通过双指标序列辅助分析不同年份之间的化学成分之间的差异，以及与抗氧化作用之间的相关性，结果随着生长年限的增加，白鲜皮的组分种类变化不大、但含量变化较大，抗氧化活性随着年限的延长而增加。


2.如权利要求1所述的应用，其特征在于用FT-IR和SD-IR测定2年生、3年生、4年生和7年生白鲜皮，结果不同生长年份的白鲜皮特征峰的位置、强度和形状不同，虽然2年生、3年生、4年生和7年生白鲜皮的光谱非常相似，但在通过红外二阶导数光谱可以观察到形状和强度上的一些差异，在3420、2927、1739、1630、1414、1045、928和781cm-1处出现特征峰，主要化学成分为多糖、白鲜碱、黄柏酮和梣酮。


3.如权利要求1所述的应用，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：周鸿立，曹冬雪，刘忆颖，林欣悦，孙睿，郝情情，王亚婷，张艺潼，陈堉佳，
申请(专利权)人：吉林化工学院，
类型：发明
国别省市：吉林;22