【技术实现步骤摘要】
低产乙醛啤酒工业酵母的高通量筛选方法
本专利技术属于发酵工程和微生物育种
，尤其涉及一种低产乙醛啤酒工业酵母的高通量筛选方法。
技术介绍
啤酒是世界三大古酒之一，起源于九千多年前的中东和古埃及地区，于二十世纪初传入中国。目前，中国已成为全球啤酒产销大国。伴随着我国啤酒行业的发展日趋成熟、啤酒市场逐步扩张，风味及稳定性一直是啤酒行业的研究热点。乙醛(CH3CHO)是啤酒中的一种高挥发性、高反应活性、低分子量的羰基化合物，直接影响了啤酒的风味和风味稳定性。常温常压下，沸点为21℃，易于与水混合，存在可逆平衡。此外，乙醛可以与大量亲核物质发生反应，易与啤酒中其他醛、酮和酯类化合物发生缩合反应。适量的乙醛会赋予啤酒独特的品质特征，若含量过高，易产生不愉快的青草、烂苹果等味道；若贮藏时间过长，甚至出现老化风味。影响成品啤酒中乙醛含量高低的因素包括原辅料、啤酒工业酵母、酿造工艺、储存及物流条件等。长期工业实践中，学者们相继提出了啤酒中乙醛含量的控制措施。然而，控制生产工艺不具有普遍适用性，构建酵母工程菌不符合食品安...
【技术保护点】
1.低产乙醛啤酒工业酵母的高通量筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：/n对啤酒工业酵母进行
【技术特征摘要】
1.低产乙醛啤酒工业酵母的高通量筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：
对啤酒工业酵母进行60Coγ诱变处理，构建突变菌株库；
利用高浓度乙醛平板及乙醇-双硫仑平板对突变菌株进行平板筛选，并利用对应上述各平板的液体驯化培养基对其进行长期驯化，将驯养菌液分别涂布于上述平板，获得初筛菌株；
利用低乙醛合成能力及强乙醛代谢能力对初筛菌株进行高通量复筛，得到复筛菌株，即低产乙醛啤酒工业酵母。
2.根据权利要求1所述的高通量筛选方法，其特征在于，获得初筛菌株具体包括以下步骤：
1)对突变菌株库中的啤酒工业酵母菌株进行划线培养，挑取单菌落于YPD培养基中生长，离心菌体，洗涤重悬，得到细胞悬浮液；
2)对细胞悬浮液进行60Coγ照射，将照射后的菌液立即涂布于高浓度乙醛平板和乙醇-双硫仑平板上，恒温培养；
3)挑取上述平板上的生长优势菌株分别于对应上述平板的驯化培养基中进行连续驯化，驯化过程中逐步提高各平板中乙醛及双硫仑的筛选浓度；
4)分别吸取适量驯化菌液涂布于上述平板，得到初筛菌株。
3.根据权利要求2所述的高通量筛选方法，其特征在于，所述步骤1)中，菌落的生长温度为25-35℃，培养时间为6-20h；
菌体离心后洗涤重悬于含有1-20％甘油的无菌生理盐水中，并将浓度稀释至1×104-1×108个/mL。
4.根据权利要求2所述的高通量筛选方法，其特征在于，所述步骤2)中，选取0-2.0kGy的辐照剂量，吸取5-200μL辐照菌液涂布于筛选平板；
所述高浓度乙醛平板为含有0.1-10g/L乙醛的YPD培养基...
【专利技术属性】
技术研发人员：董建军，赵鑫锐，尹花，李江华，陈坚，堵国成，孙可澄，陈璐，
申请(专利权)人：青岛啤酒股份有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37
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