【技术实现步骤摘要】
一株不产桔霉素的重组红曲菌及其构建方法(一)
本专利技术涉及一株不产桔霉素且不含外源筛选基因的重组红曲菌及其构建方法。(二)
技术介绍
红曲菌是我国重要的食用和药用微生物，可以产生多种天然产物，包括红曲色素、MonacolinK和γ-氨基丁酸等，其代谢产物被广泛应用于医药、食品等行业。但是大部分具有工业价值的红曲菌的发酵产品都可能含有一种对人体具有肝、肾毒性的真菌毒素—桔霉素，从而影响红曲产品的销售。为了消除红曲菌制品中潜在的桔霉素，通过理化诱变筛选得到性状优良的红曲菌是一种方法；但是筛选的工作量大且工业价值不确定。也有研究者利用基因工程手段对红曲菌菌种进行定向改造，将桔霉素合成基因(pksCT)替换成真菌筛选标记基因，例如潮霉素抗性基因(hph)；改造后的红曲菌发酵液中桔霉素的含量明显下降，但是外源导入的基因仍保留在改造后的红曲菌基因组上。外源基因片段大都来源于亲缘关系较远的原核生物，使得重组红曲菌的安全性受到质疑。外源基因清除技术可以实现筛选基因的清除，目前主要用于解决转基因植物的环境安全性和食品安全性问...
【技术保护点】
1.一株不产桔霉素的重组红曲菌——紫色红曲菌浙工红曲3号(Monascus purpureus浙工红曲3号)，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国武汉武汉大学，分类名称为：Monascus purpureus，保藏编号为CCTCC NO：M 2020728，保藏日期为2020年11月12日。/n
【技术特征摘要】
1.一株不产桔霉素的重组红曲菌——紫色红曲菌浙工红曲3号(Monascuspurpureus浙工红曲3号)，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国武汉武汉大学，分类名称为：Monascuspurpureus，保藏编号为CCTCCNO：M2020728，保藏日期为2020年11月12日。
2.一种构建权利要求1所述不产桔霉素的重组红曲菌的方法，所述方法包括：
(1)以红曲菌A基因组为模板，分别设计引物进行PCR反应，扩增出pksCT基因的UTL核酸片段和UTR核酸片段：
(2)以根瘤农杆菌载体pPZP201为母核，与核酸替代片段WH连接得到pWH2双元载体，然后用XbaⅠ限制性内切酶酶切得到线性化pWH2载体；使用C112重组酶对线性化pWH2载体和UTL进行重组得到pWH2::UTL；SpeⅠ限制性内切酶酶切pWH2::UTL，使用C1...
【专利技术属性】
技术研发人员：嘉晓勤，赵天佑，何猛，陈小龙，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。