一种CRE菌株及其产酶类型的快速鉴别方法技术

本发明专利技术涉及一种CRE菌株及其产酶类型的快速鉴别方法，所述方法包括先在平皿培养基上接种浓度为2.5～3.0McF的肠杆菌目细菌的菌悬液，然后将药敏纸片贴到接种后的平皿培养基表面，温育，完毕后量取药敏纸片的抑菌圈直径。本发明专利技术的有益效果为：本发明专利技术鉴别方法在仅仅6小时内即可区分肠杆菌目细菌是否为CRE，CRE是否产酶以及所产酶型，并且具有准确性高、价格低廉、操作简单的特点，较现有技术需要24h以上才能完成鉴别的方法相比，本发明专利技术鉴别方法大大缩短了CRE菌株及其产酶类型的鉴别时间，为辅助临床尽快选择合适的抗生素，从而缩短治疗时间，改善预后提供了技术支持，非常适合临床微生物实验室推广应用。

【技术实现步骤摘要】
一种CRE菌株及其产酶类型的快速鉴别方法
本专利技术属于碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌鉴别
，具体涉及一种CRE菌株及其产酶类型的快速鉴别方法。
技术介绍
碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(CRE)常引起住院病人难以治疗的感染，被世界卫生组织(WHO)视为重要病原菌。同样，根据美国疾病预防控制中心(CDC)在2019年发布的一份关于美国抗生素耐药性威胁的报告，CRE也被认为是一个紧急威胁。CRE对碳青霉烯类抗生素耐药的主要机制为获得并表达可以水解碳青霉烯类抗生素的碳青霉烯酶，如KPC、NDM和OXA。CRE侵袭性感染具有非常高的死亡率，主要是由于有效治疗的延迟。大量研究表明，早期正确使用抗生素对CRE感染的治疗起着至关重要的作用。近期有针对不同碳青霉烯酶类型的新抗生素上市，因此，快速、准确地鉴定CRE所产碳青霉烯酶类型对感染患者的治疗具有重要意义，可以帮助临床医生尽快选择合适的抗生素，从而缩短治疗时间，改善预后；此外，快速检测碳青霉烯酶还可尽快为院内感染控制提供依据。目前针对产碳青霉烯酶的检测主要有四种。一是以碳青霉烯酶水解本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种CRE菌株及其产酶类型的快速鉴别方法，其特征在于，包括如下步骤：/n(1)在平皿培养基上接种浓度为2.5～3.0McF的肠杆菌目细菌的菌悬液，得到接种后的平皿培养基，备用；/n(2)将药敏纸片贴到接种后的平皿培养基表面，温育，完毕后量取药敏纸片的抑菌圈直径。/n

【技术特征摘要】
1.一种CRE菌株及其产酶类型的快速鉴别方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)在平皿培养基上接种浓度为2.5～3.0McF的肠杆菌目细菌的菌悬液，得到接种后的平皿培养基，备用；
(2)将药敏纸片贴到接种后的平皿培养基表面，温育，完毕后量取药敏纸片的抑菌圈直径。


2.权利要求1所述的CRE菌株的快速鉴别方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将待测肠杆菌目细菌于0.45％无菌盐水中制成浓度为2.5～3.0McF的菌悬液，然后将所述菌悬液均匀涂布在MH琼脂平板上，室温放置至完全吸收，得到接种后的MH琼脂平板，备用；
(2)将碳青霉烯类抗生素药敏纸片贴到接种后的MH琼脂平板表面，温育，完毕后量取药敏纸片的抑菌圈直径；
(3)CRE菌株鉴别：CRE菌株：抑菌圈直径≤18mm；非CRE菌株：抑菌圈直径≥19mm。


3.权利要求1所述的CRE菌株产酶类型的快速鉴别方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将待测肠杆菌目细菌于0.45％无菌盐水中制成浓度为2.5～3.0McF的菌悬液，然后将所述菌悬液均匀涂布在MH琼脂平板上，室温放置至完全吸收，得到接种后的MH琼脂平板，备用；
(2)将碳青霉烯类抗生素药敏纸片、KPC酶抑制剂联合碳青霉烯类抗生素药敏纸片、MBL酶抑制剂联合碳青霉烯类抗生素药敏纸片、KPC酶抑制剂和MBL酶抑制剂联合碳青霉烯类抗生素药敏纸片贴到接种后的MH琼脂平板表面，温育，完毕后量取各药敏纸片的抑菌圈直径；
(4)CRE菌株产酶类型鉴别：
产KPC酶：KPC酶抑制剂联合碳青霉烯类抗生素药敏纸片的抑菌圈直径-碳青霉烯类抗生素药敏纸片的抑菌圈直径≥5mm；
产MBL酶：MBL酶抑制剂联合碳青霉烯类抗生素药敏纸片的抑菌圈直径-碳青霉烯类抗生素药...

【专利技术属性】
技术研发人员：隗明，王鹏，
申请(专利权)人：首都医科大学附属北京朝阳医院，
类型：发明
国别省市：北京;11