一种异舒泛蓝注射液杂质、及其制备和检测方法技术

本发明专利技术提供一种异舒泛蓝注射液杂质、及其制备方法和检测方法，属于制药技术领域。式I所示的杂质，其结构式如下所示。本发明专利技术对异舒泛蓝注射液进行高温破坏和碱破坏时，制备式I所示的杂质。本发明专利技术可以分离制备式I所示的杂质，为异舒泛蓝注射液的杂质检测提供了新的对照品，更有利于异舒泛蓝注射液中有关物质检测方法的开发，从而控制产品质量。从而控制产品质量。从而控制产品质量。从而控制产品质量。

【技术实现步骤摘要】
一种异舒泛蓝注射液杂质、及其制备和检测方法


[0001]本专利技术属于制药
，具体涉及一种异舒泛蓝注射液杂质、及其制备方法和检测方法。

技术介绍

[0002]异舒泛蓝注射液商品名为LYMPHAZURIN，于1981年由Hirsch Industries开发，1981年07月29日经FDA批准在美国上市。异舒泛蓝注射液属于淋巴管显影剂，在美国已经使用了近40年，安全有效。它是一种辅助淋巴造影剂：原发性和继发性的四肢淋巴水肿；乳糜尿、乳糜腹水或乳糜胸；原发性或继发性肿瘤的淋巴结侵犯；和对治疗方式的淋巴结响应。目前国内无异舒泛蓝注射液原研产品上市，也无同类产品上市。
[0003]2020年05月14日，国家药品监督管理局发布了《关于开展化学药品注射剂仿制药质量和疗效一致性评价工作的公告》(2020年第62号)，要求注射剂仿制药品与原研药品质量和疗效的一致性，其中比较重要的一个方面就是杂质谱的一致性研究。
[0004]异舒泛蓝注射液在稳定性期间会逐渐降解产生杂质，如果不对其中的杂质进行结构确定，将会给异舒泛蓝注射液的质量控制带来较大的风险；只有通过确定杂质化学结构，了解杂质产生机理，进而对该步反应操作进行有效的控制，才能确保异舒泛蓝注射液符合质量要求。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是在现有技术的基础上，提供一种异舒泛蓝注射液杂质。
[0006]本专利技术的另一目的是提供上述异舒泛蓝注射液杂质的制备方法。
[0007]本专利技术的第三个目的是提供异舒泛蓝注射液中上述杂质的检测方法。
[0008]本专利技术的第四个目的是该杂质在检测异舒泛蓝注射液的质量方面的应用。
[0009]本专利技术的技术方案如下：
[0010]式I所示的杂质，其结构式如下所示：
[0011][0012]本专利技术还提供式I所示的杂质的制备方法，其包括以下步骤：
[0013][0014]异舒泛蓝注射液在稳定性期间会逐渐降解产生杂质，且随着稳定性放样时间的延长，杂质降解量不断增加。本专利技术的专利技术人在异舒泛蓝注射液中发现式I所示的杂质，且随着稳定性放置时间的延长，该杂质含量会超过鉴定阈值0.2％，目前没有文献报道异舒泛蓝注射液中含有该未知杂质。参照ICH指导原则，有必要了解该未知杂质的产生机理，并进一步制备分离，通过LC
‑
MS、NMR等表征手段对该杂质进行结构确定，从而有效控制异舒泛蓝注射液的产品质量。
[0015]基于对异舒泛蓝的结构分析，本专利技术的专利技术人分别采用高温、酸、碱、氧化等破坏条件，对异舒泛蓝注射液和异舒泛蓝原料药的水溶液进行破坏研究，考察该未知杂质的降解途径。专利技术人在高温和碱破坏样品中均检测到了该未知杂质，且在碱破坏条件下，该杂质降解明显。因此，该未知杂质的降解途径主要为高温破坏和碱破坏。
[0016]本专利技术将异舒泛蓝注射液和异舒泛蓝原料药的水溶液进行高温破坏时，此处的高温一般指50℃～100℃。
[0017]在一种优选方案中，本专利技术的专利技术人将异舒泛蓝注射液进行高温破坏时，它包括如下步骤：异舒泛蓝注射液在50～70℃的条件下进行化学反应，制备式I所示的杂质。
[0018]在一种更优选方案中，异舒泛蓝注射液进行高温破坏时，反应温度为60℃，反应时间为36～60小时，优选为48小时。
[0019]在一种方案中，本专利技术将异舒泛蓝注射液进行碱破坏时，它包括如下步骤：将异舒泛蓝注射液与碱溶液在10℃～65℃的条件下进行化学反应，制备式I所示的杂质。
[0020]对于本专利技术而言，异舒泛蓝注射液进行碱破坏时，所采用的碱为无机碱，可以但不局限于氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸氢钠或氨水中的一种，例如，可以选择氢氧化钠。
[0021]在一种优选方案中，异舒泛蓝注射液进行碱破坏时，碱溶液的浓度为1～3mol/L，优选为1～2mol/L，更优选为2mol/L。
[0022]本专利技术提及的异舒泛蓝注射液中异舒泛蓝的浓度为6～10mg/mL，优选为10mg/mL。
[0023]在一种优选方案中，异舒泛蓝注射液进行碱破坏时，异舒泛蓝注射液与碱溶液的体积比为1:1～3；优选为1:1～2；例如，1:2。
[0024]在一种优选方案中，异舒泛蓝注射液进行碱破坏时，反应温度为30℃～50℃，例如，可以但不局限于30℃、35℃、40℃、45℃或50℃。
[0025]进一步地，反应时间为1～3小时，优选为2小时。
[0026]对于异舒泛蓝注射液进行碱破坏时制备的式I所示的杂质，专利技术人尝试采用高效液相色谱分离该杂质，其高效液相色谱条件包括：色谱柱为Welch Ultimate AQ，采用流动
相A1和流动相B1为混合流动相进行梯度洗脱，所述流动相A1为乙酸铵溶液，所述流动相B1为乙腈；所述梯度洗脱包括以下步骤：(1)在0
‑
2分钟内，流动相A1和流动相B1的体积比保持90:10不变；(2)在2
‑
12分钟内，流动相A1和流动相B1的体积比由90:10匀速渐变至50:50；(2)在12
‑
12.2分钟内，流动相A1和流动相B1的体积比由50:50匀速渐变至5:95；(4)在12.2
‑
15分钟内，流动相A1和流动相B1的体积比保持5:95不变；(5)在15
‑
15.2分钟内，流动相A1和流动相B1的体积比由5:95匀速渐变至90:10；(6)在15.2
‑
17分钟内，流动相A1和流动相B1的体积比保持90:10不变。详细的洗脱程序如下表1所示。
[0027]表1梯度洗脱程序
[0028][0029][0030]在一种优选方案中，采用高效液相色谱进行分离该杂质时，具体采用的色谱柱为Welch Ultimate AQ 30mm
×
250mm，5μm，孔径为100A。
[0031]在一种优选方案中，流动相A1为15～25mmol/L乙酸铵溶液，以乙酸调节pH＝4。在一种更优选方案中，流动相A1为20mmol/L乙酸铵溶液，以乙酸调节pH＝4。
[0032]进一步地，检测波长为350～370nm，优选为360nm。
[0033]进一步地，流速为30～40mL/min，优选为35mL/min
[0034]更进一步地，柱温为20～40℃，优选为30℃。
[0035]收集目标峰制备液，用干冰和乙醇预冻，然后避光冻干，得到式I所示的目标杂质固体。
[0036]在提供杂质分离制备方法的基础上，本专利技术还提供了一种异舒泛蓝注射液中式I所示的杂质的检测方法，该检测方法采用高效液相色谱法进行检测，对该杂质进行定性或定量检测，其高效液相色谱条件包括：以十八烷基硅烷键合硅胶柱为色谱柱，采用流动相A2和流动相B2为混合流动相进行梯度洗脱，所述流动相A2为醋酸铵溶液，所述流动相B2为乙腈和氨水混合溶液；所述梯度洗脱包括以下步骤：(1)在0
‑
5分钟内，流动相本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.式I所示的杂质，其结构式如下所示：2.权利要求1所述的杂质的制备方法，其特征在于，3.根据权利要求2所述的杂质的制备方法，其特征在于，它包括如下步骤：将异舒泛蓝注射液在50℃～75℃的条件下进行化学反应，制备式I所示的杂质；优选地，反应温度为60℃；反应时间为36～60小时，优选为48小时。4.根据权利要求2所述的杂质的制备方法，其特征在于，将异舒泛蓝注射液与碱溶液在10℃～65℃的条件下进行化学反应，制备式I所示的杂质。5.根据权利要求4所述的杂质的制备方法，其特征在于，所述碱为无机碱，优选为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸氢钠或氨水，更优选为氢氧化钠；所述碱溶液的浓度为1～3mol/L，优选为1～2mol/L，更优选为2mol/L。6.根据权利要求4所述的杂质的制备方法，其特征在于，所述异舒泛蓝注射液中异舒泛蓝的浓度为6～10mg/mL，优选为10mg/mL；反应温度为30℃～50℃；反应时间为1～3小时；所述异舒泛蓝注射液与碱溶液的体积比为1:1～3；优选为1:1～2；更优选为1:2。7.根据权利要求4所述的杂质的制备方法，其特征在于，该杂质采用高效液相色谱进行分离，其高效液相色谱条件包括：色谱柱为Welch Ultimate AQ，采用流动相A1和流动相B1为混合流动相进行梯度洗脱，所述流动相A1为乙酸铵溶液，所述流动相B1为乙腈；所述梯度洗脱包括以下步骤：(1)在0
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2分钟内，流动相A1和流动相B1的体积比保持90:10不变；(2)在2
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12分钟内，流动相A1和流动相B1的体积比由90:10匀速渐变至50:50；(2)在12
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12.2分钟内，流动相A1和流动相B1的体积比由50:50匀速渐变至5:95；(4)在12.2
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15分钟内，流动相A1和流动相B1的体积比保持5:95不变；(5)在15
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15.2分钟内，流动相A1和流动相B1的体积比由5:95匀速渐变至90:10；(6)在15.2
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17分钟内，流动相A1...

【专利技术属性】
技术研发人员：唐咏群，黄锡伟，黄秀梅，胡铮，田欣欣，
申请(专利权)人：南京健友生化制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：