一种当归六黄汤组合物的指纹图谱构建方法和检测方法技术

本发明专利技术公开了一种当归六黄汤组合物的指纹图谱构建方法和检测方法，该构建方法包括以下步骤：(1)取5

【技术实现步骤摘要】
一种当归六黄汤组合物的指纹图谱构建方法和检测方法


[0001]本专利技术涉及中成药质量检测
，尤其涉及一种当归六黄汤组合物的指纹图谱构建方法和检测方法。

技术介绍

[0002]当归六黄汤出自金元四大家李东垣编纂的《兰室秘藏》，被后世誉为“治盗汗之圣方也”,该方组成为：当归、生地黄、熟地黄、黄连、黄芩、黄柏、黄芪共七味药，其中当归、生地和熟地共为君药，当归味甘辛温，具有养血作用，生地味甘苦凉，熟地味甘微温，具有滋阴之效；黄芩味苦寒，清上焦火，黄连味苦寒清中焦火，黄柏味苦寒泻下焦火，是为臣药；黄芪为佐药，可益气固表。主治阴虚火旺所致的盗汗证，证见发热盗汗，面赤口干，心烦唇燥，大便干结，小便黄赤，舌红苔黄。该方属于2018年国家中医药管理局会同国家药品监督管理局制订《古代经典名方目录(第一批)》中的100首经典名方之一。经典名方是以古代医籍记载的制备方法为依据采用现代工业化生产的中药复方制剂，除成型工艺外，其余制备方法应当与古代医籍记载基本一致。经典名方临床疗效确切，运用现代分析技术对其质量进行控制，不仅保障了复方制剂的质量稳定，也能更好的促进经典名方的临床应用。
[0003]中药指纹图谱是控制中药材和中药复方制剂的重要质量分析手段，在中药质量标准控制被广泛应用。目前关于当归六黄汤的指纹图谱研究并不多，关于该方的成分分析以及质量控制方面也尚无报道。因此，该方具有较大的开发价值。为了更全面、更有效地控制当归六黄汤临床用药的质量，使其安全性和疗效更加有所保障，需要对本中药组合物采用更为先进的质量检测手段。
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技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提出一种当归六黄汤组合物的指纹图谱构建方法和检测方法，能够有效的控制当归六黄汤制剂产品质量。
[0005]为达此目的，本专利技术采用以下技术方案：
[0006]一种当归六黄汤组合物的指纹图谱构建方法，包括以下步骤：
[0007](1)取5
‑
羟甲基糠醛、绿原酸、盐酸黄柏碱、阿魏酸、黄芩苷和盐酸小檗碱为对照品，分别制成各参照物溶液；
[0008](2)取当归、生地黄、熟地黄、黄芩、黄连、黄柏和黄芪，制成当归六黄汤组合物，将当归六黄汤组合物制成供试品溶液；
[0009](3)精密吸取供试品溶液和各参照物溶液，注入液相色谱仪进行色谱分析，检测波长为280nm～320nm，得到供试品指纹图谱和参照物色谱图谱，制定当归六黄汤组合物的标准指纹图谱。
[0010]进一步的，所述步骤(3)中，液相色谱仪进行色谱分析的条件为：
[0011]采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，柱温20℃～30℃；
[0012]以流动相为乙腈
‑
0.1％磷酸溶液进行洗脱，流速为0.2ml/min～0.3ml/min；
[0013]理论板数按黄芩苷峰计算≥10000。
[0014]进一步的，所述乙腈
‑
0.1％磷酸溶液以梯度洗脱，洗脱顺序为：
[0015]0～18min，乙腈5％
→
20％，0.1％磷酸溶液95％
→
80％；
[0016]18～35min，乙腈20％
→
25％，0.1％磷酸溶液80％
→
75％；
[0017]35～44min，乙腈25％
→
95％，0.1％磷酸溶液75％
→
5％；
[0018]44～44.1min，乙腈95％
→
5％，0.1％磷酸溶液5％
→
95％；
[0019]44.1～50min，乙腈5％，0.1％磷酸溶液95％。
[0020]进一步的，所述标准指纹图谱包含20个特征峰，按照出现的时间顺序依次编号为1
‑
20，所述标准指纹图谱中2、4、5、9、13和15号峰分别与5
‑
羟甲基糠醛、绿原酸、盐酸黄柏碱、阿魏酸、黄芩苷和盐酸小檗碱的色谱峰保留时间相对应，其中13号峰为S峰。
[0021]进一步的，所述标准指纹图谱中20个特征峰的保留时间由编号1
‑
20依次为：0.071、0.159、0.357、0.379、0.437、0.482、0.512、0.520、0.626、0.824、0.830、0.852、1.000、1.035、1.064、1.154、1.235、1.278、1.324和1.374。
[0022]进一步的，所述步骤(1)中，所述5
‑
羟甲基糠醛、绿原酸、盐酸黄柏碱、阿魏酸、黄芩苷和盐酸小檗碱，分别精度称定后各加70％甲醇制成每1ml含10～100μg溶质的溶液，为参照物溶液。
[0023]进一步的，所述步骤(2)中，精密称定当归六黄汤组合物0.1g，精密加入70％浓度甲醇50ml，进行超声处理，以70％浓度甲醇补足减失的重量，即得到所述的供试品溶液。
[0024]进一步的，所述当归六黄汤组合物的制备方法如下：
[0025]a、按重量份计称取如下饮片：当归4g，生地黄4g，熟地黄4g，黄芩4g，黄连4g，黄柏4g，黄芪8g；
[0026]b、将称取的饮片共同置于2L砂锅中，加600ml水，浸泡30分钟，加盖并煮沸，保持微沸至煎液300
‑
400ml，趁热用200目滤布过滤，得滤液；
[0027]c、滤液减压浓缩后，依次进行冷冻干燥、粉碎和混匀步骤，即得当归六黄汤组合物。
[0028]或者，所述当归六黄汤组合物的制备方法如下：
[0029]a、按重量份计称取如下饮片：当归250g，生地黄250g，熟地黄250g，黄芩250g，黄连250g，黄柏250g，黄芪500g；
[0030]b、将称取的饮片加20倍量的水，煎煮60分钟，滤除药渣，得滤液；
[0031]c、减压浓缩至相对密度为1.0
‑
1.20的清膏，依次进行加入麦芽糊精、干燥、混匀、加硬脂酸镁和干压制粒步骤，即得当归六黄汤组合物。
[0032]一种当归六黄汤组合物的指纹图谱检测方法，包括以下步骤：
[0033]将待测当归六黄汤组合物制成待测样品溶液；
[0034]将待测样品溶液注入液相色谱仪进行色谱分析，生成待测样品图谱；
[0035]以上所述的当归六黄汤组合物的指纹图谱构建方法中的标准指纹图谱作为对照图谱，计算待测样品图谱和标准指纹图谱的相似度，相似度大于0.9即为质量合格。
[0036]进一步的，所述将待测样品溶液注入液相色谱仪进行色谱分析的条件为：
[0037]采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，柱温20℃～30℃；
[0038]以流动相为乙腈
‑
0.1％磷酸溶液进行洗脱，流速为0.2ml/min～0.3ml/min；
[0039]检测波长为280nm～320nm，理论板数按黄芩苷峰计算≥10000；
[0040]所述乙腈
‑...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种当归六黄汤组合物的指纹图谱构建方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)取5
‑
羟甲基糠醛、绿原酸、盐酸黄柏碱、阿魏酸、黄芩苷和盐酸小檗碱为对照品，分别制成各参照物溶液；(2)取当归、生地黄、熟地黄、黄芩、黄连、黄柏和黄芪，制成当归六黄汤组合物，将当归六黄汤组合物制成供试品溶液；(3)精密吸取供试品溶液和各参照物溶液，注入液相色谱仪进行色谱分析，检测波长为280nm～320nm，得到供试品指纹图谱和参照物色谱图谱，制定当归六黄汤组合物的标准指纹图谱。2.根据权利要求1所述的当归六黄汤组合物的指纹图谱构建方法，其特征在于，所述步骤(3)中，液相色谱仪进行色谱分析的条件为：采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，柱温20℃～30℃；以流动相为乙腈
‑
0.1％磷酸溶液进行洗脱，流速为0.2ml/min～0.3ml/min；理论板数按黄芩苷峰计算≥10000。3.根据权利要求2所述的当归六黄汤组合物的指纹图谱构建方法，其特征在于，所述乙腈
‑
0.1％磷酸溶液以梯度洗脱，洗脱顺序为：0～18min，乙腈5％
→
20％，0.1％磷酸溶液95％
→
80％；18～35min，乙腈20％
→
25％，0.1％磷酸溶液80％
→
75％；35～44min，乙腈25％
→
95％，0.1％磷酸溶液75％
→
5％；44～44.1min，乙腈95％
→
5％，0.1％磷酸溶液5％
→
95％；44.1～50min，乙腈5％，0.1％磷酸溶液95％。4.根据权利要求1所述的当归六黄汤组合物的指纹图谱构建方法，其特征在于，所述标准指纹图谱包含20个特征峰，按照出现的时间顺序依次编号为1
‑
20，所述标准指纹图谱中2、4、5、9、13和15号峰分别与5
‑
羟甲基糠醛、绿原酸、盐酸黄柏碱、阿魏酸、黄芩苷和盐酸小檗碱的色谱峰保留时间相对应，其中13号峰为S峰。5.根据权利要求1所述的当归六黄汤组合物的指纹图谱构建方法，其特征在于，所述标准指纹图谱中20个特征峰的保留时间由编号1
‑
20依次为：0.071、0.159、0.357、0.379、0.437、0.482、0.512、0.520、0.626、0.824、0.830、0.852、1.000、1.035、1.064、1.154、1.235、1.278、1.324和1.374。6.根据权利要求1所述的当归六黄汤组合物的指纹图谱构建方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述5
‑
羟甲基糠醛、绿原酸、盐酸黄柏碱、阿魏酸、黄芩苷和盐酸小檗碱，分别精度称定后各加70％浓度甲醇制成每1ml...

【专利技术属性】
技术研发人员：曾杉，林碧珊，梁浩明，陈锦霞，徐晖，史紫娟，陈伟钢，陈科成，高永坚，汤春花，
申请(专利权)人：国药集团广东环球制药有限公司，
类型：发明
国别省市：