一种用HPLC法检测氨美愈素口服溶液中多种成分含量的方法技术

本发明专利技术公开了一种用HPLC法检测氨美愈素口服溶液中多种成分含量的方法，所述用HPLC法的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以磷酸盐缓冲溶液和甲醇的混合液为流动相A，以磷酸盐缓冲溶液和乙腈的混合液为流动相B进行梯度洗脱，流速为每分钟0.5‑1.5ml，柱温为25‑40℃，检测波长为200‑254nm。本发明专利技术不仅能够同时检测氨美愈素口服溶液中的乙酰氨基酚、氢溴酸右美沙芬、愈创木酚甘油醚、盐酸去氧肾上腺素、苯甲酸钠和培丙酯，且对其中共有峰均进行成分指认，具有重现性好，准确率高，适合于本发明专利技术氨美愈素口服溶液活性成分含量的质量控制。

【技术实现步骤摘要】
一种用HPLC法检测氨美愈素口服溶液中多种成分含量的方法
本专利技术涉及药物分析
，具体涉及一种用HPLC法检测氨美愈素口服溶液中多种成分含量的方法。
技术介绍
氨美愈素口服溶液是由活性成分对乙酰氨基酚、氢溴酸右美沙芬、愈创木酚甘油醚、盐酸去氧肾上腺素与一定量的非活性成分如助溶剂、矫味剂、防腐剂、抗氧化剂、助氧剂、PH调节剂等辅料组成，是一种治疗儿童多症状感冒发烧药，具有治疗和缓解常见的感冒和流感的症状，如鼻塞、咳嗽和由于轻微咽喉和支气管发炎咳嗽引起冲动的强度，能治疗和缓解轻微疼痛、头痛、喉咙痛，暂时减少发烧，有助于放松痰(黏液)和细支气管分泌物的排出。要保证药品的安全性和有效性，必须进行严格的质量控制。单独的乙酰氨基酚、氢溴酸右美沙芬、愈创木酚甘油醚、盐酸去氧肾上腺素等都有比较成熟的检测方法，例如：对乙酰氨基酚用分光光度法，氢溴酸右美沙芬用高效液相色谱法，愈创木酚甘油醚用滴定法，盐酸去氧肾上腺素用滴定法。但是将其制成复方制剂以后，如果用上述方法分别去检测每一种成份的含量，已经不可行，而且，即使勉强可行，也存在浪费人力物力，浪费资源，污染环境的问题。在现有技术中，也有采用高效液相色谱法同时检测复方制剂中多个成分的方法，但是，很多都具有检测结果不准确的缺点，例如，申请号为CN201410379846.0的利用高效液相色谱分析氨美愈软胶囊的方法，采用含有0.1v％三乙胺的辛烷磺酸钠溶液作为流动相A，以及采用乙腈作为流动相B，用梯度洗脱的方法进行成份分离，虽然也能够一次检测多个成份，但是其采用了三乙胺，是N,N-二乙基乙胺，具有叔胺的化学性质，水溶液呈碱性，与卤代烷反应可生成季铵盐，对氧化剂不稳定。加入辛烷磺酸钠离子对试剂后，又在流动相中加入三乙胺，不但流动相之间要互相影响，也对对乙酰氨基酚、愈创木酚甘油醚产生影响。同时，高效液相的色谱柱多为十八烷基硅烷键合硅胶的填充柱，三乙胺易损伤柱子。申请号为CN201610743206.2的检测药物样品中六个活性成分的方法，所述高效液相色谱法的流动相含有：流动相A，所述流动相A为含有0.1v/v％三氟乙酸的水溶液，以及流动相B，所述流动相B为体积比为60:40的乙腈和甲醇的混合溶液”。虽然也能够一次检测多个成份，但是其具有明显不足。其用到三氟乙酸，而三氟乙酸(TFA)是一种强羧酸，由于含有三氟甲基的特殊结构，其对本专利技术中的几种主要有效成分都有影响，特别是对对乙酰氨酚影响很大，会使其水解，所以，可能会严重影响检测结果的准确性。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种用HPLC法检测氨美愈素口服溶液中多种成分含量的方法，解决现有同时测量氨美愈素复方制剂中多种成分方法导致测量结果不准确的问题。本专利技术通过下述技术方案实现：一种用HPLC法检测氨美愈素口服溶液中多种成分含量的方法，所述用HPLC法的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以磷酸盐缓冲溶液和甲醇的混合液为流动相A，以磷酸盐缓冲溶液和乙腈的混合液为流动相B进行梯度洗脱，流速为每分钟0.5-1.5ml，柱温为25-40℃，检测波长为200-254nm。色谱柱的类型、流动相的组成以及流速都会显著影响HPLC法有关的保留时间、分离度、拖尾因子等，影响主要成分和杂质检测结果的准确性。申请人通过实验发现：采用上述色谱条件，不仅能够同时检测氨美愈素口服溶液中的对乙酰氨基酚、氢溴酸右美沙芬、愈创木酚甘油醚、盐酸去氧肾上腺素、苯甲酸钠和培丙酯，且对其中所有主峰均进行成分指认，具有重现性好，准确率高，适合于本专利技术氨美愈素口服溶液活性成分含量的质量控制。并且，本专利技术中所采用的磷酸盐缓冲溶液、甲醇和乙腈均对检测柱、氨美愈素口服溶液中成分没有影响。进一步地，流动相A中磷酸盐缓冲溶液和甲醇的体积比为90:10，所述流动相B中磷酸盐缓冲溶液和乙腈的体积比为25:75。进一步地，梯度洗脱的条件为：0-6分钟，流动相A90-90％、流动相B10-10％；6-20分钟，流动相A90-65％、流动相B10-35％；20-30分钟，流动相A65-50％、流动相B35-50％；30-40分钟，流动相A50-10％、流动相B50-90％；40-55分钟，流动相A90-90％、流动相B10-10％。进一步地，理论板数大于等于1000。进一步地，磷酸盐缓冲溶液为含磷酸二氢钠30mmol/L，辛烷磺酸钠2.50g/L，用磷酸调节pH至3.0的缓冲溶液。进一步地，流速为每分钟1.0ml，柱温为30℃，检测波长为220nm。进一步地，包括以下步骤：S1、对照品溶液的制备：分别称取对照品对乙酰氨基酚、氢溴酸右美沙芬、愈创木酚甘油醚、盐酸去氧肾上腺素、苯甲酸钠和培丙酯，然后分别用流动相A溶解并定量稀释制成每1ml中含对乙酰氨基酚325.0μg、氢溴酸右美沙芬10.0μg、愈创木酚甘油醚200.0μg、盐酸去氧肾上腺素5.0μg、苯甲酸钠20.0μg、培丙酯20.0μg的溶液，分别作为对照品溶液；S2、供试品溶液的制备：量取氨美愈素口服溶液，用流动相A定量稀释制成每1ml中含0.01ml氨美愈素口服溶液，过滤，取滤液作为供试品溶液；S3、检测：分别精密吸取对照品溶液5μl和20μl与供试品溶液5μl和20μl，注入液相色谱仪获得色谱图，根据色谱图中的峰面积计算各个成分的含量。口服溶液的具体配方如下：活性成分：对乙酰氨基酚28.0-35.0g、愈创木酚甘油醚15.0-25.0g、盐酸去氧肾上腺素0.4-0.6g、氢溴酸右美沙芬0.8-1.2g；其他辅助组分：1.5-2.5g稳定剂、400.0-600.0g助溶剂、95.0-110.0g矫味剂0.8-1.0g，增稠剂2.5-3.2g，PH调节剂0.4-0.6g，络合剂1.9-2.1g，色素30.0-35.0mg，芳香剂3.0-5.0ml以及防腐剂；加溶剂至总量为1000ml。所述稳定剂为棓丙酯，所述助溶剂为甘油和丙二醇混合物，所述矫味剂为山梨醇和三氯蔗糖的混合物，所述增稠剂为黄原胶，所述PH调解剂为无水枸橼酸和枸橼酸钠的混合物，所述防腐剂为苯甲酸钠，所述络合剂为依地酸二钠，所述芳香剂葡萄香精和蓝莓香精混合物，所述色素为诱惑红色素和亮蓝色素的混合物，所述溶剂为纯化水。本专利技术与现有技术相比，具有如下的优点和有益效果：1、本专利技术可以一次检测多个成份，可以实现对乙酰氨基酚、盐酸去氧肾上腺素、愈创木酚甘油醚、氢溴酸右美沙芬以及苯甲酸钠、棓丙酯的同时测定，并且该方法操作简单、分析快捷、重复性好、具有较好的专属性，该分析方法提高了效率，节省了成本。2、避免使用三乙胺，避免了与流动中的烷基磺酸钠产生影响，也避免了对对乙酰氨基酚、愈创木酚甘油醚产生影响。同时，防止了对色谱柱的损伤；避免使用三氟乙酸，解决了其对制剂中几种主要有效成分的影响的问题，使检测结果的准确性大大提高。3、本专利技术用流动相A作溶剂制备对照品溶液，解决了愈创木酚甘油醚、棓丙酯不溶于本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用HPLC法检测氨美愈素口服溶液中多种成分含量的方法，其特征在于，所述用HPLC法的色谱条件为：/n以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以磷酸盐缓冲溶液和甲醇的混合液为流动相A，以磷酸盐缓冲溶液和乙腈的混合液为流动相B进行梯度洗脱，流速为每分钟0.5-1.5ml，柱温为25-40℃，检测波长为200-254nm。/n

【技术特征摘要】
1.一种用HPLC法检测氨美愈素口服溶液中多种成分含量的方法，其特征在于，所述用HPLC法的色谱条件为：
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以磷酸盐缓冲溶液和甲醇的混合液为流动相A，以磷酸盐缓冲溶液和乙腈的混合液为流动相B进行梯度洗脱，流速为每分钟0.5-1.5ml，柱温为25-40℃，检测波长为200-254nm。


2.根据权利要求1所述的一种用HPLC法检测氨美愈素口服溶液中多种成分含量的方法，其特征在于，所述流动相A中磷酸盐缓冲溶液和甲醇的体积比为90:10，所述流动相B中磷酸盐缓冲溶液和乙腈的体积比为25:75。


3.根据权利要求1所述的一种用HPLC法检测氨美愈素口服溶液中多种成分含量的方法，其特征在于，所述梯度洗脱的条件为：
0-6分钟，流动相A90-90％、流动相B10-10％；6-20分钟，流动相A90-65％、流动相B10-35％；20-30分钟，流动相A65-50％、流动相B35-50％；30-40分钟，流动相A50-10％、流动相B50-90％；40-55分钟，流动相A90-90％、流动相B10-10％。


4.根据权利要求1所述的一种用HPLC法检测氨美愈素口服溶液中多种成分含量的方法，其特征在于，理论板数大于等于1000。

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【专利技术属性】
技术研发人员：何德中，杜鸿儒，曲韵智，钟茂团，钟小莉，刘亚，
申请(专利权)人：四川逢春制药有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51