一种限制性内切酶FseI的制备方法技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，具体涉及一种限制性内切酶FseI的制备方法。本发明专利技术提供一种重组表达载体，其含有一个或多个拷贝的限制性内切酶FseⅠ的编码基因，所述编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明专利技术还提供含有该重组表达载体的重组大肠杆菌以及利用该重组大肠杆菌制备限制性内切酶FseⅠ的方法。本发明专利技术的制备方法能够在较短时间内制备得到高纯度、高活性的FseⅠ限制性内切酶，极大地降低了FseⅠ的制备成本，提高了制备效率。

【技术实现步骤摘要】
一种限制性内切酶FseI的制备方法
本专利技术涉及生物
，具体涉及一种限制性内切酶FseI的制备方法。
技术介绍
限制性核酸内切酶是可以识别特定的脱氧核苷酸序列，对每条链中特定部位的两个脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶，简称限制酶，其剪切的位置可以在识别位点内也可以在识别位点外。1970年Smith等发现细菌体内有可以降解入侵其体内的噬菌体DNA的酶，这种酶被命名为HindⅡ，具有特定的识别和切割位点。研究者们发现切割后的DNA片段可以再次进行连接，并开始意识到这种限制性内切酶是研究生物的重要工具，将会引起生物
的革命性变化。限制性内切酶广泛存在于原核生物中，为了得到更多种类的限制性内切酶，人们展开了对原核生物的测序工作，通过分析基因组，找到了多种可以编码限制性内切酶的基因，越来越多的限制酶被发现并应用。目前人们已经发现几千种限制性内切酶，其中有几百种限制酶已经被商业化应用，限制性内切酶已经成为分子生物学研究的重要工具。美国NEB是最早开始克隆并外源表达限制性内切酶的公司。限制性内切酶根据结构、辅因子的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种重组表达载体，其特征在于，其含有一个或多个拷贝的限制性内切酶FseⅠ的编码基因，所述编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种重组表达载体，其特征在于，其含有一个或多个拷贝的限制性内切酶FseⅠ的编码基因，所述编码基因的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。


2.根据权利要求1所述的重组表达载体，其特征在于，所述载体还含有位于所述编码基因的上游的T5启动子和标签序列，所述启动子用于驱动所述编码基因的转录，所述标签序列与所述编码基因可操作性地连接；
优选地，所述标签序列为6×His标签序列；
更优选地，所述载体的骨架为pQE-80L。


3.一种重组大肠杆菌，其特征在于，其包含权利要求1或2所述的重组表达载体。


4.根据权利要求3所述的重组大肠杆菌，其特征在于，所述重组大肠杆菌为大肠杆菌Origami系列菌株。


5.权利要求1或2所述的重组表达载体或权利要求3或4所述的重组大肠杆菌在限制性内切酶FseⅠ制备中的应用。


6.一种限制性内切酶FseⅠ的制备方法，其特征在于，包括利用权利要求3或4所述的重组大肠杆菌表达限制性内切酶FseⅠ的步骤。


7.根据权利要求6所...

【专利技术属性】
技术研发人员：董娜，文伟彰，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：北京;11