本发明专利技术提供了一种真核细胞培养的激光共聚焦显微镜载液器件，包括下载体、上载体、密封垫、螺栓、载物玻片和分离式上盖；所述下载体的表面中央处开设有贯穿的大圆孔，所述下载体的表面左右两侧对称开设有贯穿的小圆孔，所述下载体顶部设有载物玻片，所述载物玻片盖合在所述下载体中间的大圆孔顶部，所述载物玻片顶部设有密封垫，所述密封垫顶部设有上载体，所述上载体的大圆孔顶部盖设有分离式上盖，两根螺栓依次穿过所述下载体和所述密封垫，并固定在所述上载体的小圆孔内，所述载物玻片被固定夹在所述下载体和所述密封垫之间。本发明专利技术具有拆卸方便，可进入灭菌锅中进行灭菌操作，反复使用，不但降低环境处理压力，而且减少使用成本件。
【技术实现步骤摘要】
一种真核细胞培养的激光共聚焦显微镜载液器件
本专利技术涉及实验器件
，具体为一种真核细胞培养的激光共聚焦显微镜载液器件。
技术介绍
激光共聚焦显微镜是由M.Minsky于1955年在哈佛大学率先专利技术使用。经过几十年的改进后，激光共聚焦显微镜已成为科学研究的重要工具。与普通显微镜相比，激光共聚焦显微镜能够抑制模糊的图像，在不改变物镜的情况下得到最佳分辨率，进而实现光学切片的三维重建。可以进行局部的光操作，对多种被荧光染料标记的样本进行信息获取和构建。与普通显微镜相比具有定位准确、扫描速度快的优势。激光共聚焦显微镜在生物学、环境学、测量学、医学、材料学研究中具有重要地位。激光共聚焦显微镜在生物学研究领域中广泛运用于组织和细胞中的分子和结构的检测、测量细胞内离子浓度的变化、实现荧光相关数据的测量、长时间观察细胞迁移和生长、进行三维表面的测量及光谱的成像的研究。然而，激光共聚焦显微镜采用针孔成像及倒置式的观察方式，要求使用厚度极薄的玻璃片(通常盖玻片的厚度为0.13-0.17mm)作为样品载物装置。直接使用载玻片和盖玻片组合操作困难，且不可以直接培养真核细胞。而目前市场上激光共聚焦显微镜使用的细胞培养皿价格昂贵，无法高温灭菌只能一次性使用，且需要配置特殊的支架才能固定在物镜上方。鉴于目前并未有成熟的面向真核细胞培养的激光共聚焦显微镜载液器件，我们提出专利技术一种价格便宜，能够反复灭菌，适用于普通显微镜支架(如载玻片支架)的激光共聚焦显微镜细胞培养载液器件，这一专利技术具有很高的迫切性和市场价值。激光共聚焦显微镜是基于传统光学显微镜的原理，再加装激光扫描装置，利用针孔阻断焦距外的光线以排除探测器聚焦外的光线，再利用光栅式扫描进行成像。在实际使用过程中，样品中的染料被激光激发，通过二色反射镜它聚焦在针孔(pinhole)上，通过针孔的光由光电倍增管来测量的。激光共聚焦显微镜结构包括用于光源、聚光器、检测器、光传输装置等。激光共聚焦显微镜需要将研究对象进行荧光标记，采用共轭聚焦的方式，逐点扫描观察样品，获得高分辨的共聚焦图像，通过控制Z轴焦平面实现三维成像。由于激光共聚焦显微镜采用针孔成像和倒置式观察的方式，要求观测物和镜头之间的距离非常短，因此对载物的玻片具有很高的厚度要求(可容忍的最大厚度约为0.17mm)。针对这种苛刻的观测要求，目前普遍有几种解决方案，能够在一定程度上实现观察的目的，但都具有一定的局限性。第一种方案是通过使用常规显微镜的盖玻片与载玻片组合来实现样品观测。具体方法是首先取待测样品加到载玻片上，然后在样品上方盖上盖玻片，进而将整个载玻片与盖玻片的组合翻转，最后将翻转得到的器件放在物镜上方进行观测。在这个过程中，翻转过快将导致待测样品搅动，翻转过慢则会导致待测样品溢出，影响了观测。同时由于盖玻片与载玻片之间的空间很小，不能放置较大样品，也不能进行细胞培养。另外溢出的待测样品若具有毒性，会对实验人员有潜在的健康风险。市面上通用的激光共聚焦显微镜细胞培养皿虽然可以实现细胞培养的目的且观测时不用翻转，但是仍具有一定的局限性。该培养皿由培养皿盖、带孔的培养皿体及盖玻片组成。培养皿底部使用特殊生物胶将厚度约为0.17mm的盖玻片与之粘合。这种培养皿的形状需要特殊的物镜载物台装置，与常用的载玻片载物台装置不匹配。并且此培养皿只能一次性使用，导致其使用价格昂贵(约10RMB一孔)。若能制备一种能反复灭菌且价格低廉的面向真核细胞培养的激光共聚焦显微镜载液器件，将会对激光共聚焦显微镜及其相关仪器(如在此基础上专利技术的激光共聚焦荧光相关谱仪)的推广，产生极大的推动作用。针对目前激光共聚焦显微镜常用观测方案的短板，我们研发了一种能反复灭菌使用的激光共聚焦显微镜载液器件，并对其进行了制片、消毒、细胞培养、成像等实验。
技术实现思路
本专利技术公开的目的在于提供一种可进行真核细胞培养的、能够用于常用的载玻片载物台的、成本低廉的、可重复使用的激光共聚焦显微镜载液器件，用以解决上述
技术介绍
中提出的问题。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：一种真核细胞培养的激光共聚焦显微镜载液器件，其特征在于：包括下载体、上载体、密封垫、螺栓、载物玻片和分离式上盖；所述下载体的表面中央处开设有贯穿的大圆孔，所述下载体的表面左右两侧对称开设有贯穿的小圆孔，所述下载体顶部设有载物玻片，所述载物玻片盖合在所述下载体中间的大圆孔顶部，所述载物玻片顶部设有密封垫，所述密封垫的表面中央处开设有贯穿的大圆孔，与所述下载体两侧的小圆孔同一位置处的所述密封垫的表面左右两侧对称开设有贯穿的小圆孔，所述密封垫顶部设有上载体，所述上载体的表面中央处开设有贯穿的大圆孔，与所述密封垫两侧的小圆孔同一位置处的所述上载体左右两侧对称开设有贯穿的小圆孔，所述小圆孔内设有与螺栓相匹配的螺纹，所述上载体的大圆孔顶部盖设有分离式上盖，两根螺栓依次穿过所述下载体和所述密封垫，并固定在所述上载体的小圆孔内，所述载物玻片被固定夹在所述下载体和所述密封垫之间。通过螺栓可将上载器、密封垫、载物玻片、下载器限位固定，不易出现载物玻片碎裂的情况，螺栓又可以将器件快速拆卸。进一步地，所述密封垫材质为硅胶。载物玻片上覆盖的密封垫对载物玻片和上载器进行贴合密封，避免液体外漏。进一步地，所述上载体和所述下载体材质均为透明玻璃，所述透明玻璃为高强度的耐高温和耐高压的玻璃。上载器、下载器均使用高强度的玻璃材质，在使用过程中不易出现弯曲、变形的情况。高强度的玻璃材质能够承受高温高压，可进入灭菌锅中进行灭菌操作，反复使用，不但降低环境处理压力，而且减少使用成本。进一步地，所述大圆孔过其圆心将所述下载体断成两截。进一步地，所述密封垫的长度为76mm，宽度为26mm，厚度为0.1mm。进一步地，载物玻片的长度为22mm，宽度为22mm，厚度为0.17mm。进一步地，所述下载体的长度为76mm，宽度为26mm，厚度为2mm。进一步地，所述上载体的长度为76mm，宽度为26mm，厚度为10mm。进一步地，所述大圆孔的直径为20mm，所述小圆孔的直径为10mm。进一步地，所述分离式上盖的长度为50mm，宽度为24mm，厚度为0.17mm。与现有技术相比，本专利技术具备以下有益效果：1、可进行真核细胞培养，能够用于常用显微镜载物台。2、上载器、下载器均使用强度较高的玻璃材质，在使用过程中不易出现弯曲、变形。3、通过螺栓螺将上载器、密封垫、载物玻片、下载器限位固定，不易出现载物玻片碎裂。4、载物玻片上覆盖的密封垫对载物玻片和上载器进行贴合密封，避免液体外漏。5、上载器、下载器所使用的玻璃材质能够承受高温高压，且装置拆卸方便，拆卸后可进入灭菌锅中进行灭菌操作，反复使用，不但降低环境处理压力，而且减少使用成本。附图说明图1为本专利技术的整体主视图；图2为本专利技术的整体俯视图；图3为本专利技术的整体侧视图；图4为本专利技术的3D拆解图；图5(本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种真核细胞培养的激光共聚焦显微镜载液器件，其特征在于：包括下载体(1)、上载体(2)、密封垫(3)、螺栓(4)、载物玻片(5)和分离式上盖(6)；所述下载体(1)的表面中央处开设有贯穿的大圆孔(7)，所述下载体(1)的表面左右两侧对称开设有贯穿的小圆孔(8)，所述下载体(1)顶部设有载物玻片(5)，所述载物玻片(5)盖合在所述下载体(1)中间的大圆孔(7)顶部，所述载物玻片(5)顶部设有密封垫(3)，所述密封垫(3)的表面中央处开设有贯穿的大圆孔(7)，与所述下载体(1)两侧的小圆孔(8)同一位置处的所述密封垫(3)的表面左右两侧对称开设有贯穿的小圆孔(8)，所述密封垫(3)顶部设有上载体(2)，所述上载体(2)的表面中央处开设有贯穿的大圆孔(7)，与所述密封垫(3)两侧的小圆孔(8)同一位置处的所述上载体(2)左右两侧对称开设有贯穿的小圆孔(8)，所述小圆孔(8)内设有与螺栓(4)相匹配的螺纹，所述上载体(2)的大圆孔(7)顶部盖设有分离式上盖(6)，两根螺栓(4)依次穿过所述下载体(1)和所述密封垫(3)，并固定在所述上载体(2)的小圆孔(8)内，所述载物玻片(5)被固定夹在所述下载体(1)和所述密封垫(3)之间。/n...
【技术特征摘要】
1.一种真核细胞培养的激光共聚焦显微镜载液器件，其特征在于：包括下载体(1)、上载体(2)、密封垫(3)、螺栓(4)、载物玻片(5)和分离式上盖(6)；所述下载体(1)的表面中央处开设有贯穿的大圆孔(7)，所述下载体(1)的表面左右两侧对称开设有贯穿的小圆孔(8)，所述下载体(1)顶部设有载物玻片(5)，所述载物玻片(5)盖合在所述下载体(1)中间的大圆孔(7)顶部，所述载物玻片(5)顶部设有密封垫(3)，所述密封垫(3)的表面中央处开设有贯穿的大圆孔(7)，与所述下载体(1)两侧的小圆孔(8)同一位置处的所述密封垫(3)的表面左右两侧对称开设有贯穿的小圆孔(8)，所述密封垫(3)顶部设有上载体(2)，所述上载体(2)的表面中央处开设有贯穿的大圆孔(7)，与所述密封垫(3)两侧的小圆孔(8)同一位置处的所述上载体(2)左右两侧对称开设有贯穿的小圆孔(8)，所述小圆孔(8)内设有与螺栓(4)相匹配的螺纹，所述上载体(2)的大圆孔(7)顶部盖设有分离式上盖(6)，两根螺栓(4)依次穿过所述下载体(1)和所述密封垫(3)，并固定在所述上载体(2)的小圆孔(8)内，所述载物玻片(5)被固定夹在所述下载体(1)和所述密封垫(3)之间。
2.根据权利要求1所述的真核细胞培养的激光共聚焦显微镜载液器件，其特征是所述密封垫(3)材质为硅胶。
3.根据权利要求1所述的真核细胞培养的激光共聚焦显微镜载...
【专利技术属性】
技术研发人员：侯森，阮奕铭，钟正，吕冰，戴洪萍，王文瑜，
申请(专利权)人：山东华谱检测技术有限公司，暨南大学，
类型：发明
国别省市：山东;37
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。