一种美藤果叶提取物及其提取方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种美藤果叶提取物的提取方法、该提取方法获得的美藤果叶提取物、所述美藤果叶提取物在制备1型糖尿病治疗药物中的应用、所述美藤果叶提取物在制备调节肠道菌群药物中的应用和所述美藤果叶提取物在调节肠道菌群中的应用，所述提取方法包括：原料预处理、酶法破壁处理、灭酶活、水浴搅拌提取和浓缩干燥5个步骤，提取方法操作方法简单，能有效提取美藤果叶中的活性成分，而且提取获得的美藤果叶提取物可以用于制备1型糖尿病药物，也可以作为患者治疗过程中有效的辅助手段，降低糖尿病的治疗成本；而且可以改善肠道菌群结构，可用于肠道的菌群调节，也可以用于制备调节肠道菌群相关药物。

【技术实现步骤摘要】
一种美藤果叶提取物及其提取方法和应用
本专利技术属于美藤果叶加工领域，具体涉及一种美藤果叶提取物、一种美藤果叶提取物的提取方法、美藤果叶提取物在制备1型糖尿病治疗药物中的应用、美藤果叶提取物在制备调节肠道菌群药物中的应用和美藤果叶提取物在调节肠道菌群中的应用。
技术介绍
糖尿病是一种全球性的代谢性疾病，与多种生理及心理疾病有关，会引发功能障碍、内脏损伤及其他长期并发症。据研究报道，2019年全球约有4.63亿人被诊断患有糖尿病，到2045年，糖尿病患病率将增至7亿人。糖尿病将成为21世纪人类健康面临的主要风险因素之一。1型糖尿病是一种免疫介导的糖尿病，占糖尿病病例的5％-10％，主要是由细胞介导的胰岛β细胞自身免疫破坏引起，导致胰岛素的缺乏，引起血糖升高。α-葡萄糖苷酶抑制剂、磺酰脲类、噻唑烷二酮类、双胍类和二肽基l肽酶抑制剂等药物虽可以用于1型糖尿病的治疗。然而，部分治疗药物的长期服用会引发严重的副作用，如低血糖、肝毒性、体重异常增加、腹胀腹泻等。研究表明，肠道菌群与人体代谢疾病具有重要关系。肠道菌群失衡可能是造成肥胖、糖尿病等多种代谢异常的重要原因之一。因此，寻找一种新型有效无毒副作用的天然药物用于1型糖尿病的预防和治疗迫在眉睫。美藤果，学名南美油藤，为大戟科美藤果属的多年生木质藤本植物，是一种新兴的热带地区油料品种。随着其果油及其蛋白被列为国家新资源食品，美藤果本身的加工和综合利用的问题也逐渐引起食品加工业的关注。美藤果叶作为美藤果加工副产物，富含酚类化合物，类固醇，萜类和黄酮类等生物活性物质，但目前尚未得到有效开发利用。因此，发掘美藤果叶中酚类物质潜在的功效机理，对提高美藤果的附加价值、开发天然药物、预防和治疗糖尿病具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本专利技术提出一种美藤果叶提取物的提取方法，所述提取方法获得的提取物可以用于制备治疗1型糖尿病的药物。本专利技术还提出一种美藤果叶提取物，所述美藤果叶提取物采用上述提取方法获得。本专利技术还提出一种美藤果叶提取物在制备1型糖尿病治疗药物中的应用，所述美藤果叶提取物采用上述提取方法获得。本专利技术还提出一种美藤果叶提取物在制备调节肠道菌群药物中的应用，所述美藤果叶提取物采用上述提取方法获得。本专利技术还提出美藤果叶提取物在调节肠道菌群中的应用，所述美藤果叶提取物采用上述提取方法获得。根据本专利技术第一方面实施例的美藤果叶提取物的提取方法，包括以下步骤：S1、原料预处理：挑选美藤果叶于50-65℃烘箱干燥5-8小时，然后粉碎过80-200目筛；S2、酶法破壁处理：称取美藤果叶粉末，加入10-40倍质量蒸馏水，混匀后加入0.25％-1.25％纤维素酶和0.1-1％中性蛋白酶，调pH为4.5-6.0，于40-60℃酶解3-5小时；：S3、灭酶活：破壁完成后于85-100℃水浴保温30-50分钟，然后4000r/min离心15-30分钟并收集溶液A；S4、水浴搅拌提取：于破壁沉淀物中加入适量沸水，连续搅拌提取3-5小时，然后用0.45-0.65μm微孔膜过滤并收集溶液B；S5、浓缩干燥：合并溶液A和B，然后进行减压蒸馏，于-80℃冷冻干燥。根据本专利技术的一些具体实施例，在所述步骤S1中，所述烘箱的温度为55℃，干燥时间为6小时，然后过100目筛。根据本专利技术的一些具体实施例，在所述步骤S2中，蒸馏水用量为20倍，纤维素酶用量为0.75％，中性蛋白酶用量为0.25％，调pH至5.5，50℃条件下酶解5小时进行破壁处理。根据本专利技术的一些具体实施例，在所述步骤S3中，水浴保温温度为95℃，水浴保温灭酶活时间为40分钟，离心时间为20分钟。根据本专利技术的一些具体实施例，在所述步骤S4中，连续搅拌提取时间为5小时，过滤用微孔膜口径为0.45μm。根据本专利技术的一些具体实施例，在所述步骤S5中，冷冻干燥采用真空冷冻干燥工艺进行处理。根据本专利技术第二方面实施例的美藤果叶提取物，采用根据上述实施例所述的美藤果叶提取物的提取方法提取获得。根据本专利技术第三方面实施例的美藤果叶提取物在制备1型糖尿病治疗药物中的应用，所述美藤果叶提取物采用根据上述实施例所述的美藤果叶提取物的提取方法提取获得。根据本专利技术第四方面实施例的美藤果叶提取物在制备调节肠道菌群药物中的应用，所述美藤果叶提取物采用根据上述实施例所述的美藤果叶提取物的提取方法提取获得。根据本专利技术第五方面实施例的美藤果叶提取物在调节肠道菌群中的应用。根据本专利技术实施例的美藤果叶提取物，对因糖尿病引起的体重急剧下降和高血糖应激也能起到一定减缓作用，同时对糖尿病胰岛素抵抗具有明显改善作用。因此，本专利技术实施例的美藤果叶提取物可以用于制备1型糖尿病药物，也可以作为患者治疗过程中有效的辅助手段，降低糖尿病的治疗成本；而且可以改善肠道菌群结构，可用于肠道的菌群调节，也可以用于制备调节肠道菌群相关药物；再者根据本专利技术实施例的提取方法，操作方法简单，能有效提取美藤果叶中的活性成分，设备要求及生产成本较低，适合大规模生产。本专利技术的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本专利技术的实践了解到。附图说明图1是根据本专利技术实施例的美藤果叶提取物的提取方法的流程图；图2是美藤果叶提取物对1型糖尿病小鼠(A)食物摄入量，(B)体重，(C)体重增长率和胰腺指数(D)的影响及不同小鼠的胰腺组织病理学观察结果示意图(E，其中a为正常小鼠，b为糖尿病小鼠，c为美藤果叶提取物治疗小鼠，d为二甲双胍治疗小鼠)；图3是美藤果叶提取物对1型糖尿病小鼠(A)空腹血糖，(B)葡萄糖耐量，(C)胰岛素抵抗，(D)血清胰岛素含量和(E)胰岛素敏感性指数的影响结果示意图；图4是美藤果提取物对1型糖尿病小鼠肠道菌群的(A)物种稀疏曲线，(B)主成分分析，(C)Shannon指数，(D)Simpson指数，(F)厚壁菌门和拟杆菌门相对丰度，(G)疣状杆菌和变形菌门的相对丰度，(H)厚壁菌门和拟杆菌门比例及肠道菌群在(E)门水平和(I)属水平的分布结构图。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。下面参照附图1-4描述根据本专利技术实施例的美藤果叶提取物的提取方法、美藤果叶提取物及其在制备1型糖尿病治疗药物、制备调节肠道菌群药物和调节肠道菌群中的应用。如图1所示，根据本专利技术第一方面实施例的美藤果叶提取物的提取方法，包括以下步骤：(1)原料预处理：挑选新鲜美藤果叶于55℃烘箱干燥6h，然后粉碎过100目筛；(2)酶法破壁处理：称取美藤果叶粉末，加入20倍质量蒸馏水，混匀后加入本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种美藤果叶提取物的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1、原料预处理：挑选美藤果叶于50-65℃烘箱干燥5-8小时，然后粉碎过80-200目筛；/nS2、酶法破壁处理：称取美藤果叶粉末，加入10-40倍质量蒸馏水，混匀后加入0.25％-1.25％纤维素酶和0.1-1％中性蛋白酶，调pH为4.5-6.0，于40-60℃酶解3-5小时；：/nS3、灭酶活：破壁完成后于85-100℃水浴保温30-50分钟，然后4000r/min离心15-30分钟并收集溶液A；/nS4、水浴搅拌提取：于破壁沉淀物中加入适量沸水，连续搅拌提取3-5小时，然后用0.45-0.65μm微孔膜过滤并收集溶液B；/nS5、浓缩干燥：合并溶液A和B，然后进行减压蒸馏，于-80℃冷冻干燥。/n

【技术特征摘要】
1.一种美藤果叶提取物的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、原料预处理：挑选美藤果叶于50-65℃烘箱干燥5-8小时，然后粉碎过80-200目筛；
S2、酶法破壁处理：称取美藤果叶粉末，加入10-40倍质量蒸馏水，混匀后加入0.25％-1.25％纤维素酶和0.1-1％中性蛋白酶，调pH为4.5-6.0，于40-60℃酶解3-5小时；：
S3、灭酶活：破壁完成后于85-100℃水浴保温30-50分钟，然后4000r/min离心15-30分钟并收集溶液A；
S4、水浴搅拌提取：于破壁沉淀物中加入适量沸水，连续搅拌提取3-5小时，然后用0.45-0.65μm微孔膜过滤并收集溶液B；
S5、浓缩干燥：合并溶液A和B，然后进行减压蒸馏，于-80℃冷冻干燥。


2.根据权利要求1所述的一种美藤果叶提取物的提取方法，其特征在于：在所述步骤S1中，所述烘箱的温度为55℃，干燥时间为6小时，然后过100目筛。


3.根据权利要求2所述的一种美藤果叶提取物的提取方法，其特征在于：在所述步骤S2中，蒸馏水用量为20倍，纤维素酶用量为0....

【专利技术属性】
技术研发人员：黎攀，林锦铭，杜冰，温嘉敏，李俊健，钟淳菲，任运红，徐雅囡，陈燕兰，赖玉萍，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：广东;44