LAMP等温扩增试剂的冻干微球及其制备方法以及应用技术

本发明专利技术涉及一种LAMP等温扩增试剂的冻干微球及其制备方法以及应用，该LAMP等温扩增试剂的冻干微球，包括LAMP引物组、冻干保护剂以及反应液；所述LAMP引物组包括外引物F3、外引物B3、内引物FIP、内引物BIP、环引物LF、环引物LB；所述冻干保护剂包括牛血清蛋白、苏氨酸和PEG20000；LAMP引物组、冻干保护剂、反应液的添加的体积份数分别为：7～14份、9～17份、9.2～17.75份。LAMP等温扩增试剂的冻干微球可增加检测试剂的稳定性，可常温运输，节约能源和运输成本，且便于分装。

【技术实现步骤摘要】
LAMP等温扩增试剂的冻干微球及其制备方法以及应用
本专利技术属于核酸检测
，具体涉及一种LAMP等温扩增试剂的冻干微球及其制备方法以及应用。
技术介绍
环介导等温扩增技术(Loop-mediatedisothermalamplification，LAMP)是日本荣研株式会专利技术的一种核酸体外扩增技术，根据靶标基因的6个区域，设计4条特异性引物，利用BstDNAPolymerase的链置换作用可以在60～65℃条件下，1小时内完成109～1010倍的扩增。由于LAMP扩增过程依赖识别靶序列6个独立区域，所以反应特异性很强，并且核酸扩增过程是在恒温条件下进行，普通水浴锅或者有稳定热源的设备就能满足反应要求。相对于普通PCR技术，LAMP技术具有操作简单、检测快速、特异性高、成本低等优点。目前，LAMP已成功应用于多个领域的检测，特别是应用于生物病原菌的检测，例如非洲猪瘟病毒、结核杆菌、2019-nCOV等，并得到WHO的认可及大力推广。但是，由于LAMP反应所需要的BstDNAPolymerase、dNTP和引物等成分需要在低温条本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.LAMP等温扩增试剂的冻干微球，其特征在于，包括LAMP引物组、冻干保护剂以及反应液；/n所述LAMP引物组包括外引物F3、外引物B3、内引物FIP、内引物BIP、环引物LF、环引物LB；/n所述冻干保护剂包括牛血清蛋白、苏氨酸和PEG20000；/nLAMP引物组、冻干保护剂、反应液的添加的体积份数分别为：7～14份、9～17份、9.2～17.75份。/n

【技术特征摘要】
1.LAMP等温扩增试剂的冻干微球，其特征在于，包括LAMP引物组、冻干保护剂以及反应液；
所述LAMP引物组包括外引物F3、外引物B3、内引物FIP、内引物BIP、环引物LF、环引物LB；
所述冻干保护剂包括牛血清蛋白、苏氨酸和PEG20000；
LAMP引物组、冻干保护剂、反应液的添加的体积份数分别为：7～14份、9～17份、9.2～17.75份。


2.根据权利要求1所述的LAMP等温扩增试剂的冻干微球，其特征在于，所述反应液包括BstDNA聚合酶、指示剂、dNTPS、缓冲剂、MgSO4、甜菜碱、逆转录酶，BstDNA聚合酶、指示剂、dNTPS、缓冲剂、MgSO4、甜菜碱、逆转录酶的添加的体积份数分别为：0.8～1.5份、0.5～2份、2.5～3.75份、2～4份、1.0～1.5份、2～4份、0.1～0.5份。


3.根据权利要求2所述的LAMP等温扩增试剂的冻干微球，其特征在于，所述反应液还包括dUTP和UNG酶，dUTP和UNG酶添加的体积份数分别为：1～2份、0.1～0.5份。


4.根据权利要求2所述的LAMP等温扩增试剂的冻干微球，其特征在于，所述指示剂为SYBRGreenI；所述缓冲剂为PCRbuffer。


5.根据权利要求1所述的LAMP等温扩增试剂的冻干微球，其特征在于，所述牛血清蛋白的原始浓度为16.7％(w/...

【专利技术属性】
技术研发人员：王云龙，王群智，邵俊影，王欣，林圣博，李强，王丽，王雯丽，王昱堃，
申请(专利权)人：河南智泰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：河南;41