一种免疫细胞培养基制造技术

本发明专利技术提出一种免疫细胞培养基，包括如下组份：氨基酸混合物、氨基酸盐混合物、酰胺混合物、无机盐混合物、D

【技术实现步骤摘要】
一种免疫细胞培养基


[0001]本专利技术属于细胞生物学
，特别是指一种免疫细胞培养基。

技术介绍

[0002]无血清培养基是指不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基，可以应用于培养免疫细胞，例如淋巴细胞、树突状细胞、单核/巨噬细胞等。与有血清培养基相比，无血清培养基不含对细胞有害的动物成分，而且价格相对低。然而，现有的无血清培养基培养免疫细胞时，为了加速细胞繁殖，缩短培养时间，在细胞培养前期需要补充自体血浆，否则很难达到临床的回输标准，而且所耗费的培养时间也更长，在三维培养体系中，该缺陷尤为显著，即使补充自体血浆，免疫细胞的增殖速度也比较慢，所需的培养时间远大于有血清培养基。因此，研发一种不用补充自体血浆即可适合免疫细胞快速增殖、有效缩短培养周期的免疫细胞培养基，是目前急需解决的技术问题。

技术实现思路

[0003]为解决以上现有技术的不足，本专利技术提出了一种适合免疫细胞快速增殖、有效缩短培养周期的免疫细胞培养基。
[0004]本专利技术的技术方案是这样实现的：
[0005]一种免疫细胞培养基，包括如下组份：氨基酸混合物、氨基酸盐混合物、酰胺混合物、无机盐混合物、D-泛酸钙、氯化胆碱、盐酸吡哆醛、盐酸硫胺素、肌醇、生物素、维生素、叶酸、核黄素、丙酮酸钠、葡萄糖、酚红、4-羟乙基哌嗪乙磺酸、人血白蛋白、转铁蛋白、维生素C磷酸镁、肝素钠、盐酸腐胺、胰岛素、超氧化物歧化酶、胆固醇、油酸、生育酚、棕榈酸、维生素A醋酸酯、碳酸氢钠和甲萘醌。
[0006]经过大量实验研究发现：上述组份以特定的浓度进行配比，各个组份互相协调、共同作用，提供免疫细胞增殖所需要的充足的营养和良好的环境，可以显著提高免疫细胞的增殖速度，极大缩短免疫细胞的培养时间；而且，令人意外的是，本专利技术在促进免疫细胞高速繁殖的同时，还显著提高了免疫细胞的存活率，而且临床安全性好。
[0007]优选的，氨基酸混合物由甘氨酸、L-丙氨酸、L-天冬氨酸、L-谷氨酸、盐酸组氨酸、异亮氨酸、L-亮氨酸、L-蛋氨酸、L-苯丙氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸、苏氨酸、L-色氨酸和L-缬氨酸组成；氨基酸盐混合物由L-精氨酸盐酸盐、L-胱氨酸二盐酸盐、赖氨酸盐酸盐和L-酪氨酸二钠组成；酰胺混合物由L-天冬酰胺、L-谷氨酰胺和烟酰胺组成；无机盐混合物由磷酸二氢钠、氯化钙、氯化钠、硫酸镁、氯化钾、亚硒酸钠、五水硫酸铜和九水合硝酸铁组成。
[0008]更为优选的，各个组份的含量分别为：甘氨酸25-35mg/L、L-丙氨酸20-30mg/L、L-精氨酸盐酸盐65-100mg/L、L-天冬酰胺20-30mg/L、L-天冬氨酸25-35mg/L、L-胱氨酸二盐酸盐80-100mg/L、L-谷氨酸60-85mg/L、L-谷氨酰胺500-650mg/L、盐酸组氨酸30-50mg/L、异亮氨酸80-120mg/L、L-亮氨酸80-120mg/L、赖氨酸盐酸盐130-160mg/L、L-蛋氨酸25-35mg/L、L-苯丙氨酸50-80mg/L、L-脯氨酸30-50mg/L、L-丝氨酸35-50mg/L、苏氨酸80-110mg/L、L-色
氨酸10-20mg/L、L-酪氨酸二钠80-120mg/L、L-缬氨酸80-110mg/L、磷酸二氢钠100-150mg/L、D-泛酸钙8-12mg/L、氯化钙100-130mg/L、氯化钠3500-6000mg/L、硫酸镁60-130mg/L、氯化胆碱10-14mg/L、烟酰胺10-14mg/L、盐酸吡哆醛10-14mg/L、盐酸硫胺素10-14mg/L、肌醇1-3mg/L、生物素1-3mg/L、维生素B12 1-3mg/L、叶酸1-3mg/L、核黄素1-3mg/L、丙酮酸钠90-130mg/L、氯化钾25-35mg/L、葡萄糖4000-5000mg/L、酚红15-22mg/L、4-羟乙基哌嗪乙磺酸1800-2200mg/L、亚硒酸钠0.01-0.02mg/L、五水硫酸铜0.0005-0.0005mg/L、九水合硝酸铁0.0005-0.005mg/L、人血白蛋白4000-6000mg/L、转铁蛋白15-40mg/L、维生素C磷酸镁400-600mg/L、肝素钠5-8mg/L、盐酸腐胺5-8mg/L、胰岛素20-30mg/L、超氧化物歧化酶30-50mg/L、胆固醇10-14mg/L、油酸2-6mg/L、生育酚1-5mg/L、棕榈酸1-5mg/L、维生素A醋酸酯1-5mg/L、碳酸氢钠2500-3500mg/L、甲萘醌0.005-0.015mg/L。
[0009]最为优选的，各个组份的含量分别为：甘氨酸30mg/L、L-丙氨酸25mg/L、L-精氨酸盐酸盐84mg/L、L-天冬酰胺25mg/L、L-天冬氨酸30mg/L、L-胱氨酸二盐酸盐90mg/L、L-谷氨酸75mg/L、L-谷氨酰胺584mg/L、盐酸组氨酸42mg/L、异亮氨酸105mg/L、L-亮氨酸105mg/L、赖氨酸盐酸盐146mg/L、L-蛋氨酸30mg/L、L-苯丙氨酸66mg/L、L-脯氨酸40mg/L、L-丝氨酸42mg/L、苏氨酸95mg/L、L-色氨酸16mg/L、L-酪氨酸二钠104mg/L、L-缬氨酸94mg/L、磷酸二氢钠125mg/L、D-泛酸钙8-12mg/L、氯化钙117mg/L、氯化钠4500mg/L、硫酸镁98mg/L、氯化胆碱10-14mg/L、烟酰胺10-14mg/L、盐酸吡哆醛10-14mg/L、盐酸硫胺素10-14mg/L、肌醇1-3mg/L、生物素1-3mg/L、维生素B12 1-3mg/L、叶酸1-3mg/L、核黄素1-3mg/L、丙酮酸钠110mg/L、氯化钾30mg/L、葡萄糖4500mg/L、酚红20mg/L、4-羟乙基哌嗪乙磺酸2000mg/L、亚硒酸钠0.017mg/L、五水硫酸铜0.001mg/L、九水合硝酸铁0.005mg/L、人血白蛋白5000mg/L、转铁蛋白15-40mg/L、维生素C磷酸镁500mg/L、肝素钠5-8mg/L、盐酸腐胺5-8mg/L、胰岛素25mg/L、超氧化物歧化酶40mg/L、胆固醇10-14mg/L、油酸2-6mg/L、生育酚3mg/L、棕榈酸3mg/L、维生素A醋酸酯3mg/L、碳酸氢钠3025mg/L、甲萘醌0.01mg/L。
[0010]与现有的无血清免疫细胞培养基相比，本专利技术不用补充自体血浆即可适合免疫细胞快速增殖，显著缩短了免疫细胞的培养周期，二维、三维的细胞培养体系均适用，应用范围更广。
具体实施方式
[0011]下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0012]以下实施例所用的原料均通过商购获得。配制时，先在容器内加入略少于培养基总体积的水，室温下向水中加入除去碳酸氢钠之外的其他各组份并轻轻搅拌至均匀，之后加入碳酸氢本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种免疫细胞培养基，其特征在于：包括如下组份：氨基酸混合物、氨基酸盐混合物、酰胺混合物、无机盐混合物、D-泛酸钙、氯化胆碱、盐酸吡哆醛、盐酸硫胺素、肌醇、生物素、维生素、叶酸、核黄素、丙酮酸钠、葡萄糖、酚红、4-羟乙基哌嗪乙磺酸、人血白蛋白、转铁蛋白、维生素C磷酸镁、肝素钠、盐酸腐胺、胰岛素、超氧化物歧化酶、胆固醇、油酸、生育酚、棕榈酸、维生素A醋酸酯、碳酸氢钠和甲萘醌。2.根据权利要求1所述的免疫细胞培养基，其特征在于：所述氨基酸混合物由甘氨酸、L-丙氨酸、L-天冬氨酸、L-谷氨酸、盐酸组氨酸、异亮氨酸、L-亮氨酸、L-蛋氨酸、L-苯丙氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸、苏氨酸、L-色氨酸和L-缬氨酸组成；所述氨基酸盐混合物由L-精氨酸盐酸盐、L-胱氨酸二盐酸盐、赖氨酸盐酸盐和L-酪氨酸二钠组成；所述酰胺混合物由L-天冬酰胺、L-谷氨酰胺和烟酰胺组成；所述无机盐混合物由磷酸二氢钠、氯化钙、氯化钠、硫酸镁、氯化钾、亚硒酸钠、五水硫酸铜和九水合硝酸铁组成。3.根据权利要求2所述的免疫细胞培养基，其特征在于：各个组份的含量分别为：甘氨酸25-35mg/L、L-丙氨酸20-30mg/L、L-精氨酸盐酸盐65-100mg/L、L-天冬酰胺20-30mg/L、L-天冬氨酸25-35mg/L、L-胱氨酸二盐酸盐80-100mg/L、L-谷氨酸60-85mg/L、L-谷氨酰胺500-650mg/L、盐酸组氨酸30-50mg/L、异亮氨酸80-120mg/L、L-亮氨酸80-120mg/L、赖氨酸盐酸盐130-160mg/L、L-蛋氨酸25-35mg/L、L-苯丙氨酸50-80mg/L、L-脯氨酸30-50mg/L、L-丝氨酸35-50mg/L、苏氨酸80-110mg/L、L-色氨酸10-20mg/L、L-酪氨酸二钠80-120mg/L、L-缬氨酸80-110mg/L、磷酸二氢钠100-150mg/L、D-泛酸钙8-12mg/L、氯化钙100-130mg/L、氯化钠3500-6000mg/L、硫酸镁60-130mg/L、氯化胆碱10-14mg/L、烟酰胺10-14mg/L、盐酸吡哆醛10-14mg/L、盐酸硫胺素10-14mg/L、肌醇1-3mg/L、生物素1-3mg/L、维生素B12 1-3mg/L、叶酸1-3mg/L、核黄素1-3mg/L、丙酮酸钠90-130mg/L、氯化钾25-35mg/L、葡萄糖4000-5000mg/L、酚红15-22mg/L、4-羟乙...

【专利技术属性】
技术研发人员：高旭，
申请(专利权)人：天津市灏洋生物制品科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：