一种标志物或其特异性识别试剂在制备诊断胃癌试剂盒中的应用和诊断试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及分子生物学领域，特别涉及一种标志物或其特异性识别试剂在制备诊断胃癌试剂盒中的应用和诊断试剂盒。该标志物包括精胺、肠抑素、硫酸肝素、三酰甘油中的一种或几种。本发明专利技术具有如下有益效果：利用该标志物对早期胃癌进行筛查，具有低侵入性、简单高效且费用低廉的优点。费用低廉的优点。

【技术实现步骤摘要】
一种标志物或其特异性识别试剂在制备诊断胃癌试剂盒中的应用和诊断试剂盒


[0001]本专利技术涉及分子生物学领域，特别涉及一种标志物或其特异性识别试剂在制备诊断胃癌试剂盒中的应用和诊断试剂盒。

技术介绍

[0002]胃癌(gastric carcinoma)是起源于胃黏膜上皮的恶性肿瘤，在我国各种恶性肿瘤中发病率居首位，胃癌发病有明显的地域性差别，在我国的西北与东部沿海地区胃癌发病率比南方地区明显为高。好发年龄在50岁以上，男女发病率之比为2：1。由于饮食结构的改变、工作压力增大以及幽门螺杆菌的感染等原因，使得胃癌呈现年轻化倾向。胃癌可发生于胃的任何部位，其中半数以上发生于胃窦部，胃大弯、胃小弯及前后壁均可受累。绝大多数胃癌属于腺癌，早期无明显症状，或出现上腹不适、嗳气等非特异性症状，常与胃炎、胃溃疡等胃慢性疾病症状相似，易被忽略，因此，目前我国胃癌的早期诊断率仍较低。
[0003]早期胃癌预后较中晚期胃癌好，因此，诊断早期胃癌极为重要。目前早期胃癌的诊断主要依赖于内镜技术，但内镜属于侵入性检查，存在痛苦大、医从性差、费用高等局限性，因此受筛查条件、人群接受程度以及就医成本等因素的制约，尚无法成为大规模筛查的检查手段。
[0004]代谢组学(metabonomics)是主要研究生物体内小分子物质(相对分子质量不超过1000)种类及数量变化规律的新兴学科，它可以放大基因组和蛋白质组的微小变化，反映基因功能活动的终点和生物化学表型的变化，也直接关系到这些活动的最终效果。因此，代谢组学被认为是组学研究的最终方向。机体健康状态的变化可以通过对血液、尿液、脑脊液以及唾液等体液变化进行研究，可以利用代谢组学对体液进行研究从而寻找到疾病重要的标志性代谢物。近年来在研究乳腺癌、肝癌、前列腺癌、肺癌和脑肿瘤的发生发展过程中，代谢组学对潜在生物信息的发掘和发病机制的研究方面提供了坚实的理论支持：如YueX等发现43种精氨酸代谢物有助于准确诊断小细胞肺癌；Zhang发现代谢产物的水平(如谷氨酸和谷氨酰胺)，在癌组织和正常组织明显不同，这种差异是与病理特点淋巴结转移和术后生存时间密切相关的。但代谢组学在诊断早期胃癌方面的作用尚不十分明确。

技术实现思路

[0005]有鉴于此，本专利技术提供了一种标志物或其特异性识别试剂在制备诊断胃癌试剂盒中的应用和诊断试剂盒。利用该标志物对早期胃癌进行筛查，具有低侵入性、简单高效且费用低廉的优点。
[0006]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0007]本专利技术提供了一种标志物在制备诊断胃癌试剂盒中的应用，该标志物包括精胺、肠抑素、硫酸肝素、三酰甘油中的一种或几种。
[0008]本研究收集了吉林大学第一医院63例胃癌患者的血样及相关临床资料，应用液相
色谱-质谱联用技术(LC-MS)进行检测，获得其代谢图谱及数据。采用支持向量机(SVM)筛选血样中权重为100％的差异代谢物；采用总离子流图、主成分析和方差分析(ANOVA)鉴定差异性代谢产物；采用聚类分析(PCA)、偏最小二乘判别分析评价样本间的相似性；采用受试者特性曲线(ROC曲线)评价分析代谢产物的诊断能力，从而能筛选出区分能力强的差异性代谢产物。将筛选出的代谢产物的质核比导入人类代谢组数据库(HMDB)对其进行结构鉴定确定对应物质后，再利用验证组检验已确定代谢产物的准确性。最后得出，精胺、肠抑素、硫酸肝素、三酰甘油是诊断早期胃癌潜在标志物。
[0009]作为优选，上述标志物包括精胺、肠抑素、硫酸肝素、三酰甘油中的至少两种。
[0010]作为优选，肠抑素为APGPR肠抑素。
[0011]作为优选，三酰甘油为甘油三油酸酯。
[0012]在本专利技术中，胃癌为早期胃癌或进展期胃癌。
[0013]本专利技术还提供了一种特异性识别标志物的试剂在制备诊断胃癌试剂盒中的应用，该标志物包括精胺、肠抑素、硫酸肝素、三酰甘油中的一种或几种。
[0014]作为优选，肠抑素为APGPR肠抑素。
[0015]在本专利技术中，胃癌为早期胃癌或进展期胃癌。
[0016]本专利技术还提供了一种诊断胃癌的试剂盒，试剂盒包括特异性识别标志物的试剂，该标志物包括精胺、肠抑素、硫酸肝素、三酰甘油中的一种或几种。
[0017]作为优选，特异性识别标志物的试剂为特异性抗体。
[0018]作为优选，试剂盒还包括用于免疫检测的其它试剂。
[0019]作为优选，免疫检测选自免疫组化、免疫荧光、免疫沉淀、免疫流式细胞学或免疫杂交。
[0020]本专利技术提供了一种标志物或其特异性识别试剂在制备诊断胃癌试剂盒中的应用和诊断试剂盒。该标志物包括精胺、肠抑素、硫酸肝素、三酰甘油中的一种或几种。本专利技术具有如下有益效果：利用该标志物对早期胃癌进行筛查，具有低侵入性、简单高效且费用低廉的优点。
附图说明
[0021]图1示进展期胃癌(A)、早期胃癌(B)和健康人(C)的总离子流图，横坐标表示离子的保留时间，纵坐标表示离子的峰值强度，红色箭头表示在同一保留时间下三组样本的峰值存在差异；
[0022]图2示2D模式(A)和3D模式(B)对进展期胃癌组、早期胃癌组、健康人组及QC组进行主成分分析，红色代表进展期胃癌组，绿色代表早期胃癌组，黄色代表健康人组，蓝色代表QC组；样本之间的距离越远，说明组间的代谢产物的差距越大；
[0023]图3示对进展期胃癌组、早期胃癌组、健康人组进行偏最小二乘判别分析，红色代表进展期胃癌组，绿色代表早期胃癌组，蓝色代表健康人组；左图可以看出三组样本可以很好的区分开；
[0024]图4示实验组VIP值，对进展期胃癌、早期胃癌和健康人进行VIP值计算；横坐标是权重值，纵坐标是质核比，共可以筛选出5个权重值＞1的代谢物；
[0025]图5示进展期胃癌、早期胃癌和健康人的聚类分析；图中红色表示峰度值相对大
的，蓝色表示峰度值相对小的，白色表示峰度值接近为零；颜色越深表示化合物峰度值越大，颜色越相似表示峰度值越相近；可以看到，在两组之间存在具有明显差异的化合物，且部分化合物之间存在相似性；但总体几种产物可以在组间分开；
[0026]图6示4种代谢物在胃癌患者和健康人的ROC曲线图(A)、4种代谢物在早期胃癌患者和健康人的ROC曲线图；纵坐标是敏感性，代表真阳性率，横坐标是以1-特异性，代表假阳性率；曲线越靠近左上角，说明对应的代谢物质在该组患者样本中含量高，曲线越靠近右下角，说明对应的代谢物质在健康组患者样本中含量高；
[0027]图7示4个代谢产物在进展期胃癌、早期胃癌和健康组的柱状图，从柱状图可以看到4中代谢物含量具有明显的统计学差异，并呈现出相应的变化趋势；
[0028]图8示验证组进展期胃癌、早期胃癌和健康人的聚类分析，结果显示4种代谢物在各组存在明显分布差异，可以根据这4种代谢物对各组可以实现较好分组；
[0029]图9示验证组4种代谢物在胃癌和健康人样本的ROC曲线图(A)，验证组4种代谢物在本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种标志物在制备诊断胃癌试剂盒中的应用，其特征在于，所述标志物包括精胺、肠抑素、硫酸肝素、三酰甘油中的一种或几种。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述肠抑素为APGPR肠抑素。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述胃癌为早期胃癌或进展期胃癌。4.一种特异性识别标志物的试剂在制备诊断胃癌试剂盒中的应用，其特征在于，所述标志物包括精胺、肠抑素、硫酸肝素、三酰甘油中的一种或几种。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述肠抑素为APGPR肠抑素。6.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：王大广，所剑，李伟，都业超，潘国强，
申请(专利权)人：吉林大学第一医院，
类型：发明
国别省市：