实时荧光绝对定量检测家禽干扰素刺激因子的试剂盒、检测方法及应用技术

本发明专利技术涉及一种实时荧光绝对定量检测家禽干扰素刺激因子的试剂盒、检测方法及应用。本发明专利技术实时荧光绝对定量检测家禽干扰素刺激因子的试剂盒，包含：上游引物、下游引物以及Taq Man探针。本发明专利技术提供利用上述的试剂盒检测家禽干扰素刺激因子的方法，包括：将标准品模板和待测样品DNA模板分别置于各自的反应体系中，并同时置入PCR仪进行扩增，扩增完毕后由PCR仪自动得出检测结果；检测结束后，根据噪音情况设定和调整基线及阈值并利用随机软件进行分析，建立标准曲线，根据荧光曲线和Ct值判断结果。本发明专利技术检测方法及试剂盒具有高灵敏度及相对的高特异性，而且可以精确定量检测标本中家禽干扰素刺激因子的mRNA表达量。中家禽干扰素刺激因子的mRNA表达量。中家禽干扰素刺激因子的mRNA表达量。

【技术实现步骤摘要】
实时荧光绝对定量检测家禽干扰素刺激因子的试剂盒、检测方法及应用


[0001]本专利技术涉及一种实时荧光绝对定量检测家禽干扰素刺激因子的试剂盒、检测方法及应用，属于生物分析检测


技术介绍

[0002]干扰素刺激因子(STING)是与固有免疫应答密切相关的一种信号转导分子，在多种内皮细胞、上皮细胞和造血干细胞中均有表达，主要定位于胞内内质网、线粒体及微粒体的外膜上。人源STING(hSTING)蛋白由379个氨基酸组成，可分为3个结构功能域，包括N端的4次跨膜结构域(TM1～4)、二聚化结构域和C端面向胞质内的结构域。一般认为STING蛋白N端的4个TM使其能够锚定于内质网上，二聚化结构域高度保守，可能与其活化功能有关，而球状的C端结构域含有多种信号基序，其C尾端结构域对STING有着自我抑制作用，是招募TBK1的关键基序。
[0003]STING蛋白是DNA感受通路中的关键蛋白，，对于固有免疫和适应性免疫启动具有重要作用。STING作为信号转导接头蛋白能募集TANK结合激酶1(TANK binding kinase 1，TBK1本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.实时荧光绝对定量检测家禽干扰素刺激因子的试剂盒，其特征在于，包含：上游引物STING F:5
’-
GGTCCTACTACATCGGCTACCTGA-3
’
，下游引物STING R:5
’-
GGCCTGAGCTTGTTGTCCTTATCT-3
’
，以及Taq Man探针STING P:5
’-
FAM-TGGAAGCTCCACATCCTGGTC-TAMRA-3
’
。2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，还包含102、103、104、105、106、107、108拷贝/uL的家禽STING基因阳性质粒作为标准品模板。3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述的家禽STING阳性质粒是以PCGGS载体为载体，在其EcoR I以及xho1HA位点插入序列如SEQ ID N0.3所示的部分家禽STING基因所得。4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，还包含通用型Taq Man基因扩...

【专利技术属性】
技术研发人员：钱琨，何惠芬，秦爱建，邵红霞，金文杰，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：