通过PTP1B抑制活化细胞的方法技术

本发明专利技术一般涉及活化用于治疗的细胞的方法。例如，本发明专利技术涉及制备用于免疫治疗，特别是用于癌症免疫治疗的离体细胞。更具体地，本发明专利技术涉及制备用于过继细胞转移的表现出细胞毒性特性的白细胞(特别是通过PTP1B抑制的T细胞)的方法。本发明专利技术还涉及用于癌症免疫治疗的细胞和包括它们的组合物。本发明专利技术还涉及免疫治疗的方法，特别是癌症免疫治疗的方法。特别是癌症免疫治疗的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】通过PTP1B抑制活化细胞的方法


[0001]本专利技术一般涉及活化用于治疗的细胞的方法。例如，本专利技术涉及制备用于免疫治疗，特别是用于癌症免疫治疗的离体细胞。更具体地，本专利技术涉及制备用于过继细胞转移的表现出细胞毒性特性的白细胞(特别是T细胞)的方法。本专利技术还涉及用于癌症免疫治疗的细胞和包括它们的组合物。本专利技术还涉及免疫治疗的方法，特别是癌症免疫治疗的方法。
[0002]相关申请
[0003]本申请要求澳大利亚临时申请AU 2018901979的优先权，通过引用将其内容和公开整体并入本文。

技术介绍

[0004]免疫治疗是利用患者的免疫系统来抵抗疾病(例如癌症或病毒感染)，通过刺激患者的免疫系统来攻击恶性肿瘤或病毒感染的细胞(并且不伤害患者的正常细胞)。免疫治疗的一种模式采用患者的免疫(例如，通过施用癌症疫苗)来训练患者的免疫系统以识别和破坏肿瘤细胞。另一种方法是利用治疗性抗体的施用，从而招募患者的免疫系统来破坏肿瘤细胞。基于细胞的免疫治疗是另一种方法，其涉及诸如自然杀伤细胞(NK细胞)、淋巴因子活化的杀伤细胞(LAK)、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)、树突状细胞(DC)等的免疫细胞。
[0005]患者自身的免疫系统可以耐受许多种肿瘤细胞或病毒感染的细胞，由于它们是患者自身的细胞(例如，它们是自体的)并且不会被患者的免疫系统有效识别，从而使肿瘤或病毒感染的细胞在没有适当的监管控制下生长并分裂。另外，肿瘤特异性T细胞通常是耐受的，因此它们不响应肿瘤活性。因此，患者自身的免疫系统需要刺激才会攻击患病细胞。
[0006]过继细胞转移(ACT)是一种有效的免疫治疗形式，涉及将具有抗肿瘤或抗病毒活性的免疫细胞转移到患者中。ACT是一种治疗方法，其通常涉及识别具有抗肿瘤或抗病毒活性的淋巴细胞，将这些细胞大量体外扩增并将其输注到患病宿主中。
[0007]过继T细胞治疗取决于以下能力：最佳选择或基因工程具有靶标抗原特异性的细胞，然后诱导T细胞增殖同时保留其效应子功能以及移植和归巢能力。然而，已经对过继转移的细胞进行了临床试验，这些细胞是在目前被认为会损害T细胞的基本功能(例如抗原特异性细胞毒活性)的次优条件下培养的。
[0008]当前用于制备用于过继细胞治疗的细胞的方法受限于它们所提供的细胞对靶细胞(例如肿瘤细胞)的细胞杀伤小于预期。因此，需要用于过继细胞治疗或用于制备用于过继细胞治疗的细胞的新的或改进的方法和/或组合物。
[0009]还另外需要用于刺激免疫系统以治疗癌症的新的或改进的方法和/或组合物。
[0010]在说明书中对任何现有技术的引用不是承认或暗示：该现有技术在任何管辖范围内构成公知常识的一部分，或者该现有技术可以被合理地预期能被本领域技术人员理解、视为相关，和/或可以与现有技术的其他片段结合。

技术实现思路

[0011]本专利技术涉及一种用于生产具有增强的杀伤靶细胞能力的白细胞的方法，该方法包括：
[0012]-在能使PTP1B抑制剂失活白细胞中的PTP1B的条件下，使白细胞与PTP1B抑制剂接触，
[0013]从而产生具有增强的杀伤靶细胞能力的白细胞。
[0014]本专利技术涉及用于生产具有增强的杀伤靶细胞能力的白细胞的方法，该方法包括：
[0015]-在能使白细胞中的PTP1B失活的条件下，使白细胞与PTP1B抑制剂离体接触足够的时间，
[0016]从而产生具有增强的杀伤靶细胞能力的白细胞。
[0017]本专利技术涉及一种用于制备表现出细胞毒性T细胞的至少一种特性的离体T细胞群的方法，其包括在PTP1B抑制剂的存在下培养T细胞。
[0018]本专利技术涉及一种用于制备表现出细胞毒性T细胞的至少一种特性的离体T细胞群的方法，其包括以下步骤：
[0019]-在PTP1B抑制剂的存在下，从生物样品中培养T细胞群；
[0020]-扩增培养的细胞；
[0021]从而制备表现出细胞毒性特性的离体T细胞群。优选地，所述生物样品源自患有癌症的主体，或者已经被调节或改造成对癌症具有特异性。
[0022]本专利技术涉及一种用于制备包含抗原特异性细胞毒性T细胞的组合物的离体方法，该方法包括：
[0023]-提供含有T细胞群的生物样品；
[0024]-在PTP1B抑制剂的存在下，将抗原物质与T细胞群共培养；以及
[0025]-扩增培养的细胞；
[0026]从而离体制备包含抗原特异性细胞毒性T细胞的组合物。
[0027]本专利技术涉及一种用于扩增白细胞群的方法，该方法包括：
[0028]-在能使PTP1B抑制剂失活白细胞中的PTP1B的条件下，使白细胞群与PTP1B抑制剂接触，
[0029]从而扩增白细胞群。所述白细胞可以包含T细胞或B细胞。优选地，所述白细胞包含T细胞，所述T细胞包括CD4+和CD8+ T细胞。所述T细胞还可以包括效应子和效应子记忆T细胞和/或中央记忆T细胞。所述T细胞也可以进行基因改造以表达抗肿瘤T细胞受体或嵌合抗原受体(CAR)，或者可以是γδT细胞。所述白细胞还可以包含肿瘤浸润淋巴细胞、外周血淋巴细胞，或者用混合淋巴细胞肿瘤细胞培养物(mixed lymphocyte tumour cell culture，MLTC)富集，或者使用自体抗原呈递细胞和肿瘤衍生肽进行克隆。淋巴细胞可以从组织相容性供体或患癌主体中分离。
[0030]本专利技术涉及一种增加主体中表现出效应子记忆表型的T细胞水平的方法，其包括以下步骤：
[0031]-在PTP1B抑制剂的存在下，从生物样品中离体培养T细胞群；
[0032]-扩增培养的细胞；
[0033]-将培养的细胞施用于主体；
[0034]从而增加主体中表现出效应子记忆表型的T细胞水平。
[0035]本专利技术还提供了一种用于在主体中形成适于治疗癌症的免疫应答的方法，包括以下步骤：
[0036]-从所述主体或组织相容性供体主体获得T细胞；
[0037]-在能产生表现出至少一种细胞毒性T细胞特性的T细胞群的条件下，在PTP1B抑制剂的存在下离体培养T细胞足够的时间，从而形成细胞毒性T细胞群，
[0038]-将细胞毒性T细胞群施用于所述主体；
[0039]从而在主体中产生适于治疗癌症的免疫应答。
[0040]本专利技术还涉及一种增强具有疾病状态的主体中CD8+ T细胞介导的免疫的方法，包括：
[0041]-在能产生表现出细胞毒性T细胞的至少一种特性的CD8+ T细胞群的条件下，使CD8+T细胞与PTP1B抑制剂离体接触足够的时间；
[0042]-将CD8+ T细胞群施用于主体；
[0043]从而增强主体中CD8+ T细胞介导的免疫。
[0044]本专利技术还涉及一种增强具有疾病状态的主体中CD8+ T细胞介导的免疫的方法，包括：
[0045]-分离所述主体的CD8+ T细胞群；
[0046]-将编码针对PTP1B的si本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于生产具有增强的杀伤靶细胞能力的白细胞的方法，所述方法包括：-在能使PTP1B抑制剂失活白细胞中的PTP1B的条件下，使白细胞与PTP1B抑制剂接触，从而产生具有增强的杀伤靶细胞能力的白细胞。2.根据权利要求1所述的方法，其中在不存在T辅助细胞的情况下使所述白细胞与所述PTP1B抑制剂接触。3.根据权利要求1或2所述的方法，其中使所述白细胞与所述PTP1B抑制剂离体接触。4.一种用于制备表现出细胞毒性T细胞的至少一种特性的离体T细胞群的方法，其包括在PTP1B抑制剂的存在下培养T细胞。5.一种用于制备表现出细胞毒性T细胞的至少一种特性的离体T细胞群的方法，其包括以下步骤：-在PTP1B抑制剂的存在下，从生物样品中培养T细胞群；-扩增培养的细胞；从而制备表现出细胞毒性特性的离体T细胞群。6.根据权利要求5所述的方法，其中所述生物样品源自患有癌症的主体或者已经被调节或改造成对癌症具有特异性。7.一种用于制备包含抗原特异性细胞毒性T细胞的组合物的离体方法，所述方法包括：-提供含有T细胞群的生物样品；-在PTP1B抑制剂的存在下，将抗原物质与所述T细胞群共培养；以及-扩增培养的细胞；从而离体制备包含抗原特异性细胞毒性T细胞的组合物。8.一种用于增加主体中表现出效应子记忆表型的T细胞水平的方法，其包括以下步骤：-在PTP1B抑制剂的存在下，从生物样品中离体培养T细胞群；-扩增培养的细胞；-将培养的细胞施用于所述主体；从而增加主体中表现出效应子记忆表型的T细胞水平。9.一种用于在主体中形成适于治疗癌症的免疫应答的方法，其包括以下步骤：-从所述主体或组织相容性供体主体获得T细胞；-在能产生表现出至少一种细胞毒性T细胞特性的T细胞群的条件下，在PTP1B抑制剂的存在下离体培养所述T细胞足够的时间，从而形成细胞毒性T细胞群，-将所述细胞毒性T细胞群施用于所述主体；从而在主体中产生适于治疗癌症的免疫应答。10.一种增强具有疾病状态的主体中CD8+T细胞介导的免疫的方法，包括：-在能产生表现出细胞毒性T细胞的至少一种特性的CD8+T细胞群的条件下，使CD8+T细胞与PTP1B抑制剂离体接触足够的时间；-将所述CD8+T细胞群施用于所述主体；从而增强主体中CD8+T细胞介导的免疫。11.一种增强具有疾病状态的主体中CD8+T细胞介导的免疫的方法，包括：-分离所述主体的CD8+T细胞群；-将编码针对PTP1B的siRNA、shRNA或gRNA的核酸分子引入分离的CD8+T细胞中，从而降
低CD8+T细胞中PTP1B的水平；以及-将所述CD8+T细胞重新引入所述主体中，从而增强主体中CD8+T细胞介导的免疫。12.一种促进主体中癌症消退的方法，其包括以下步骤：-在PTP1B抑制剂的存在下，培养从主体获得的T细胞，-将培养的T细胞施用于所述主体；从而促进癌症的消退。13.一种促进患癌主体中癌症消退的方法，其包括以下步骤：-在PTP1B抑制剂的存在下，培养对所述癌症所表达的肿瘤抗原具有特异性的CAR-T细胞，-将培养的CAR-T细胞施用于所述主体；从而促进癌症的消退。14.一种延长患癌主体的存活的方法，其包括以下步骤：-在PTP1B抑制剂的存在下，培养对所述癌症所表达的肿瘤抗原具有特异性的CAR-T细胞，-将培养的CAR-T细胞施用于所述主体；从而延长所述主体的存活。15.根据权利要求12至14所述的方法，其中所述癌症选自：Her-2阳性癌症、CD19阳性癌症、CD171阳性癌症、EGFR阳性癌症、CD22阳性癌症、CD123阳性癌症、Lewis Y阳性癌细胞、或MSLN阳性癌症、FAP阳性癌症或CD131阳性癌症。16.根据权利要求1至15中任一项所述的方法，其中所述PTP1B抑制剂是干扰RNA或小分子抑制剂。17.根据权利要求16所述的方法，其中所述小分子抑制剂是claramine或trodusquemine或其衍生物。18.根据权利要求1至15中任一项所述的方法，其中所述PTP1B抑制剂是用于直接抑制PTP1B的CRISPR/Cas9系统。19.一种用于过继免疫治疗的肿瘤抗原特异性细胞毒性T细胞群，其包含编码干扰RNA的外源核酸。20.一种分离的、纯化的或重组的细胞，其包含抗原特异性T细胞受体和编码干扰RNA的外源核酸。21.根据权利要求19所述的细胞群或权利要求20所述的分离的、纯化的或重组的细胞，其中所述干扰RNA是能够降低细胞中PTP1B水平的微小RNA、shRNA、siRNA或gRNA分子。22.根据权利要求20或21所述的分离的、纯化的或重组的细胞，其中所述T细胞受体(TCR)对癌症抗原具有特异性，并且所述细胞是CD8+T细胞。23.根据权利要求22所述的细胞，其中所述CD8+T细胞是从患有癌症的宿主分离的肿瘤浸润淋巴细胞或外周血淋巴细胞。24.一种用于增殖、富集或扩增包含CD8+T细胞的细胞组合物的方法，所述方法包括在培养基中培养细胞组合物，所述培养基包含PTP1B抑制剂，其中所述PTP1B抑制剂被提供在所述培养基中以允许在培养期间与CD8+T细胞接触。
25.根据权利要求24所述的方法，其中所述增殖、富集或扩增将导致表现出至少一种细胞毒性T细胞特性的CD8+T细胞的数量加倍。26.根据权利要求25所述的方法，其中所述扩增导致3
×
或4
×
数量的表现出至少一种细胞毒性T细胞特性的CD8+T细胞，优选至少5

【专利技术属性】
技术研发人员：T，
申请(专利权)人：彼得麦克卡勒姆癌症研究所，
类型：发明
国别省市：