一种免疫细胞储存液及其制备与应用方法技术

一种免疫细胞储存液，每1000ml储存液包括以下成份及含量：蔗糖25

【技术实现步骤摘要】
一种免疫细胞储存液及其制备与应用方法


[0001]本专利技术涉及免疫细胞储存领域，具体为一种免疫细胞储存液及其制备与应用方法。

技术介绍

[0002]免疫细胞是一类参与免疫应答或免疫应答相关的细胞，主要包括淋巴细胞群、单核细胞、巨噬细胞和树突状细胞等，统称为外周血单个核细胞。它们在人体内发挥着稳定机体健康、良态重要的作用，是人体的免疫防御、免疫稳定和免疫监视的角色。
[0003]近年来肿瘤和病毒的免疫治疗技术应用于临床，可通过自体的免疫细胞经体外刺激、培养、扩增然后回输来提高患者的免疫力。但是，人体的免疫力在20岁到达最巅峰后，免疫系统便随著年龄老化而逐渐走下坡，当40岁时，免疫力只有巅峰时的1/2；等到了70岁，更是只剩下巅峰期的1/10。在无法顺利取得健康免疫细胞的情况下，治疗效果势必大打折扣。如果预先将健康的免疫细胞储存起来，越有可能寻找到精准细胞来对抗癌症风险，同时可以抗衰老美容。
[0004]免疫细胞治疗主要来自患者自身外周血，通过分离和收集得到外周血单个核细胞。但一般说来，接受免疫细胞治疗的群体主要为肿瘤或病毒感染人群，此类人群其本身的免疫细胞机能已十分低下，分离出免疫细胞活性较低。因此人们可在自身免疫细胞活性强时，提前将健康细胞储存起来，以备将来治病同时可以抗衰老美容之需。

技术实现思路

[0005](一)解决的技术问题
[0006]针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种免疫细胞储存液及其制备与应用方法。
[0007](二)技术方案
[0008]为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种免疫细胞储存液，每1000 ml储存液包括以下成份及含量：
[0009]蔗糖25-75g；
[0010]甘油50-150ml；
[0011]白蛋白20-30g；
[0012]碳酸氢钠5-10g；
[0013]胆固醇0.2-0.4g；
[0014]丙二醇5-8％mg；
[0015]维生素E0.6-1.1g；
[0016]维生素C0.6-0.9mg；
[0017]EDTA为0.01-0.4％mg；
[0018]磷酸盐缓冲液为65％-95％ml；
[0019]亚硒酸钠为0.01％-0.5％mg；
[0020]余量为细胞培养基。
[0021]本专利技术改进有，每1000ml储存液包括以下成份及含量：
[0022]蔗糖55g；
[0023]甘油100ml；
[0024]白蛋白25g；
[0025]碳酸氢钠7g；
[0026]胆固醇0.3g；
[0027]丙二醇6％mg；
[0028]维生素E1g；
[0029]维生素C0.7mg；
[0030]EDTA为0.2％mg；
[0031]磷酸盐缓冲液为75％ml；
[0032]亚硒酸钠为0.2％mg；
[0033]余量为细胞培养基。
[0034]本专利技术改进有，所述细胞培养基为DMEM/F12培养基。
[0035]本专利技术进一步提供一种免疫细胞储存液制备方法，包括以下：
[0036]步骤1、按照权利要要求1-3任意一项中的配比配料，混合均匀，2-5℃预冷，得到原液；
[0037]步骤2、将原液在2000-3000r/min离心10-20min，然后取上清液，得到免疫细胞存储液。
[0038]本专利技术进一步提供一种免疫细胞储存液使用方法，包括以下步骤：
[0039]步骤1、将细胞用生理盐水洗涤2-3次，均匀涂布于培养皿中，置于37℃， 80rpm的摇床中，孵育10min；
[0040]步骤2、利用移液器将残留的消化液吸出，并加入权利要求1-3任意一项中的储存液，至浸润状态，置于37℃，70rpm的摇床中，孵育100min，促进细胞贴壁；
[0041]步骤3、待细胞贴壁后，再加入少量储存液，置于37℃，CO2浓度含量为 5％，湿度为60-80％的环境中进行培养，观察并记录细胞分离生长情况；
[0042]步骤4、2～3天更换一次工作培养液培养液。
[0043](三)有益效果
[0044]与现有技术相比，本专利技术提供了一种免疫细胞储存液及其制备与应用方法，具备以下有益效果：新型配比的储存液，是一种可在保存或运输中经过 48h后仍维持细胞80％以上的活率和70％以上的贴壁率的储存液，能够满足新鲜间充质干细胞的短途运输需求，并且该储存液使用成份明确的临床药品，对人体安全，恢复至室温可直接进行注射，极大方便了间充质干细胞制剂短途运输后的临床应用。
具体实施方式
[0045]下面将结合本专利技术实施例中，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施
例，都属于本专利技术保护的范围。
[0046]实施例1
[0047]本专利技术提供一种免疫细胞储存液，每1000ml储存液包括以下成份及含量：
[0048]蔗糖25g；
[0049]甘油50ml；
[0050]白蛋白20g；
[0051]碳酸氢钠5g；
[0052]胆固醇0.2g；
[0053]丙二醇5％mg；
[0054]维生素E0.6g；
[0055]维生素C0.6mg；
[0056]EDTA为0.01％mg；
[0057]磷酸盐缓冲液为65％ml；
[0058]亚硒酸钠为0.01％mg；
[0059]余量为细胞培养基。
[0060]实施例2
[0061]本专利技术提供一种免疫细胞储存液，每1000ml储存液包括以下成份及含量：
[0062]蔗糖55g；
[0063]甘油100ml；
[0064]白蛋白25g；
[0065]碳酸氢钠7g；
[0066]胆固醇0.3g；
[0067]丙二醇6％mg；
[0068]维生素E1g；
[0069]维生素C0.7mg；
[0070]EDTA为0.2％mg；
[0071]磷酸盐缓冲液为75％ml；
[0072]亚硒酸钠为0.2％mg；
[0073]余量为细胞培养基。
[0074]实施例3
[0075]本专利技术提供一种免疫细胞储存液，每1000ml储存液包括以下成份及含量：
[0076]蔗糖75g；
[0077]甘油150ml；
[0078]白蛋白30g；
[0079]碳酸氢钠10g；
[0080]胆固醇0.4g；
[0081]丙二醇8％mg；
[0082]维生素E1.1g；
[0083]维生素C0.9mg；
[0084]EDTA为0.4％mg；
[008本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种免疫细胞储存液，其特征在于：每1000ml储存液包括以下成份及含量：蔗糖25-75g；甘油50-150ml；白蛋白20-30g；碳酸氢钠5-10g；胆固醇0.2-0.4g；丙二醇5-8％mg；维生素E0.6-1.1g；维生素C0.6-0.9mg；EDTA为0.01-0.4％mg；磷酸盐缓冲液为65％-95％ml；亚硒酸钠为0.01％-0.5％mg；余量为细胞培养基。2.根据权利要求1所述的免疫细胞储存液，其特征在于：每1000ml储存液包括以下成份及含量：蔗糖55g；甘油100ml；白蛋白25g；碳酸氢钠7g；胆固醇0.3g；丙二醇6％mg；维生素E1g；维生素C0.7mg；EDTA为0.2％mg；磷酸盐缓冲液为75％ml；亚硒酸钠为0.2％mg；余量为细胞培养基。3.根据权利要求1所述的免疫细胞储存液，其特征在于：所述细胞培养基为DMEM/F12培...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘俊年，刘成龙，王丹，李静，管元宁，王艺霏，
申请(专利权)人：青岛中德华大细胞科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：