一种规模猪场非洲猪瘟病毒监测与清除方法技术

本发明专利技术公开了一种规模猪场非洲猪瘟病毒监测与清除方法，包括猪场外环境的监测、猪场内环境的监测、猪只的监测、样品检测、病毒清除等步骤，通过对猪场关键控制点、异常猪只、异常猪群制定完善的监测方案，运用快速病原检测技术，实时掌握猪场病毒感染情况，结合非洲猪瘟病毒定点清除技术，以便可以有效防控猪场养殖过程中发生非洲猪瘟。过程中发生非洲猪瘟。过程中发生非洲猪瘟。

【技术实现步骤摘要】
一种规模猪场非洲猪瘟病毒监测与清除方法


[0001]本专利技术涉及非洲猪瘟防治
，具体是一种规模猪场非洲猪瘟病毒监测与清除方法。

技术介绍

[0002]非洲猪瘟（简称ASF）是由非洲猪瘟病毒（简称ASFV）感染家猪和各种野猪而引起的一种急性、出血性、烈性传染病。世界动物卫生组织将其列为法定报告动物疫病，该病也是我国重点防范的一类动物疫情。非洲猪瘟发病过程短，最急性和急性感染死亡率高达100%，临床表现为发热，心跳加快，呼吸困难，部分咳嗽，眼、鼻有浆液性或粘液性脓性分泌物，皮肤发绀，淋巴结、肾、胃肠粘膜明显出血。非洲猪瘟与猪瘟的其他出血性疾病的症状和病变都很相似，他们的亚急性型和慢性型在生产现场实际上是不能区别的，因而必须用实验室方法才能鉴别。
[0003]ASFV可经过口和上呼吸道系统进入猪体，在鼻咽部或是扁桃体发生感染，病毒迅速蔓延到下颌淋巴结，通过淋巴和血液遍布全身。猪、康复猪和隐性感染猪为主要传染源。病毒分布于急性型病猪的各种组织、体液、分泌物、排泄物和精液，尤其从鼻咽部排毒。存活猪几个月内仍保持感染性，不断排毒。因为隐性带毒猪、康复猪终生带毒，病猪体内特异性抗体积蓄，故病毒量不易被检出。
[0004]2007年以来，非洲猪瘟在全球多个国家发生、扩散、流行。我国是养猪及猪肉消费大国，生猪出栏量、存栏量以及猪肉消费量均位于全球首位，每年种猪及猪肉制品进口总量巨大，与多个国家贸易频繁。因此，非洲猪瘟带来的直接以及间接损失将不可估量。
[0005]非洲猪瘟目前尚无有效的疫苗和药物用于防治，通过对猪场关键控制点、异常猪只、异常猪群制定完善的监测方案，运用快速病原检测技术，实时掌握猪场病毒感染情况，结合非洲猪瘟病毒定点清除技术，是防控非洲猪瘟行之有效的方法。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的是提供一种规模猪场非洲猪瘟病毒监测与清除方法，通过对猪场关键控制点、异常猪只、异常猪群制定完善的监测方案，运用快速病原检测技术，实时掌握猪场病毒感染情况，结合非洲猪瘟病毒定点清除技术，以便可以有效防控猪场养殖过程中发生非洲猪瘟。
[0007]本专利技术通过以下技术方案实现：一种规模猪场非洲猪瘟病毒监测与清除方法，包括以下步骤：步骤一、猪场外环境的监测：分别对进场人员、投入物品、来往车辆以及周边环境进行监测，对同一区域的样品，不超5个样品进行合样混检，具体如下：（1）进场人员：视频监控下采样，用5根以上棉签擦拭口、鼻、手指甲、手、头发、衣服裤子、鞋子等样品，放入采样管中；（2）投入物品：对于每批固体原料，采集8～12个点，包括车头、车尾、车中间各采3～4个
样，每个点采集1kg左右，合计采集10kg/批；对于液体原料，用干净的瓶子采集50ml以上的液体，2～8℃保存送检；对于包装盒，用沾有生理盐水的纱布采集包装盒表面，随机采集70%包装盒样品；（3）来往车辆：驾驶室、车厢内侧、车厢车顶、门面内侧、不同侧面链接缝隙、车轮、挡泥板、油箱，用“了”字形采样工具或消毒后夹纱布的拖把进行全方位拖拭采样；（4）周边环境：对车间每层楼进行采样，以及原料仓、成品仓、预混仓、五金仓、车棚、车辆经过的地面、男女洗澡房、卸料口进行拖拭采样送检；具体地，所述步骤一中猪场外环境的监测频率至少为1次/周。
[0008]步骤二、猪场内环境的监测：使用“了”字形采样工具或消毒后夹纱布的拖把进行全方位拖拭采样，对同一区域的样品，不超过5个样品进行合样混检；具体地，所述步骤二中猪场内环境的采样点包括：猪场生活区公共环境、空栏、死猪台、装猪台、转猪通道、走廊、熏蒸房隔离凳、更换外来衣服及鞋子的过渡间、换上过渡服及鞋子的洗澡前区域。
[0009]步骤三、猪只的监测：每日检查是否出现异常猪只，若发现猪场出现异常猪只，则启动全群采样方案，采集范围包括口腔液、鼻腔、饮水器/料槽及地面，100%料槽边缘送检；所述步骤三中异常猪只的表现包括：发烧、不吃料、流产、身上发红发绀、血性粪便、凝血不良、精神差。
[0010]具体地，所述步骤三中，全群采样方案遵循以下原则：采样人员禁止跨舍/栋采样，如不得已需重新洗澡换衣服后才能进入下一栋采样；先采正常猪只最后再采异常猪只；当栋采样结束后，10%次氯酸钠1:0.5稀释消毒舍内公共道路；全程拍摄视频监督采样过程。
[0011]优选地，全群采样方案的具体方法包括以下步骤：（1）监督采样前准备工作：提前准备好视频拍摄工具、采样物资以及每一栋猪舍准备好人员进入的物资；提前准备好视频拍摄工具，包括内存卡、视频拍摄器、移动充电宝、数据线等；每一栋猪舍准备好人员进入的物资，包括一次性手套、鞋套、防护服、防护帽等；准备足够的采样物资，包括采样杆、棉绳、棉签、生理盐水、记号笔、装好1ml盐水的EP管、纱布、火焰消毒工具及其他在采样工作中使用到的工具。
[0012]（2）定位栏/产床采样：定位栏/产床每头猪使用一个棉拭子先采集猪只口腔液，再采集猪只的鼻腔液，一根棉拭子采集猪只口腔能接触到的地方，栏架、水槽、饮水器、饮水，两根棉签都放入一个提前放有1～2ml生理盐水的EP管中；共用一条水槽的猪只样品放入一个袋子中包装好，样品名称标明猪场简称-日期-栏号-耳号；采集口腔液时，棉拭子放入猪只口腔中，待猪只啃咬3～4秒钟后取出，或者来回在猪只的口腔中来回刮蹭2～3次取出；采集鼻腔液时，用棉签伸入猪鼻腔约2～3厘米，下压猪鼻采集鼻液；采集时需动作轻柔，避免死用力猛插，造成猪只损伤或害怕影响下次样品采集；采样先采正常猪只最后再采异常猪只；采集定位栏中的猪只必须要采集1头猪就更换一副新的长臂手套，每采完一个水槽换1次鞋套；采集产床中的猪只必须要采集1头猪就更换一副新的长臂手套。
[0013]（3）大栏采样：
①
采样前先用生理盐水湿润纱布备用；
②
采样前将“了”字形采样工具的采样勾先进行彻底的火焰消毒；
③
用纱布将消毒好的采样钩来回绕三圈，然后使用灭菌的尼龙扎带绑好纱布；绑纱布及缠绕纱布操作时，注意手不要触碰采样钩；
④
采样钩先在饮水器上来回擦拭几次，然后在栏舍的地板上来回拖拭，100%覆盖栏舍的全部面积；
⑤
再取一个干净的湿润纱布，在该栏舍的栏杆或门口（猪咬到的地方）100%擦拭采样；提前将棉绳绑在大栏的栏杆上，采集猪只的唾液；（4）将采集挤压出的液体装入采样管中，并详细标识好猪场、栋舍、栏位、耳号等信息；大栏的相邻两个栏的样品统一收集，放入同一个采样管。
[0014]采集大栏样品必须要采集一栏就更换一副新的手套（如有上到栏舍墙体需更换鞋套）。采样先采正常猪只最后再采异常猪只；每一栋样品采集完成后，及时进行走道等可能污染的地方进行消毒处理。
[0015]步骤四、样品检测：将步骤一至三中采集的样品抽提核酸，并检测其是否携带非洲猪瘟病毒；检测呈阴性代表无非洲猪瘟病毒，检测呈阳性代表携带非洲猪瘟病毒；具体地，所述步骤四中样品检测方法为：采用Thermofisher 的KingFisher Flex 96孔核本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种规模猪场非洲猪瘟病毒监测与清除方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一、猪场外环境的监测：分别对进场人员、投入物品、来往车辆以及周边环境进行监测，对同一区域的样品，不超5个样品进行合样混检，具体如下：（1）进场人员：视频监控下采样，用5根以上棉签擦拭口、鼻、手指甲、手、头发、衣服裤子、鞋子等样品，放入采样管中；（2）投入物品：对于每批固体原料，采集8～12个点，包括车头、车尾、车中间各采3～4个样；对于液体原料，用干净的瓶子采集液体，2～8℃保存送检；对于包装盒，用沾有生理盐水的纱布采集包装盒表面，随机采集70%包装盒样品；（3）来往车辆：驾驶室、车厢内侧、车厢车顶、门面内侧、不同侧面链接缝隙、车轮、挡泥板、油箱，用“了”字形采样工具或消毒后夹纱布的拖把进行全方位拖拭采样；（4）周边环境：对车间每层楼进行采样，以及原料仓、成品仓、预混仓、五金仓、车棚、车辆经过的地面、男女洗澡房、卸料口进行拖拭采样送检；步骤二、猪场内环境的监测：使用“了”字形采样工具或消毒后夹纱布的拖把进行全方位拖拭采样，对同一区域的样品，不超过5个样品进行合样混检；步骤三、猪只的监测：每日检查是否出现异常猪只，若发现猪场出现异常猪只，则启动全群采样方案，采集范围包括口腔液、鼻腔、饮水器/料槽及地面，100%料槽边缘送检；步骤四、样品检测：将步骤一至三中采集的样品抽提核酸，并检测其是否携带非洲猪瘟病毒；检测呈阴性代表无非洲猪瘟病毒，检测呈阳性代表携带非洲猪瘟病毒；步骤五、病毒清除： 执行“全群检测、精准扑杀、配对复检、清除病原”的原则；（1）发现异常猪只马上采样，必须当天检测出结果；若检测阳性的猪只当天隔离淘汰，并且当天停产，全群检测，当天出检测结果；（2）死猪用14丝薄膜袋装好，两端扎紧密封，避免污染环境；检出阳性猪4小时内离场无害化处理，不能做到离场的集中下风口、相对猪立处隔离，不允许隔夜处理，淘汰过程道路全程封闭，前后彻底消毒；（3）离场后空栏舍用5%氢氧化钠溶液喷洒猪粪及地面，2小时后用12丝袋装好猪粪运走，加石灰后深埋；地面用水冲洗干净后烘干地面，喷洒5～7%次氯酸钠，保持60分钟以上；（4）第一次全检阴性后全面消毒净化环境，后面每次采样间隔3～5天，间隔期间异常猪检测不应该检出非洲猪瘟病毒阳性，连续3次全群检测全部阴性即可判定为阴性，表示净化成功。2.根据权利要求1所述的规模猪场非洲猪瘟病毒监测与清除方法，其特征在于：所述步骤一中猪场外环境的监测频率至少为1次/周。3.根据权利要求1所述的规模猪场非洲猪瘟病毒监测与清除方法，其特征在于：所述步骤二中猪场内环境的采样点包括：猪场生活区公共环境、空栏、死猪台、装猪台、转猪通道、走廊、熏蒸房隔离凳、更换外来衣服及鞋子的...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁龙华，覃燕灵，吴志金，
申请(专利权)人：广西农垦永新畜牧集团有限公司良圻原种猪场，
类型：发明
国别省市：