【技术实现步骤摘要】
IHHNV病毒LAMP-CRISPR等温检测用的核酸序列组合、试剂盒及检测方法
[0001]本专利技术涉及海洋水产养殖业的检测
,尤其涉及一种IHHNV病毒LAMP-CRISPR等温检测用的核酸序列组合、试剂盒及检测方法。
技术介绍
[0002]对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(Infectious hypodermal and hematopoietic necrosis virus,IHHNV)属于细小病毒科,病毒粒子直径约20nm左右,是无囊膜二十面体,内含单链DNA,该病毒能够感染外胚层组织,如鳃、表皮、前后肠上皮细胞、神经索和神经节,以及中胚层器官等部位,在宿主细胞核内形成包涵体。IHHNV可感染世界各地的养殖对虾,感染该病毒的虾苗会出现急性和慢性感染病症:(1)急性感染IHHNV的对虾最初表现为摄食明显减少、游动异常,病虾缓慢浮游至水面,静止不动,继而沉到池底,停止摄食和游动,一段时间后又上浮,一系列动作在几小时内不断重复,直至死亡,死亡率能高达90%;(2)慢性感染症状,表现为生长迟缓、畸形,出现慢性感染 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种IHHNV病毒LAMP-CRISPR等温检测用的核酸序列组合,包括用于LAMP检测的引物组、crRNA和探针;其中,引物组为:IHHNV1-B3:GTGTCTGTAAATGTGAGAGTC;IHHNV1-F3:TCTATGGTCTAAAGAGCAGC;IHHNV1-BIP:GAAAGTACATAAAGCAGGCGTAGTTTTTTCAAATGATGTGCCTCCT;IHHNV1-FIP:CATCCGTAGGTCTTCATCATTGATTTTTTGACAGTTCAGCAACAGAAAC;IHHNV1-LB:GATGCACTCGATGGTACCC;crRNA为:GUCUAGAGGACAGAAUUUUUCAACGGGUGUGCCAAUGGCACUUUCCAGGUGGCAAAGCCCGUUGAGCUUCUCAAAUCUGAGAAGUGGCACUAUCGUUGUGUUUCUGUUGC;探针为:Fam-TTATT-Bhq1。2.如权利要求1所述的IHHNV病毒LAMP-CRISPR等温检测用的核酸序列组合在对IHHNV病毒进行LAMP-CRISPR等温检测中的应用。3.一种IHHNV病毒LAMP-CRISPR等温检测用的试剂盒,其特征在于,包括如权利要求1所述的核酸序列组合。4.如权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,还包括阳性对照和阴性对照,所述阳性对照为包含如SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的表达载体,所述阴性对照为无核酸的超纯水。5.如权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,还包括用于LAMP等温扩增反应的Bst DNA聚合酶、dNTP、LAMP反应缓冲液、MgSO4,以及用于CRISPR等温检测反应的Aapcas12b酶、RNA酶抑制剂、CRISPR反应缓冲液。6.如权利要求3~5任一项所述的IHHNV病毒LAMP-CRISPR等温检测用的试剂盒在对IHHNV病毒进...
【专利技术属性】
技术研发人员:黄俊,张徐俞,杨稳,付媛媛,俞晓平,郑晓叶,朱凝瑜,骆志成,樊伟东,
申请(专利权)人:浙江科技学院,
类型:发明
国别省市:
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