珊瑚菜的内参基因PP2A及其筛选方法与应用技术

本发明专利技术公开了珊瑚菜的内参基因及其筛选方法与应用，属于植物基因工程技术领域。具体涉及珊瑚菜的内参基因及其引物，所述内参基因为PP2A；并提供了一种珊瑚菜内参基因的实时荧光定量PCR筛选方法，填补了珊瑚菜研究领域中缺少合适的、通用的内参基因的空白。通用的内参基因的空白。通用的内参基因的空白。

【技术实现步骤摘要】
珊瑚菜的内参基因PP2A及其筛选方法与应用
[0001]本申请为分案申请；
[0002]原申请申请日：2019-07-22；
[0003]申请号：CN201910659220.8；
[0004]专利技术创造名称：珊瑚菜的内参基因及其筛选方法与应用；


[0005]本专利技术属于植物基因工程
，更具体地说，涉及珊瑚菜的内参基因、及其筛选方法与应用。

技术介绍

[0006]珊瑚菜，伞形科多年生，是我国传统中药材北沙参的基源植物。北沙参与人参、玄参、丹参、党参并 称为五参，有养阴清肺，益胃生津功效，主治肺热阴虚燥咳，胃燥咽干口渴等症，临床和保健中常用，其 地上部嫩茎叶并可作为蔬菜食用，经济价值较大。
[0007]珊瑚菜自然生长于沿海沙滩地带，在我国沿海省份，如辽宁、江苏、山东、浙江、福建、广东以及海 南，历史上均为珊瑚菜的道地药材产区，是北沙参商品药材的重要来源地。然而由于沿海开发等原因，珊 瑚菜的沿海道地产区范围逐渐缩小，甚至消失；近年来，随着我国沿海新围垦土地的开发利用，为珊瑚菜 的沿海道地产区规模的恢本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.珊瑚菜的内参基因，其特征在于：所述内参基因为PP2A；所述PP2A的核苷酸序列为SEQ ID NO.1。2.用于扩增权利要求1所述内参基因的PCR引物。3.根据权利要求2所述的用于扩增内参基因的PCR引物，其特征在于：所述引物的扩增片段大小为100～250bp。4.根据权利要求3所述的用于扩增内参基因的PCR引物，其特征在于：所述用于扩增PP2A的引物对序列为SEQ ID NO.15/SEQ ID NO.16。5.珊瑚菜内参基因的实时荧光定量PCR筛选方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)选取分别经盐胁迫、干旱胁迫、脱落酸以及茉莉酸甲酯处理过的4种模板珊瑚菜的根部组织样品；(2)利用珊瑚菜转录组测序数据，筛选出珊瑚菜的候选内参基因；(3)以挑选出的候选内参基因序列为模板，设计实时荧光定量PCR的内参基因引物；(4)进行实时荧光定量PCR；对得到的实时荧光定量PCR数据进行统计分析，分别筛选出最优内参基因和内参基因组合。6.根据权利要求5所述的珊瑚菜内参基因的实时荧光定量PCR筛选方法，其特征在于：进行所述步骤(4)中的实时荧光定量PCR前，先通过普通PCR鉴定内参基因引物的特异性。7.根据权利要求5所述的珊瑚菜内参基因的实时荧光定量PCR筛选方法，其特征在于：所述步骤(4)中，实时荧光定量PCR扩增程序为：95℃预变性5min；95℃变性15s，60℃退火15s，72℃延伸25s，运行40个循环。8.根据权利要求5所述的珊瑚菜内参基因的实时荧光定量PCR筛选方法，其特征在于：所述步骤(4)中，通过ΔCt、GeNorm、NormFinder、BestKeeper四种统计软件，对得到的实时荧光定量PCR数据进行统计分析，分别筛选出最优内参基因和内参基因组合，然后综合分析软件RankAggreg R进行综合排名分析。9.根据权利要求5所述的珊瑚菜内参基因的实时荧光定量PCR筛选方法，其特征在于：具体步骤如下：1)材料及处理方法：选取长势一致的沙培珊瑚菜，分别利用浓度为200mM的NaCl溶液、质量浓度为20％的PEG 60...

【专利技术属性】
技术研发人员：李莉，周义峰，李乃伟，
申请(专利权)人：江苏省中国科学院植物研究所，
类型：发明
国别省市：