一种大枣药材中环磷腺苷含量的测定方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种大枣药材中环磷腺苷含量的测定方法及其应用，属于中药分析、质量鉴别及控制技术领域。基于高效液相色谱仪，检测大枣药材中环磷腺苷的含量，对大枣药材成分进行定量分析，实现对大枣药材的质量控制；本方法操作简单、分析速度快、准确且重复性好，为大枣药材中环磷腺苷等成分分析提供了科学可靠的分析方法，为完善大枣药材的质量标准奠定了基础。基础。基础。

【技术实现步骤摘要】
一种大枣药材中环磷腺苷含量的测定方法及其应用


[0001]本专利技术涉及一种中药中有效成分的测定方法及其应用，尤其涉及一种大枣药材中环磷腺苷含量的测定方法及其应用，属于中药分析、质量鉴别及控制


技术介绍

[0002]大枣药材为鼠李科植物枣Ziziphus jujuba Mill.的干燥成熟果实，为秋季果实成熟时采收、晒干。其可补中益气，养血安神。用于脾虚食少，乏力便溏，妇人脏躁。其中，大枣药材中有效成分环磷腺苷是为参与调节细胞功能的第二信使物质，其作用非常广泛，能使心肌收缩力增强，舒张平滑肌、扩张冠状动脉血管、改善肝功能、促进神经再生，促进呼吸链氧化酶的活性及改善心肌缺氧等。
[0003]目前，极少有对大枣药材中含量指标成分(特别是环磷腺苷)进行研究，比如：中国药典(2015年版)中也未规定大枣药材的含量指标成分。于2015年12月23日公开了一种公开号为CN105181862A，名称为“大枣及其提取物与制剂的质量控制方法及应用”的专利文献，其中，具体公开：通过高效液相色谱串联蒸发光散射检测器的分离分析技术，借助一测多评方法，通过计算校正因子，实现对大枣中的6个三萜类化学成分含量进行计算。其以白桦脂酸、齐墩果酸、乌苏酸、桦木酮酸、齐墩果酮酸、乌苏酮酸为对照品，采用反相Cl8色谱柱。在该专利文献中，其对照品多样，不易控制；供试品制备需要经过提取，减压蒸干，加甲醇再溶解，操作较为复杂；其检测条件需要串联蒸发光散射检测器，并需要推荐色谱柱，对设备要求较高；并且，在该专利文献中，未进行准确度、稳定性、重复性等方法学研究。

技术实现思路

[0004]本专利技术旨在解决现有技术问题，而提出了一种大枣药材中环磷腺苷含量的测定方法及其应用。在本技术方案中，基于普通的高效液相色谱仪，检测大枣药材中环磷腺苷的含量，对大枣药材成分进行定量分析，实现对大枣药材的质量控制；本方法操作简单、分析速度快、准确且重复性好，为大枣药材中环磷腺苷等成分分析提供了科学可靠的分析方法，为完善大枣药材的质量标准奠定了基础。
[0005]为了实现上述技术目的，提出如下的技术方案：
[0006]一种大枣药材中环磷腺苷含量的测定方法，包括如下步骤：
[0007]A.色谱条件与系统适用性试验
[0008]色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，柱长为250mm，内径为4.6mm，粒度为5μm；
[0009]色谱柱柱温：30℃；
[0010]流动相：甲醇-0.02mol/L磷酸二氢钾溶液，其中，甲醇与磷酸二氢钾溶液的体积比为10：90；
[0011]流动相流速：1.0mL/min；
[0012]进样量：10μL；
[0013]波长：259nm；
[0014]理论板数按环磷腺苷峰计算应不低于3000；
[0015]B.对照品溶液的制备
[0016]取环磷腺苷对照品，精密称定，加甲醇，制成每1mL含10μg的溶液，即得；
[0017]C.供试品溶液的制备
[0018]取本品粉末，过三号筛，称定1.0g，加入甲醇25mL，密塞，称定重量，超声处理(功率600W，频率40kHz)20min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
[0019]D.测定
[0020]分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，即得。
[0021]优选的，在步骤A和B中，所述甲醇浓度均为30％。
[0022]基于上述的技术方案，所述大枣药材中环磷腺苷含量的测定方法，应用于大枣药材的质量控制，进行定量分析。
[0023]采用本技术方案，带来的有益技术效果为：
[0024]1)在本专利技术中，采用普通的高效液相法，以及特定的对照品种类、供试品溶液提取以及相匹配的色谱条件，绘制标准曲线，得到环磷腺苷浓度与对应峰面积的线性关系，得到大枣药材中环磷腺苷含量，并应用于大枣药材的定量分析，实现其质量控制；
[0025]其中，选择环磷腺苷作为大枣药材的含测指标，代表性强，开展方法学研究，检测准确性、可靠性更高，也为大枣药材中环磷腺苷等成分分析提供了科学可靠的分析方法，为完善中药大枣的质量标准奠定了基础；
[0026]2)本专利技术涉及的技术方案(比如：采用普通的高效液相色谱仪)较现有技术(比如：CN105181862A中采用高效液相色谱串联蒸发光散射检测器)，简单方便，经济效应更好；
[0027]3)在本专利技术的色谱条件流动相中，磷酸二氢钾溶液中钾离子可与色谱柱中的负电中心结合，减弱色谱柱对目标检测物环磷腺苷的离子效应，保证目标检测物环磷腺苷在此条件下检测更加稳定，进而有效保证了本检测方法的稳定性，以及检测结果的准确性。
附图说明
[0028]图1为实施例4中环磷腺苷对照品紫外吸收光谱图；
[0029]图2为实施例4中不同柱温考察结果色谱图；
[0030]图3为实施例4中不同流速考察结果色谱图；
[0031]图4为实施例5中专属性实验考察结果色谱图；
[0032]图5为实施例5中对照品环磷腺苷标准曲线图。
具体实施方式
[0033]下面通过对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本专利技术的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0034]在以下实施例中，所涉及的仪器包括：
[0035]高效液相色谱仪：Waters e2698-2996型高效液相色谱仪、Agilent 1260型高效液相色谱仪；
[0036]电子天平：ME204E/02、MS205DΜ、XPE26(梅特勒-托利多仪器有限公司)；
[0037]超纯水机：细胞型1810A(上海摩勒科学仪器有限公司)；
[0038]超声波清洗器：KQ5200DB型(600W，40KHz；昆山市超声仪器有限公司)；
[0039]色谱柱：Agilent ZORBTX SB-Aq 4.6
×
250mm、ZORBTX Eclipse Plus C18 4.6
×
250mm、Agilent 5HC-C18(2)4.6
×
250mm。
[0040]在以下实施例中，所涉及的试剂包括：
[0041]甲醇(色谱纯)、乙腈(色谱纯)、磷酸(色谱纯)、水(超纯水)，其余试剂均为分析纯。
[0042]在以下实施例中，所涉及的供试品包括：
[0043]大枣药材批号：010101-1709001、010101-1805001、010101-1901001、XLS201905269、XLS201905270、XLS201905271、XLS201905272、XLS201905273、XLS201905274、XLS201905275、XLS20190527本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种大枣药材中环磷腺苷含量的测定方法，其特征在于，包括如下步骤：A．色谱条件与系统适用性试验色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，柱长为250mm，内径为4.6mm，粒度为5μm；色谱柱柱温：30℃；流动相：甲醇-0.02mol/L磷酸二氢钾溶液，其中，甲醇与磷酸二氢钾溶液的体积比为10：90；流动相流速：1.0mL/min；进样量：10μL；波长：259nm；理论板数按环磷腺苷峰计算应不低于3000；B．对照品溶液的制备取环磷腺苷对照品，精密称定，加甲醇，制成每1mL含10μg的溶液，即得；C．供试品溶液的制备取本品粉末，过三号筛，称定1.0g，加入甲...

【专利技术属性】
技术研发人员：周厚成，胡昌江，罗俊，姚丽琴，费文波，钟磊，吴琦，周维，冯健，
申请(专利权)人：四川新绿色药业科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：