包含非瘤组织的半流体的应用、及包含该半流体的疫苗和制备方法技术

本申请涉及一种包含非瘤组织的半流体的应用、包含它的疫苗、该疫苗的制备方法、抗实体肿瘤方法以及用于治疗实体肿瘤的疫苗试剂盒。肿瘤方法以及用于治疗实体肿瘤的疫苗试剂盒。

【技术实现步骤摘要】
包含非瘤组织的半流体的应用、及包含该半流体的疫苗和制备方法


[0001]本申请涉及一种包含非瘤组织的半流体的应用、包含它的疫苗、该疫苗的制备方法、抗实体肿瘤方法以及用于治疗实体肿瘤的疫苗试剂盒。

技术介绍

[0002]多种类的物质曾经被用以制作肿瘤疫苗。微生物类物质最早被应用于开发实体肿瘤疫苗。化脓性链球菌、黏质沙雷菌(William B.Coley，1891年)、卡介苗等先后被发现对某些肿瘤有疗效。活的、减毒或基因修饰的专性或兼性厌氧细菌可以选择性地在肿瘤内繁殖(可用作定植载体)，也可以释放某些抗原激活机体免疫系统。感染流感病毒或注射狂犬病疫苗后也出现肿瘤病情明显缓解的案例。此外，活的、减毒或基因修饰的溶瘤病毒可以通过两种方式(选择性肿瘤细胞杀伤和抗肿瘤免疫)抑瘤。另一方面，疟原虫、弓形虫等也被发现可抗肿瘤生长。某些寄生虫和肿瘤具有相似的抗原表位(例如某些寄生虫细胞表面的黏蛋白型O-聚糖)。某些寄生虫亚单位(例如寄生虫肽段GK1)可启动有益的免疫应答。可是，微生物类疫苗要么显示出一定的有效性却有较高安全性风险，要么显示出较高安全性却有效性不高。
[0003]包含特异性肿瘤抗原的疫苗更引入关注。首先出现的是全肿瘤细胞疫苗。肿瘤细胞经过消除致瘤性的处理后，其免疫原性仍然能显示出一定的抗肿瘤疗效。通过添加佐剂或通过引入新的基因还可以使其更具抗原性。全细胞疫苗表达较全面，但成分复杂、特异性仍然不强。研究人员于是寄望于在肿瘤细胞中筛选出个别有用无害的抗原部位(例如某些胞外体、表面蛋白质、核酸、多肽、等)制成亚单位疫苗。所谓的肿瘤特异性抗原和肿瘤相关抗原的发现，曾经让人们欢欣鼓舞。然而，尽管其成分较单一、特异性较强、安全性较高，其免疫原性却较低下。随着当代基因技术的发展，肿瘤新抗原(Neoantigen)再次让人们为之一振。肿瘤新抗原是指由癌细胞基因突变所导致的、正常细胞所没有的、且能被免疫细胞所识别的一类蛋白/表位多肽。然而，多肽序列一般由几个或数十个氨基酸组成，分子量较小，化学结构简单，安全性虽高免疫原性却较弱，仍然难以诱发足够强度的免疫反应，仅有不多的成功案例被报道。
[0004]肿瘤抗原的靶向性和微生物减毒活抗原(例如病毒和细菌)强有力的免疫原性的结合，衍生出载体疫苗，例如荷载肿瘤抗原的重组病毒。而在体外将树突状细胞(DC)负载肿瘤抗原，有可能针对患者DC功能缺陷加强抗肿瘤免疫反应，衍生出DC疫苗，例如DC与肿瘤细胞融合疫苗、肿瘤抗原肽或蛋白提取物致敏的DC疫苗、TAA或TSA基因修饰的DC疫苗、肿瘤细胞胞外体致敏的DC疫苗，等等。然而，这些肿瘤抗原衍生疫苗仍然未显示出针对大多数实体肿瘤的有效性。
[0005]此外，人们发现，在异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后，异体淋巴细胞在受者体内迁移、增殖，进而以受者靶细胞为目标发动细胞毒攻击，介导移植物抗宿主病(GVHD)，同时还介导移植物抗白血病反应(CVL)。在其他非血液系统恶性肿瘤中，也有GVHD和类CVL
反应(延伸称之为移植物抗肿瘤反应(GVT))。然而，进一步的研究发现，包含异基因淋巴细胞的流体中的异基因淋巴细胞抗原的优势抗原性为GVHD，仅显示出较低的GVT反应。实体肿瘤往往需要强大很多的GVT反应，但GVT反应的增加也会增加患者GVHD的发病率和死亡率。这类异基因淋巴细胞疫苗于是将其优势适应症局限于尽可能接近血液系统肿瘤的实体肿瘤，例如应用于尽可能小的瘤体、或在小鼠接种移植瘤后3-5天内即尽快给药。
[0006]尽管微生物(抗原)疫苗、肿瘤细胞(抗原)疫苗、肿瘤细胞亚单位(抗原)疫苗、肿瘤新(抗原)疫苗、异基因淋巴细胞(抗原)疫苗繁花似锦，但从临床角度看实体肿瘤疫苗的开发似乎进步不大。问题仍在于如何才能开发出这样一种实体肿瘤疫苗抗原，其具有临床有效所需的(抗肿瘤)抗原性、同时不需抗原性(例如GVHD)又在临床安全的允许范围内？因而，仍然需要开发新的免疫策略，以满足现有技术尚不能满足的急需临床需求。

技术实现思路

[0007]本申请的目的在于提供一种在组成、性质和形态上类似于瘤体组织，却更容易被免疫识别和响应，从而介导针对瘤体组织的有效免疫效应、而不需抗原性(例如GVHD)又最小化的实体肿瘤疫苗抗原，以及包含该抗原的疫苗。
[0008]本申请的一个方面提供包含非瘤组织的半流体作为抗原在制备实体肿瘤疫苗中的应用。
[0009]本申请的另一个方面提供一种用于抗实体肿瘤的疫苗，其包含作为抗原的包含非瘤组织的半流体。
[0010]本申请的又一个方面提供一种治疗或者抑制实体肿瘤的方法，其包括向有此需要的个体局部施用、优选为通过局部注射施用包含作为抗原的包含非瘤组织的半流体的疫苗。
[0011]本申请的再一个方面提供一种制备抗实体肿瘤的疫苗的方法，其包括以下步骤：
[0012]a.提供非瘤组织；
[0013]b.对所述非瘤组织进行半流体化处理得到包含所述非瘤组织的半流体，其中所述半流体化选自以下之一种或多种：液体组织的粘稠化、液体组织的凝固化、非液组织的机械破碎、液体组织凝固物的机械破碎、非液组织的软化。
[0014]本申请的再一个方面提供一种根据上述方法制备的疫苗。
[0015]根据本专利技术包含非瘤组织的半流体作为抗原具有以下优点：与现有技术的微生物抗原相比，更高的针对实体肿瘤瘤体的免疫原性，更低的生物安全性风险；与现有技术的肿瘤细胞及其亚单位抗原相比，更高的针对实体肿瘤瘤体的免疫原性，免疫原性的更宽的实体肿瘤适应症谱；与现有技术的肿瘤新抗原相比，更高的针对实体肿瘤瘤体的免疫原性，更高的易获得性；以及与现有技术的异基因淋巴细胞抗原相比，更高的针对实体肿瘤瘤体(尤其是较大瘤体)的免疫原性，更低的应用量，更低的不需要的免疫活性(例如GVHD)。
[0016]根据本专利技术的包含非瘤组织的半流体作为抗原的疫苗具有以下优点：与现有技术的微生物疫苗相比，更高的实体肿瘤抑瘤有效性，更高的生物安全性，更宽的实体肿瘤适应症谱；与现有技术的肿瘤细胞亚单位疫苗相比，更高的实体肿瘤抑瘤有效性，更宽的实体肿瘤适应症谱；与现有技术的肿瘤新抗原疫苗相比，更高的实体肿瘤抑瘤有效性，更快捷方便的获得性；以及与现有技术的异基因淋巴细胞疫苗相比，更高的实体肿瘤抑瘤(尤其是较大
瘤体)有效性，更低的移植物风险(例如GVHD)，更宽的实体肿瘤适应症谱。另外，在根据本专利技术的疫苗包含抗实体肿瘤的活性成分时，能够表现出更好的协同作用。
[0017]根据本专利技术的抗实体肿瘤方案更容易和其它相关治疗方案联合进行。此外，该应用和该疫苗制备可控、成本便宜，而该治疗方案简便易行，特别有助于使难以承受高额费用的广大人群也享受到安全、有效治疗。
具体实施方式
[0018]在一个抗实体肿瘤的动物试验中，本专利技术的专利技术人将一种包含非瘤组织的半流体用作一种实体肿瘤全细胞疫苗的阴性对照物时，发现了前者有不低于后者的免疫抑瘤性。
[0019]根据本申请公开的一个方面，其提供包含非瘤组织或由非瘤组织形成的半流体本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.包含非瘤组织或由非瘤组织形成的半流体作为抗原在制备用于治疗或抑制实体肿瘤的疫苗中的应用。2.一种用于治疗或抑制实体肿瘤的疫苗，其包含作为抗原的包含非瘤组织或由非瘤组织形成的半流体。3.根据权利要求1或2的应用和疫苗，其中所述非瘤组织为选自源自结缔组织和/或结缔组织之外的半固体组织的以下组之一种或多种：天然组织、天然组织组分、工程组织，且其中所述半流体的组成和形态使得其在用药处形成半流体结节。4.根据权利要求1-3之一的应用和疫苗，其中所述非瘤组织为选自远离天然状态的、优选为经过严重损伤的组织，其中所述远离天然状态包括粘稠化；所述严重损伤包括以下之一种或多种损伤：机械破碎、凝固化、超声损伤、热损伤、冻融损伤、照射损伤、化学损伤。5.根据权利要求1-3之一的应用和疫苗，其中所述半流体选自以下组之一种或多种：包含液体组织的半流体粘稠物、包含液体组织的半流体凝固物、包含非液组织的破碎物、包含液体组织凝固物的破碎物、包含非液组织的软化物。6.根据权利要求1-3之一的应用和疫苗，其中所述非瘤组织的细胞比容为>22％(或细胞浓度为>5.6
×
109个细胞/ml)、优选为33％-86％(或细胞...

【专利技术属性】
技术研发人员：邹方霖，邹礼常，王建霞，王艺羲，
申请(专利权)人：成都夸常奥普医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：