一种鉴别掺假蜂蜜的方法技术

本发明专利技术涉及一种鉴别掺假蜂蜜的方法，所述方法包括如下步骤：(1)样品预处理；(2)使用离子色谱

【技术实现步骤摘要】
一种鉴别掺假蜂蜜的方法


[0001]本专利技术属于生物化学
，具体的，涉及一种鉴别掺假蜂蜜的方法。

技术介绍

[0002]D-阿洛酮糖(D-psicose/D-allulose)又名D-核糖-2-己酮糖，化学式为C6H12O6，相对分子质量180.156，CAS号551-68-8，IUPAC名为(3R
’
4R
’
5R)-1
’3’4’5’
6-pentahydroxyhexan-2-one，熔点109℃，沸点551.7
±
50.0℃，易溶于水、甲醇、乙醇等。
[0003]D-阿洛酮糖是一种天然存在的稀有单糖，是D-果糖C-3位的差向异构体，存在于小麦、鼠刺属植物、压榨过的甘蔗渣、甜菜糖蜜等物质中，在商品D-葡萄糖、D-果糖中也有少量存在。D-阿洛酮糖在食品与医疗方面具有巨大应用潜力。食品方面，D-阿洛酮糖作为新型甜味剂具有蔗糖70％甜度，却只有蔗糖热量的0.3％，能够使食品保持甜度的同时改善食品的质构、风味和口感，还能有效减少能量摄入；医疗方面，D-阿洛酮糖具有抑制食欲、调控血糖、保护神经、保护先天免疫系统等生理功能。D-阿洛酮糖已于2014年通过美国FDA安全认证，于2015年获得了GRAS认证。
[0004]天然蜂蜜中一般不含有D-阿洛酮糖，而在某些糖浆的工艺生产中，D-阿洛酮糖会成为加工副产物，近年来市场上存在将糖浆掺入蜂蜜来冒充天然蜂蜜的情况，因而采用阿洛酮糖作为靶标检测蜂蜜中的糖浆掺假成为一种有潜力的研究思路。/>[0005]目前针对D-阿洛酮糖的检测方法研究较少，已有旋光法和液相色谱-蒸发光检测器法，旋光法根据在同一温度条件下D-阿洛酮糖浓度与旋光值具有线性关系而对其含量进行检测，该方法简便快速但应用范围狭窄，灵敏度低；液相色谱-蒸发光检测器法基于样品颗粒对光的散射与质量呈指数关系的特点，应用于D-阿洛酮糖的检测，该方法相对于旋光法灵敏度、精确度较高，但该方法有机试剂用量大，且前处理较为繁琐。
[0006]目前尚未见采用离子色谱-脉冲安培检测法对D-阿洛酮糖含量进行检测的报道。

技术实现思路

[0007]本专利技术首先涉及一种通过检测D-阿洛酮糖来鉴定蜂蜜掺假的方法，所述方法包括如下步骤：
[0008](1)样品预处理；
[0009](2)使用离子色谱-脉冲安培检测器测定样品中是否含有D-阿洛酮糖；
[0010]所述的蜂蜜掺假指在蜂蜜中掺有含D-阿洛酮糖的糖浆；
[0011]步骤(1)的具体方法为：
[0012]称取蜂蜜样品1～2g于烧杯中，加适量去离子水溶解混匀，转移至容量瓶中，使用去离子水定容并混匀，并过0.22μm滤膜除菌后，按照500-2000倍的稀释倍数进行稀释，稀释液待测；优选的，稀释倍数为2000倍，所述的稀释倍数为：1克蜂蜜样品对应的水的体积量，水的体积单位为毫升。
[0013]步骤(2)的具体方法为：
[0014]将待测液用离子色谱-脉冲安培检测法对D-阿洛酮糖进行分离和检测，利用保留时间对样品中D-阿洛酮糖进行定性，使用外标法通过外标标准曲线法对样品中D-阿洛酮糖进行定量；
[0015]所述离子色谱-脉冲安培检测器的具体检测条件为：
[0016]1)色谱柱：Dionex Carbopac PA10(250mm
×
4mm)；含保护柱：Carbopac PA10 Guars(50mm
×
4mm)
[0017]2)工作电极：Gold
[0018]3)参比电极：Ag/AgCl
[0019]4)工作电位：糖标准四电位，具体如下：
[0020][0021]5)流速：1.0mL/min
[0022]6)柱温：30℃
[0023]7)进样量：25μL
[0024]8)洗脱程序：梯度洗脱程序；具体如下：
[0025][0026]所述的外标标准曲线的制备方法为：
[0027]1)使用去离子水配置D-阿洛酮糖标准工作溶液，浓度梯度分别为0mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L、0.2mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L、2.0mg/L；
[0028]2)上述标准溶液分别用于离子色谱-脉冲安培检测器检测，以标准溶液中D-阿洛酮糖浓度为横坐标，以脉冲安培检测器上的响应值峰面积为纵坐标绘制标准工作曲线。
[0029]所述外标法为：
[0030]1)将步骤(2)中获得的待测溶液使用离子色谱-脉冲安培检测器检测，得到样品中D-阿洛酮糖峰面积；
[0031]2)采用所述外标标准曲线进行定量，计算得出样品中D-阿洛酮糖的含量。
[0032]本专利技术还涉及D-阿洛酮糖在制备检测掺假蜂蜜的试剂或试剂盒中的应用。
[0033]本专利技术还涉及D-阿洛酮糖为标准对照品在检测掺假蜂蜜中的应用。
[0034]本专利技术的有益效果在于：
[0035](一)本专利技术检测结果准确，重复性性好，检出限低，为200mg/kg，线性范围宽在0.05～2.00mg/L之间，线性相关系数较好(R2＝0.9998)。
[0036](二)本专利技术前处理方法简单快速，所测D-阿洛酮糖能与高浓度葡萄糖、果糖达到基线分离效果，方法适用性好。
[0037](三)目前关于的检测技术还较为缺乏，本专利技术首次采用离子色谱-脉冲安培检测器技术测定D-阿洛酮糖含量，操作简便快速，适用于常规检测应用，为D-阿洛酮糖的检测提
供技术支撑。
附图说明
[0038]图1、洗脱液NaOH浓度对D-阿洛酮糖与果糖、葡萄糖分离的影响。其中横坐标为保留时间(单位为：min)，纵坐标为糖类化合物在脉冲安培检测器上的响应值(单位为：nC)。
[0039]图2、稀释因子对蜂蜜样品中D-阿洛酮糖与果糖、葡萄糖分离的影响。其中横坐标为保留时间(单位为：min)，纵坐标为糖类化合物在脉冲安培检测器上的响应值(单位为：nC)。
[0040]图3、D-阿洛酮糖标准品与代表性阳性蜂蜜样品色谱图。其中横坐标为保留时间(单位为：min)，纵坐标为糖类化合物在脉冲安培检测器上的响应值(单位为：nC)。
[0041]图4、D-阿洛酮糖标准品的结构示意图。
具体实施方式
[0042]仪器与试剂：
[0043]ICS-5000+离子色谱仪，配有脉冲安培检测器(美国Thermo Fisher Scientific公司)；
[0044]Milli-Q IQ 7000超纯水机(美国millipoer公司)；
[0045]涡旋混匀器(美国Scientific Industries公司)；
[0046]50～52％氢氧化钠溶液(Sigma-Aldrich)；
[0047]D-阿洛酮糖标准品(上海阿拉丁公司)纯度99％，D-阿洛酮糖标准储备液浓度为100mg/L配置于去离子水中，在4℃条件下保存。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种通过检测D-阿洛酮糖来鉴定蜂蜜掺假的方法，所述方法包括如下步骤：(1)样品预处理；(2)使用离子色谱-脉冲安培检测器测定样品中是否含有D-阿洛酮糖；所述的蜂蜜掺假指在蜂蜜中掺有含D-阿洛酮糖的糖浆；步骤(1)的具体方法为：去离子水溶解蜂蜜样品后，过滤除菌后，按照500-2000的稀释倍数进行稀释；步骤(2)的具体方法为：用离子色谱-脉冲安培检测法对步骤(1)的样品中的D-阿洛酮糖进行分离和检测：1)利用保留时间对样品中D-阿洛酮糖进行定性，2)使用外标法通过外标标准曲线法对样品中D-阿洛酮糖进行定量。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述离子色谱-脉冲安培检测法的具体检测条件为：1)色谱柱：Dionex Carbopac PA10(250mm
×
4mm)；2)工作电极：Gold3)参比电极：Ag/AgCl4)工作电位为糖标准四电位，具体如下：5)流速：1.0mL/min6)柱温：30℃7)进样量...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔宗岩，张少博，黄学者，葛娜，贾光群，李学民，
申请(专利权)人：秦皇岛海关技术中心，
类型：发明
国别省市：