一种吞噬细胞嵌合抗原受体及其应用制造技术

本申请公开了一种吞噬细胞嵌合抗原受体，包括：a)胞外靶标分子结合结构域；b)胞内信号传导结构域，包括至少一个胞内激活信号传导结构域；所述胞内激活信号传导结构域的激活至少依赖于所述胞外靶标分子结合结构域与所述靶标分子的结合；所述胞内激活信号传导结构域含有具有催化功能基团的分子或片段；和c)跨膜区结构域，用于连接所述胞外靶标分子结合结构域和所述胞内信号传导结构域，并将二者固定在细胞膜上。该嵌合抗原受体结合肿瘤免疫学、合成生物学与分子细胞工程等多种手段，建立并应用基于免疫检查点信号通路PD

【技术实现步骤摘要】
一种吞噬细胞嵌合抗原受体及其应用


[0001]本申请涉及一种嵌合抗原受体，属于生物医药领域。

技术介绍

[0002]实体肿瘤有別于血液肿瘤，比如其具有复杂的动态生态系统与肿瘤微环境，涉及多种细胞之间的相互作用，如肿瘤细胞与基质细胞之间的主动相互作用。肿瘤细胞可以通过对机体适应性免疫反应和先天性免疫反应的调节来实现影响肿瘤的发展进程以及影响肿瘤对治疗的反应。炎性细胞是肿瘤生态系统的重要组成部分，其中被称为肿瘤相关巨噬细胞的一种吞噬细胞代表肿瘤微环境中最丰富的基质成分之一，因此是许多实体肿瘤中非常明显的基质靶标细胞。肿瘤相关巨噬细胞是实体瘤中为数最多的白细胞，并且在大多数人类肿瘤类型中，肿瘤相关巨噬细胞的浸润或肿瘤相关巨噬细胞相关基因标记或者表型的富集与不良预后和疾病结果高度相关。大量的肿瘤相关巨噬细胞聚集于肿瘤微环境中，通常与癌症发生后的特定病理特征密切相关，例如免疫抑制、新血管形成、浸润、转移和对治疗的不良反应等，均强烈地暗示了肿瘤相关巨噬细胞会促进肿瘤的生长。
[0003]生长中的实体肿瘤通常是来自正常组织的异常变体，在实体肿瘤组织中，增殖的细胞、凋亡的细胞和坏死的细胞共存于实体肿瘤微环境中，通常以具有低氧含量和酸性pH等环境特点为其特征，这是由肿瘤细胞独特的代谢特性和肿瘤特有的血管异常等引发导致的。这些情况再加上来自垂死细胞的危险信号的局部释放，会触发炎症反应，且一定程度上所触发的炎症反应类似组织损伤所引起的炎症反应。因此，在机体徒劳地修复肿瘤组织的尝试过程中，肿瘤相关巨噬细胞集聚于肿瘤组织中并肩负起伤口愈合和组织修复等功能，这些机制功能包括生成额外的血管、去除细胞碎片、产生营养信号、进行组织重塑和参与免疫抑制等。可见，肿瘤相关巨噬细胞引发导致的致瘤特性是依赖于肿瘤细胞、免疫细胞和基质细胞等肿瘤微环境中多种细胞之间复杂的相互作用。
[0004]作为人体免疫防御的主要分支，先天性免疫系统充当着非特异性防御的第一线，以对抗外来异物、微生物感染、垂死细胞、已死细胞、病变细胞和恶性细胞转化等。先天性免疫系统中的专业吞噬细胞包括多种不同类型白细胞，如中性粒细胞、巨噬细胞、单核细胞、肥大细胞、树突状细胞以及B细胞等，并在对抗感染和维持组织健康的免疫反应过程中起着极其重要的作用。巨噬细胞既是先天性免疫系统的组成细胞之一，又属于专业抗原呈递细胞，其依赖于种系编码的模式识别受体等细胞表面分子来快速识别响应外来异物、垂死细胞、已死细胞、病变细胞、微生物的结构成分或肿瘤细胞相关分子等，以协调下游的炎症反应或抗肿瘤反应等。专业抗原呈递细胞包括巨噬细胞、B细胞、朗格汉斯细胞和树突状细胞等。先天性免疫细胞与适应性免疫细胞之间交叉呈递的过程对于激活适应性免疫系统也至关重要。比如，抗原呈递细胞介导抗原向初始未致敏T细胞的加工处理和交叉呈递，从而导致T细胞活化。先天性免疫系统和适应性免疫系统之间相互作用的关键是抗原呈递细胞通过吞噬作用吞噬靶标微生物或靶细胞(如细菌、被感染细胞或者肿瘤细胞等)的能力，吞噬是一个多步骤的细胞过程，涉及靶标微生物或靶细胞的识别、细胞吞噬和溶酶体消化等步
骤，受靶标微生物或靶细胞与吞噬细胞之间的受体-配体相互作用的调节。尽管健康的组织细胞表达抗吞噬作用的分子以避免其被吞噬细胞所吞噬清除，但是肿瘤细胞却可以非常狡猾地依赖类似的机制来逃避免疫系统介导的识别、杀伤与清除。比如，其中一种重要机制是，肿瘤细胞依赖于表达“别吃我”信号，包括程序性死亡受体配体1(PD-L1)、CD47、CD24、β2微球蛋白(B2M)等信号分子，实现强化吞噬细胞相关的抑制性信号从而抑制吞噬细胞对其的吞噬与清除；上述这些信号分子分别与吞噬细胞的程序性细胞死亡受体1(PD-1)、信号调节蛋白α(SIRPα)、选择素-10(Selectin-10)、白细胞免疫球蛋白样受体亚家族B成员1(LILRB1)结合从而抑制肿瘤细胞被吞噬细胞的吞噬与清除，进而实现免疫逃逸。
[0005]迄今为止，最具革命性的癌症免疫疗法之一是免疫检查点调节剂，尤其是免疫检查点抑制剂。人体免疫系统需要许多的制衡机制，从而实现保护自身免于病原体侵袭的同时又避免出现攻击自身正常细胞的情况。为此，免疫系统采用称为“免疫检查点”(如PD-1)的蛋白质去抑制免疫反应。意外的是，多年研究表明某些肿瘤会大量表达免疫检查点相关信号分子配体(如PD-L1)去抑制甚至阻止免疫反应，从而免于受到免疫系统的攻击，就好像肿瘤细胞对免疫系统踩下了刹车一样，达到免疫逃逸的目的，比如通过免疫抑制性信号通路PD-1/PD-L1来抑制肿瘤细胞被吞噬细胞所吞噬与清除。已发现的免疫检查点抑制剂中，尤以靶向免疫检查点PD-1及其配体PD-L1的抑制剂最为有代表性与治疗前景，该类抑制剂可以靶向肿瘤分子标记物PD-L1及其受体PD-1，阻断肿瘤细胞对于免疫细胞的抑制，如同松开了肿瘤细胞对免疫系统踩下的刹车，使得免疫系统重新识别并杀伤相应的肿瘤。2014年，FDA提前批准了史上首个肿瘤免疫药物——默沙东的PD-1单抗抑制剂Keytruda。2016年公开的长期数据显示，Keytruda显著提高了晚期黑色素瘤患者的存活时间：40％接受治疗患者(共计655人)存活时间超过3年，与之鲜明对比的是免疫疗法问世之前的治疗方式仅能让患者存活几个月。现年95岁高龄的美国前总统吉米
·
卡特便是该药物的长期使用者。2017年5月，Keytruda再次获得了FDA的快速批准，成为首例FDA批准的基于肿瘤生物标志物而不区分肿瘤来源的抗癌药物，堪称针对多种类型实体瘤的广谱抗癌药。2018年末及2019年上半年，中国药企君实生物、信达生物与恒瑞医药的国产PD-1抗体药也先后获批上市。
[0006]另一种极有前景的癌症免疫疗法是细胞疗法，即将免疫细胞在体外扩增、激活、然后回输到体内来治疗疾病的方法。该类疗法的成功问世具有里程碑意义，代表了新的癌症治疗范式的转变，大大增加了人类治疗肿瘤的选择与把握。至今，陆续有淋巴因子激活的杀伤细胞(Lymphokine-Activated Killer，LAK)疗法、细胞因子诱导的杀伤细胞(Cytokine-Induced Killer，CIK)疗法以及加强型的树突状细胞和淋巴细胞混合培养和回输(DC-CIK)细胞疗法问世，进而有肿瘤浸润淋巴细胞(Tumor Infiltrating Lymphocytes，TIL)疗法和T细胞受体嵌合(T Cell Receptor，TCR)T细胞疗法应用于临床试验，以及基于合成生物学人工设计的嵌合抗原受体(Chimeric Antigen Receptor，CAR)T细胞疗法，将编码CAR分子的基因通过载体转入T细胞，使T细胞表达CAR分子的治疗方式，且后者在治疗淋巴癌等血液癌症患者上展现极佳的疗效，并且2017年诺华的CAR-T细胞疗法Kymriah获得FDA全票批准上市，是人类史上首个得到FDA批准的基因疗法，用于治疗B细胞前体急性淋巴性白血病。
[0007]种种细胞疗法出世，推动着整个肿瘤免疫治疗突飞猛进。然而，在实体肿瘤微环境中，肿瘤细胞依赖于本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种吞噬细胞嵌合抗原受体，其特征在于，包括：a)胞外靶标分子结合结构域，用于特异性结合靶标分子；b)胞内信号传导结构域，包括至少一个胞内激活信号传导结构域；所述胞内激活信号传导结构域的激活至少依赖于所述胞外靶标分子结合结构域与所述靶标分子的结合；所述胞内激活信号传导结构域含有具有催化功能基团的分子或片段；所述吞噬细胞包括巨噬细胞、单核细胞、中性粒细胞、肥大细胞、树突状细胞以及B细胞；和c)跨膜区结构域，用于连接所述胞外靶标分子结合结构域和所述胞内信号传导结构域，并将二者固定在细胞膜上。2.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述胞内激活信号传导结构域包括受体型络氨酸激酶、非受体型酪氨酸激酶、受体型络氨酸激酶片段、非受体型络氨酸激酶片段中的至少一种；优选地，所述络氨酸激酶选自SYK、ZAP70、ABL1、ARG、ACK1、TNK1、CSK、MATK、FAK、PYK2、FES、FER、FRK、BRK、SRMS、JAK1、JAK2、JAK3、TYK2、SRC、FGR、FYN、YES1、BLK、HCK、LCK、LYN、TEC、BMX、BTK、ITK、TXK、AATK、AATYK、AATYK2、AATYK3、ACH、ALK、ARK、AXL、Bek、Bfgfr、BRT、Bsk、C-FMS、CAK、CCK4、CD115、CD135、CDw135、Cek1、Cek10、Cek11、Cek2、Cek3、Cek5、Cek6、Cek7、CFD1、CKIT、CSF1R、DAlk、DDR1、DDR2、Dek、DKFZp434C1418、DRT、DTK、Ebk、ECK、EDDR1、Eek、EGFR、Ehk2、Ehk3、Elk、EPH、EPHA1、EPHA2、EPHA6、EPHA7、EPHA8、EPHBl、EPHB2、EPHB3、EPHB4、EphB5、ephrin-B3、EPHT、EPHT2、EPHT3、EPHX、ERBB、ERBB1、ERBB2、ERBB3、ERBB4、ERK、Eyk、FGFR1、FGFR2、FGFR3、FGFR4、FLG、FLK1、FLK2、FLT1、FLT2、FLT3、FLT4、FMS、Fv2、HBGFR、HEK11、HEK2、HEK3、HEK5、HEK6、HEP、HER2、HER3、HER4、HGFR、HSCR1、HTK、IGF1R、INSR、INSRR、IR、IRR、JTK12、JTK13、JTK14、JWS、K-SAM、KDR、KGFR、KIA0641、KIAA1079、KIAA1459、Kil、Kin15、Kin16、KIT、KLG、LTK、MCF3、Mdk1、Mdk2、Mdk5、MEhk1、MEN2A/B、Mep、MER、MERTK、MET、M1k1、M1k2、Mrk、MST1R、MTC1、MUSK、Myk1、N-SAM、NEP、NET、Neu、NGL、NOK、nork、Nsk2、NTRK1、NTRK2、NTRK3、NTRK4、NTRKR、NTRKR2、NTRKR3、Nuk、NYK、PCL、PDGFR、PDGFRA、PDGFRB、PHB6、PTK、PTK3、PTK7、RET、RON、ROR1、ROR2、ROS1、RSE、RTK、RYK、SEA、Sek2、Sek3、Sek4、Sfr、SKY、STK、STK1、TEK、TIE、TIE1、TIE2、TIF、TKT、TRK、TRKA、TRKB、TRKC、TRKE、TYK1、TYRO10、Tyro11、TYRO3、Tyro5、Tyro6、TYRO7、UFO、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、Vik、YK1、Yrk中的至少一种；优选地，所述胞内激活信号传导结构域包含含有SEQ ID NO：042的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：044的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：046的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：048的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：050的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：052的氨基酸序列；优选地，所述胞外靶标分子结合结构域结合的靶标分子包含下组的分子的至少一种：免疫抑制性信号相关分子、肿瘤表面抗原分子标志物、细胞表面特定的抗原肽-组织相容性复合体分子；优选地，所述胞外靶标分子结合结构域包含选自下组的分子的靶标分子结合结构域：PD-1、PD-1截短体、PD-1蛋白突变体、PD-L1的抗体及PD-L1结合片段；优选地，所述胞外靶标分子结合结构域包含含有SEQ ID NO：001的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：003的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：005的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：007、含有SEQ ID NO：009的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：011的氨基酸序列；
优选地，所述跨膜区结构域选自下组的跨膜蛋白的跨膜结构域，跨膜蛋白包含PD-1、PD-L1、PD-L2、4-1BB、4-1BBL、ICOS、GITR、GITRL、OX40、OX40L、CD40、CD40L、CD86、CD80、CD2、CD28、B7-DC、B7-H2、B7-H3、B7-H4、B7-H5、B7-H6、B7-H7、VSIG-3、VISTA、SIRPα、Siglec-1、Siglec-2、Siglec-3、Siglec-4、Siglec-5、Siglec-6、Siglec-7、Siglec-8、Siglec-9、Siglec-10、Siglec-11、Siglec-12、Siglec-14、Siglec-15、Siglec-16、DAP10、DAP12、NKG2A、NKG2C、NKG2D、LIR1、KIR、KIR2DL1、KIR2DL1、KIR2DL2、KIR2DL3、KIR2DL4、KIR2DL5、KIR2DL5B、KIR2DS1、KIR2DS3、KIR2DS4、KIR2DS5、KIR3DL1、KIR3DL2、KIR3DL3、KIR3DS1、KLRG1、KLRG2、LAIR1、LAIR2、LILRA3、LILRA4、LILRA5、LILRB1、LILRB2、LILRB3、LILRB4、LILRB5、284、BTLA、CD160、LAG-3、CTLA-4、CD155、CD112、CD113、TIGIT、CD96、CD226、TIM-1、TIM-3、TIM-4、Galectin-9、CEACAM-1、CD8a、CD8b、CD4、MERTK、Axl、Tyro3、BAI1、DAP12、MRC1、FcγR1、FcγR2A、FcγR2B1、FcγR2B2、FcγR3A、FcγR3B、FcεR2、FcεR1、FcRn、Fcα/μR或FcαR1中的至少一种；优选地，所述跨膜区结构域包含含有SEQ ID NO：012的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：014的氨基酸序列；优选地，所述胞外靶标分子结合结构域与所述跨膜区结构域之间还包括胞外间隔区结构域；优选地，所述胞外间隔区结构域包含含有SEQ ID NO：016的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：018的氨基酸序列；优选地，所述嵌合抗原受体还包括胞内检测信号传导结构域；所述胞内检测信号传导结构域与所述胞内激活信号传导结构域连接，位于所述跨膜区结构域和所述胞内激活信号传导结构域之间；优选地，所述胞内检测信号传导结构域包含至少一个基于免疫受体酪氨酸的活化基序(ITAM)；优选地，所述胞内检测信号传导结构域包含选自下组的分子的信号传导结构域的至少一种：CD244、BLAME、BTLA、CD3δ、CD3γ、CD3ε、CD3ζ、CD5、CD6、CD23、CD28、CD31、CD72、CD84、CD229、CD300a、CD300b、CD300c2、CD300d、CD300e、CD300f、CEACAM-1、CEACAM-3、CEACAM-2、CLEC-1、CLEC-2、CLEC4B2、CLEC-2A、CLEC2L、CRACC、CTLA-4、DAP10、DAP12、DCAR、DCIR、DCIR4、Dectin-1、DNAM-1、Fcα、FcεRIα、FcεRIβ、FcγRIB、FcγRIII、FcμR/FAIM3、FCAR、FcγRI、FcγRII、FcγRIII、FcγRIIA、FcγRIIB、FcγRIIC、FcγRIIIA、FcγRIIIB、FCRL1、FCRL2、FCRL3、FCRL4、FCRL5、FCRL5、FCRL6、G6b、Integrinα2bβ3、Integrinβ3、KIR、KIR2DL1、KIR2DL1、KIR2DL2、KIR2DL3、KIR2DL4、KIR2DL5、KIR2DL5B、KIR2DS1、KIR2DS3、KIR2DS4、KIR2DS5、KIR3DL1、KIR3DL2、KIR3DL3、KIR3DS1、KLRG1、KLRG2、LAIR1、LAIR2、LILRA3、LILRA4、LILRA5、LILRB1、LILRB2、LILRB3、LILRB4、LILRB5、MDL-1、MICL、NFAM1、NKp30、NKp44、NKp46、NKp80、NTB-A、PD-1、PDCD6、PILR-α、Siglec-2、Siglec-3、Siglec-5、Siglec-14、Siglec-6、Siglec-7、Siglec-8、Siglec-9、Siglec-10、Siglec-11、Siglec-12、Siglec-14、Siglec-15、Siglec-16、Siglec-E、Siglec-F、Siglec-G、Siglec-H、SIRPβ1、SIRPβ1/γ、SIRPβ1a、SIRPβ1b、SIRPβ2、SLAM、TIGIT、TREM-3、TREM-4、TREML1、TREML2：优选地，所述胞内检测信号传导结构域包含含有SEQ ID NO：020的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：022的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：024的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：026的氨
基酸序列、含有SEQ ID NO：028的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：030的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：032的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：034的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：036的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：038的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：040的氨基酸序列；优选地，所述胞内间隔区结构域；所述胞内间隔区结构域位于所述跨膜区结构域和所述胞内信号传导结构域之间并将这两者连接在一起；优选地，所述胞内间隔区结构域为跨膜区结构域之延伸，包含选自下组的分子的至少一种：PD-1、PD-L1、PD-L2、4-1BB、4-1BBL、ICOS、GITR、GITRL、OX40、OX40L、CD40、CD40L、CD86、CD80、CD2、CD28、B7-DC、B7-H2、B7-H3、B7-H4、B7-H5、B7-H6、B7-H7、VSIG-3、VISTA、SIRPα、Siglec-1、Siglec-2、Siglec-3、Siglec-4、Siglec-5、Siglec-6、Siglec-7、Siglec-8、Siglec-9、Siglec-10、Siglec-11、Siglec-12、Siglec-14、Siglec-15、Siglec-16、DAP10、DAP12、NKG2A、NKG2C、NKG2D、LIRl、KIR、KIR2DL1、KIR2DL1、KIR2DL2、KIR2DL3、KIR2DL4、KIR2DL5、KIR2DL5B、KIR2DS1、KIR2DS3、KIR2DS4、KIR2DS5、KIR3DL1、KIR3DL2、KIR3DL3、KIR3DS1、KLRG1、KLRG2、LAIR1、LAIR2、LILRA3、LILRA4、LILRA5、LILRB1、LILRB2、LILRB3、LILRB4、LILRB5、2B4、BTLA、CD160、LAG-3、CTLA-4、CD155、CD112、CD113、TIGIT、CD96、CD226、TIM-1、TIM-3、TIM-4、Galectin-9、CEACAM-1、CD8a、CD8b、CD4、MERTK、Ax1、Tyro3、BAI1、DAP12、MRC1、FcγR1、FcγR2A、FcγR2B1、FcγR282、FcγR3A、FcγR3B、FcεR2、FcεR1、FcRn、Fcα/μR或FcαR1；优选地，所述胞内间隔区结构域包含含有SEQ ID NO：054的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：056的氨基酸序列；优选地，所述嵌合抗原受体还包括胞内铰链结构域，胞内铰链结构域可以具有任何合适的长度以连接至少两个感兴趣的结构域，并且优选设计为足够柔性以便允许其连接的一个或两个结构域的正确折叠和/或功能和/或活性；所述胞内检测信号结构域和所述胞内激活信号结构域通过所述胞内铰链结构域连接；优选地，所述胞内铰链结构域包含含有SEQ ID NO：058的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：060的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：062的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：064的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：066的氨基酸序列；优选地，所述嵌合抗原受体包括：a)胞外靶标分子结合结构域，包含含有SEQ ID NO：001的氨基酸序列、所述胞外结构域包含含有SEQ ID NO：003的氨基酸序列、所述胞外结构域包含含有SEQ ID NO：005的氨基酸序列、所述胞外结构域包含含有SEQ ID NO：007、所述胞外结构域包含含有SEQ ID NO：009的氨基酸序列、所述胞外结构域包含含有SEQ ID NO：011的氨基酸序列；b)跨膜区结构域，包含含有SEQ ID NO：012的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：014的氨基酸序列；c)胞外间隔区结构域，所述胞外靶标分子结合结构域和所述跨膜区结构域通过所述胞外间隔区结构域连接；所述胞外间隔区结构域包含含有SEQ ID NO：016的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：018的氨基酸序列；和d)细胞内信号传导结构域，包含含有SEQ ID NO：020的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：022的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：024的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：026的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：028的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：030的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：032
的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：034的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：036的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：038的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：040的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：042的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：044的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：046的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：048的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：050的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：052的氨基酸序列；优选地，所述嵌合抗原受体包括：a)胞外靶标分子结合结构域，包含含有SEQ ID NO：001的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：003的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：005的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：007、含有SEQ ID NO：009的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：011的氨基酸序列；b)跨膜区结构域，包含含有SEQ ID NO：012的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：014的氨基酸序列；c)胞外间隔区结构域，所述胞外靶标分子结合结构域和所述跨膜区结构域通过所述胞外间隔区结构域连接；所述胞外间隔区结构域包含含有SEQ ID NO：016的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：018的氨基酸序列；和d)胞内激活信号传导结构域，包含含有SEQ ID NO：042的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：044的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：046的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：048的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：050的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：052的氨基酸序列；优选地，所述嵌合抗原受体包括：a)胞外靶标分子结合结构域，包含含有SEQ ID NO：001的氨基酸序列、所述胞外结构域包含含有SEQ ID NO：003的氨基酸序列、所述胞外结构域包含含有SEQ ID NO：005的氨基酸序列、所述胞外结构域包含含有SEQ ID NO：007、所述胞外结构域包含含有SEQ ID NO：009的氨基酸序列、所述胞外结构域包含含有SEQ ID NO：011的氨基酸序列；b)跨膜区结构域，包含含有SEQ ID NO：012的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：014的氨基酸序列；c)胞外间隔区结构域，所述胞外靶标分子结合结构域和所述跨膜区结构域通过所述胞外间隔区结构域连接；所述胞外间隔区结构域包含含有SEQ ID NO：016的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：018的氨基酸序列；d)胞内检测信号传导结构域，包含含有SEQ ID NO：020的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：022的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：024的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：026的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：028的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：030的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：032的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：034的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：036的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：038的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：040的氨基酸序列；和e)胞内激活信号传导结构域，包含含有SEQ ID NO：042的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：044的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：046的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：048的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：050的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：052的氨基酸序列；优选地，所述嵌合抗原受体包括：a)胞外靶标分子结合结构域，包含含有SEQ ID NO：001的氨基酸序列、所述胞外结构域包含含有SEQ ID NO：003的氨基酸序列、所述胞外结构域包含含有SEQ ID NO：005的氨基酸序列、所述胞外结构域包含含有SEQ ID NO：007、所述胞外结构域包含含有SEQ ID NO：009
的氨基酸序列、所述胞外结构域包含含有SEQ ID NO：011的氨基酸序列；b)跨膜区结构域，包含含有SEQ ID NO：012的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：014的氨基酸序列；c)胞外间隔区结构域，所述胞外靶标分子结合结构域和所述跨膜区结构域通过所述胞外间隔区结构域连接；所述胞外间隔区结构域包含含有SEQ ID NO：016的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：018的氨基酸序列；d)胞内检测信号传导结构域，包含含有SEQ ID NO：020的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：022的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：024的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：026的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：028的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：030的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：032的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：034的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：036的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：038的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：040的氨基酸序列；e)胞内激活信号传导结构域，包含含有SEQ ID NO：042的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：044的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：046的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：048的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：050的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：052的氨基酸序列；和f)胞内铰链结构域，所述细胞内检测信号传导结构域和所述细胞内激活信号传导结构域通过所述铰链结构域连接；所述铰链结构域包含含有SEQ ID NO：058的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：060的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：062的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：064的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：066的氨基酸序列；优选地，所述嵌合抗原受体包括：a)胞外靶标分子结合结构域，包含含有SEQ ID NO：001的氨基酸序列、所述胞外结构域包含含有SEQ ID NO：003的氨基酸序列、所述胞外结构域包含含有SEQ ID NO：005的氨基酸序列、所述胞外结构域包含含有SEQ ID NO：007、所述胞外结构域包含含有SEQ ID NO：009的氨基酸序列、所述胞外结构域包含含有SEQ ID NO：011的氨基酸序列；b)跨膜区结构域，包含含有SEQ ID NO：012的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：014的氨基酸序列；c)胞外间隔区结构域，所述胞外靶标分子结合结构域和所述跨膜区结构域通过所述胞外间隔区结构域连接；所述胞外间隔区结构域包含含有SEQ ID NO：016的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：018的氨基酸序列；和d)细胞内信号传导结构域，包含含有SEQ ID NO：020的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：022的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：024的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：026的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：028的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：030的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：032的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：034的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：036的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：038的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：040的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：042的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：044的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：046的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：048的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：050的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：052的氨基酸序列和e)胞内间隔区结构域，所述跨膜区结构域和所述细胞内信号传导结构域通过所述胞内间隔区结构域连接；所述胞内间隔区结构域包含含有SEQ ID NO：054的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：056的氨基酸序列；
优选地，所述嵌合抗原受体包括：a)胞外靶标分子结合结构域，包含含有SEQ ID NO：001的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：003的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：005的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：007、含有SEQ ID NO：009的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：011的氨基酸序列；b)跨膜区结构域，包含含有SEQ ID NO：012的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：014的氨基酸序列；c)胞外间隔区结构域，所述胞外靶标分子结合结构域和所述跨膜区结构域通过所述胞外间隔区结构域连接；所述胞外间隔区结构域包含含有SEQ ID NO：016的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：018的氨基酸序列；和d)胞内激活信号传导结构域，包含含有SEQ ID NO：042的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：044的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：046的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：048的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：050的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：052的氨基酸序列；和e)胞内间隔区结构域，所述跨膜区结构域和所述细胞内激活信号传导结构域通过所述胞内间隔区结构域连接；所述胞内间隔区结构域包含含有SEQ ID NO：054的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：056的氨基酸序列；优选地，所述嵌合抗原受体包括：a)胞外靶标分子结合结构域，包含含有SEQ ID NO：001的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：003的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：005的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：007、含有SEQ ID NO：009的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：011的氨基酸序列；b)跨膜区结构域，包含含有SEQ ID NO：012的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：014的氨基酸序列；c)胞外间隔区结构域，所述胞外靶标分子结合结构域和所述跨膜区结构域通过所述胞外间隔区结构域连接；所述胞外间隔区结构域包含含有SEQ ID NO：016的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：018的氨基酸序列；d)胞内检测信号传导结构域，包含含有SEQ ID NO：020的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：022的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：024的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：026的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：028的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：030的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：032的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：034的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：036的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：038的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：040的氨基酸序列；e)胞内激活信号传导结构域，包含含有SEQ ID NO：042的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：044的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：046的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：048的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：050的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：052的氨基酸序列；和f)胞内间隔区结构域，所述跨膜区结构域和所述细胞内检测信号传导结构域通过所述胞内间隔区结构域连接；所述胞内间隔区结构域包含含有SEQ ID NO：054的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：056的氨基酸序列；优选地，所述嵌合抗原受体包括：a)胞外靶标分子结合结构域，包含含有SEQ ID NO：001的氨基酸序列含有SEQ ID NO：003的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：005的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：007、含有SEQ ID NO：009的氨基酸序列、含有SEQ ID NO：011的氨基酸序列；
ID NO：039的核酸序列、含有SEQ ID NO：041的核酸序列；优选地，所述胞内间隔区结构域核酸片段包含...

【专利技术属性】
技术研发人员：李晓东，
申请(专利权)人：北京质恒科技有限公司，
类型：发明
国别省市：