本发明专利技术公开了高血脂分子分型与遗传易感性生物标志物及其应用，本发明专利技术发现AhR分子与高血脂的发生发展密切相关，通过检测AhR rs2066853的基因型可预测高血脂发生、判断高血脂发展程度和评估高血脂遗传易感性和患病风险，对于更加个体化、准确、灵敏地预测和鉴别高血脂及其并发症动脉粥样硬化、高血压、冠心病、脑卒中等相关疾病的早期发病情况、恶性程度、产前筛查/诊断、遗传咨询具有重要的意义。
【技术实现步骤摘要】
高血脂分子分型与遗传易感性生物标志物及其应用
本专利技术属于检验医学、临床医学、生物技术、生物化学及分子生物学领域，涉及高血脂分子分型与遗传易感性生物标志物及其应用。
技术介绍
高脂血症是指血脂水平过高，可直接引起一些严重危害人体健康的疾病，如动脉粥样硬化、高血压、冠心病、脑血管病、胰腺炎等。高脂血症可分为原发性和继发性两类。原发性与先天性和遗传有关，是由于单基因缺陷或多基因缺陷，使参与脂蛋白转运和代谢的受体、酶或载脂蛋白异常所致，或由于环境因素(饮食、营养、药物)和通过未知的机制而致。高脂血症的临床表现主要是脂质在真皮内沉积所引起的黄色瘤和脂质在血管内皮沉积所引起的动脉硬化。尽管高脂血症可引起黄色瘤，但其发生率并不很高；而动脉粥样硬化的发生和发展又是一种缓慢渐进的过程。因此在通常情况下，多数患者并无明显症状和异常体征。不少人是由于其他原因进行血液生化检验时才发现有血浆脂蛋白水平升高。关于高脂血症的诊断标准，目前国际和国内尚无统一的方法。既往认为血浆总胆固醇浓度>5.17mmol/L(200mg/dl)可定为高胆固醇血症，血浆三酰甘油浓度>2.3mmol/L(200mg/dl)为高三酰甘油血症。各地由于所测人群不同以及所采用的测试方法的差异等因素，所制定的高脂血症诊断标准不一。但为了防治动脉粥样硬化和冠心病，合适的血浆胆固醇水平应该根据患者未来发生心脑血管疾病的风险来决定，发生风险越高，合适的血浆胆固醇水平应该越低。
技术实现思路
针对上述问题，本专利技术的目的是提供一种高血脂诊断和分型的超敏生物标志物，该生物标志物用于高血脂筛查与临床鉴别具有高靶向性、稳定性、超灵敏的特点。为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：AhR作为生物标志物在制备用于高血脂诊断的试剂或试剂盒中的用途，所述生物标志物AhR的编码基因包括如SEQIDNO.1所示的核苷酸序列。所述AhR是一种HLHPAS结合蛋白家族的转录因子，传统上被作为生物体环境毒性和代谢酶的介导因子，其核苷酸编码具有芳香烃受体活性的多肽。近年来，一些研究逐渐显示该蛋白在心血管系统发育、功能形成和疾病发生等过程发挥重要作用，例如通过AhR基因敲除小鼠的研究，发现小鼠罹患多种典型症状，包括心肌肥大、血管重构和高血压等，而在ApoE缺失的动脉粥样硬化小鼠模型中，AhR基因的激活诱导血管炎症的发生，并促进动脉硬化程度，以上结论均说明AhR受体在心血管疾病的发生发展中具有重要影响，然而其对人类高血脂的系统作用机制及临床应用还少见报道。本专利技术首次发现了AhR可作为判断高血脂发生的生物标志物，可用于制备用于筛查高血脂或辅助高血脂病理鉴定、临床诊断、分子分型、生化检验、易感风险评估、产前筛查/诊断、遗传咨询的试剂、试剂盒及相关工具。作为本专利技术的优选实施方式，所述标志物通过以下方法进行高血脂诊断：检测样品基因组中的AhRrs2066853的基因型。具体地，提取样品中的DNA，通过测序或探针的方法检测基因组中的AhRrs2066853的基因型。本专利技术首次发现了AhRrs2066853的基因型与高血脂相关。作为本专利技术的优选实施方式，所述样品为血样。本专利技术还要求保护用于检测AhRrs2066853SNP位点的试剂在制备高血脂诊断试剂盒中的用途。本专利技术还要求保护一种高血脂诊断试剂，所述试剂用于检测AhRrs2066853SNP位点。作为本专利技术的优选实施方式，所述试剂为包括用于检测AhRrs2066853SNP位点的引物或探针。更优选地，所述用于检测AhR基因表达的引物包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示，所述下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示；SEQIDNO.2：5’-GATTGATTTTGAAGACCTCA-3’，SEQIDNO.3：5’-CTGAAGGTACTGAAGGTATGAAGGGAG-3’。通过上述引物可对基因组相关基因序列进行扩增，进一步通过测序的方法可得到具体的基因型。更优选地，所述探针的核苷酸序列如SEQIDNO.4所示；SEQIDNO.4：5’-cy5-ccattttgaagacatcagacacatgcagaatgg-bhq2-3’。本专利技术还要求保护一种试剂盒，所述试剂盒用于高血脂及其并发症动脉粥样硬化、高血压、冠心病、脑卒中等相关疾病的早期预警、危险分层、产前筛查/诊断、遗传咨询，所述试剂盒包括所述用于检测AhRrs2066853SNP位点的试剂。本专利技术相对于现有技术的有益技术效果如下：本专利技术发现AhR分子与高血脂的发生发展密切相关，通过检测AhRrs2066853的基因型可预测高血脂发生、判断高血脂发展程度和评估高血脂遗传易感性和患病风险，对于更加个体化、准确、灵敏地预测和鉴别高血脂的早期发病情况、恶性程度、产前筛查/诊断、遗传咨询具有重要的意义。附图说明图1为AhR用于高血脂的风险评估与遗传咨询分析结果(*P<0.05，**P<0.01)。图2为AhR用于高血脂患者的临床诊断的分析结果(*P<0.05，**P<0.01)。图3为AhR用于糖尿病合并高血脂的风险评估与遗传咨询(*P<0.05，**P<0.01)。具体实施方式为更好的说明本专利技术的目的、技术方案和优点，下面将结合附图和具体实施例对本专利技术作进一步说明。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，例如《分子克隆》(NewYork:ColdSpringHarborLaboratoryPress,1989)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。实施例1AhR用于高血脂的风险评估与遗传咨询1.受试群体所有研究对象来源于广东医科大学附属医院，依据患者血脂水平分为高脂血症组(A组)395例和非高脂血症组(B组)452例。依据《中国成人血脂异常防治指南》血脂水平分层标准，高脂血症的临床诊断如下：总胆固醇(TC)≥6.19mmol/L(240mg/dl)，甘油三酯(TG)≥2.27mmol/L(200mg/dl)，低密度脂蛋白(LDL)≥4.14mmol/L(160mg/dl)。2.基因组DNA提取和纯度检测采用TIANamp全血DNA提取试剂盒提取血液基因组DNA，步骤如下(具体本领域技术人员可根据使用的试剂盒说明书以及实际情况调整)：(1)取血液样品500品(于1.5ml的离心管中，加入800中，的红细胞裂解液CL，充分颠倒混匀至红细胞充分裂解，12000rpm离心3分钟，弃去上清，留下细胞核沉淀。(2)向细胞核沉淀中加入200沉淀缓冲液GS，彻底震荡混匀。(3)加入20荡蛋白酶K，混匀。(4)加入200荡混的缓冲液GB，颠倒混匀充分，56℃温浴20分钟，其间颠倒混匀3～4次，直至溶液清亮。(5)加入200溶液无水乙醇，颠倒混匀充分。...
【技术保护点】
1.AhR作为生物标志物在制备用于高血脂诊断的试剂或试剂盒中的用途，其特征在于，所述生物标志物AhR的编码基因包括如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。/n
【技术特征摘要】
1.AhR作为生物标志物在制备用于高血脂诊断的试剂或试剂盒中的用途，其特征在于，所述生物标志物AhR的编码基因包括如SEQIDNO.1所示的核苷酸序列。
2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述标志物通过以下方法进行高血脂诊断：检测样品基因组中的AhRrs2066853的基因型。
3.如权利要求2所述的用途，其特征在于，所述样品为血样。
4.用于检测AhRrs2066853SNP位点的试剂在制备高血脂诊断试剂盒中的用途。
5.一种高血脂诊断试剂，其特征在于，所述试剂用于检测AhRrs2066853SNP位点。
6.如权利要求5所述的试剂，其特征在于，所述试剂包括用于检测AhRrs2066853SNP位点的引物或探针。
7.如权利要求6所述...
【专利技术属性】
技术研发人员：雷桅，黄石安，税晓容，
申请(专利权)人：雷桅，
类型：发明
国别省市：广东;44
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。