一种脱细胞基质与环戊烯酮类前列腺素组合物的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种脱细胞基质与环戊烯酮类前列腺素组合物的制备方法，本发明专利技术由负载于聚己内酯/明胶电纺纳米纤维膜的牙周韧带细胞脱细胞基质与15d‑PGJ

【技术实现步骤摘要】
一种脱细胞基质与环戊烯酮类前列腺素组合物的制备方法
本专利技术属于组织工程与再生医学领域，涉及一种脱细胞基质与环戊烯酮类前列腺素组合物的制备方法，是一种由牙周韧带细胞膜片的脱细胞基质与15d-PGJ2-NC组合的组合物制备方法，可用于牙周缺损修复。
技术介绍
慢性牙周炎是一种以牙周组织破坏为特征的慢性感染性疾病，在我国发病率高达80％，是成年人缺牙的首要原因。牙周组织由复杂的软硬组织构成，包括牙槽骨，牙周韧带和牙骨质，修复牙周组织缺损是牙周治疗的最终目标。传统的牙周组织再生疗法，如骨移植、引导组织再生术、生长因子、局部应用釉基质蛋白等，可使牙周膜、牙骨质和牙槽骨获得一定程度的再生，但其再生是极有限的且难以预计的。而且，牙周炎导致的牙周组织缺损处于炎性环境中，因此如何在牙周炎性微环境中修复牙周缺损仍是一大难题。研究表明，牙周韧带细胞与其他牙周来源的细胞如牙龈结缔组织和牙槽骨细胞相比更适合作为牙周再生的种子细胞。采用体外培养患者自身的带有完整细胞外基质的牙周韧带干细胞膜片后再植的细胞膜片技术，使牙周韧带细胞直接接触到牙根表面促进组织原位再生本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种脱细胞基质与环戊烯酮类前列腺素组合物的制备方法，所述环戊烯酮类前列腺素为15d-PGJ

【技术特征摘要】
1.一种脱细胞基质与环戊烯酮类前列腺素组合物的制备方法，所述环戊烯酮类前列腺素为15d-PGJ2-NC，其特征在于，通过以下步骤实现：
(1)脱细胞基质的制备：
(a)将牙周韧带细胞以高密度接种于12孔细胞培养板；
(b)培养板中加入含一定浓度抗坏血酸的完全培养基，培养获得牙周韧带细胞膜片；
(c)采用静电纺丝法获得PCL/GE电纺纳米纤维膜，经紫外消毒后包裹上牙周韧带细胞膜片；
(d)采用表面活性剂联合DNA酶处理上述细胞膜片，漂洗后获得相应的脱细胞基质；
(2)15d-PGJ2-NC的制备，采用乳化溶剂蒸发法：
将PLGA、司班60、硬脂酸甘油酯、15d-PGJ2，溶于丙酮中形成油相；水相为吐温80充分溶于ddH2O，将溶解后的油相缓慢加入水相中，边加边搅拌，持续搅拌10分，旋转蒸发，制备的15d-PGJ2-NC溶液的药物终浓度为100mg/L；
(3)脱细胞基质与15d-PGJ2-NC组合物：
脱细胞基质与15d-PGJ2-NC分别包装，15d-PGJ2-NC负载明在明胶海绵上，明胶海绵负载的15d-PGJ2-NC浓度为100mg/L，体积为25μL。


2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(a)中牙...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴燕岷，柳佳美，黄佳萍，
申请(专利权)人：浙江大学医学院附属第二医院，
类型：发明
国别省市：浙江;33